Sigara insan Primate Beyin | Stereology: sayar ne bilmek
Summary
Primat beynin anatomik organizasyonu, insanlarda normal ve patolojik durumları önemli bilgiler sağlayabilir. Hakkında tarafsız stereology, doğru ve etkin bir biçimde, belirli bir referans alanı toplam nöron numarası (veya başka bir hücre tipi) tahmin etmek için bir yöntemdir<sup> 1</sup>.
Abstract
Insan dışı primat normal insan beyninin fonksiyonu ve hastalık süreçleri anlamak için önemli bir translasyonel türüdür. Hakkında tarafsız stereology, doku bölümlerde biyolojik nesnelerin ölçümü için state-of-the-art olarak kabul edilen yöntem<sup> 2</sup> Memeli beyindeki biyolojik özellikleri için güvenilir yapısal veri oluşturur<sup> 3</sup>. Bu yaklaşımın anahtar bileşenleri tarafsız içinde hücre sayıları ve boyutu, lif ve kılcal uzunlukları, yüzey alanları, bölgesel hacimleri ve mekansal dağılımları, biyolojik nesnelerin ölçümü ile birlikte anatomik olarak tanımlanmış yapılar (referans alanlarda), (sistematik-random) örnekleme referans alan<sup> 4</sup>. Önceki yöntemlerine göre bu stereolojik yaklaşımlar avantajları arasında hatalı varsayımlar ve doğrulanabilir olmayan modeller kaynaklanan sistematik (non-random) hata bilinen tüm kaynakları kaçınma. Bu çalışmada, bilgisayarlı stereology (vervet maymun beynin frontal korteks nöronal toplam nüfusun tahmin etmek için biyolojik bir başvuru belgeleri<em> Chlorocebus aethiops sabeus</em>), Iki piyasada bulunan stereology programları, BioQuant Yaşam Bilimleri ve Stereologer (Şekil 1) yardımı ile. Kontrast ve hem de BioQuant sonuçların karşılaştırılması ve ek olarak<em> Stereologer</em> Sistemleri, bu çalışma için ayrıntılı bir protokol sağlar<em> Stereologer</em> Sistem.
Protocol
Discussion
Primat beyin hakkında tarafsız stereology diğer biyolojik örneklerin benzer. Bununla birlikte, 50μm az dilimlenmiş vervet maymun tek bir yarımkürede 1200'den fazla bölüm verir primat beynin büyüklüğü göz önüne alındığında, dikkatli bir işleme planı önerilir. Öncelikle stereotaxically 1cm blokları, blok ve konular arasındaki bölümün standart bir düzlemde sağlar bloklar arasında kısmi bölümleri en aza indirir ve yönetilebilir büyüklükte bloklar 5 sağlar beynin engel…
Acknowledgements
Yazarlar Ikiel Ptito onun devam eden teknik destek için teşekkür etmek istiyorum. MP NSERC hibe.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Stereologer | Stereology Resource Center (Chester, MD) | www.disector.com | ||
| Stereology Tool-Kit Stereologer system | BioQuant Life Sciences (Nashville, TN) | |||
| StereoInvestigator | MicroBright Field (Willston, VT) |
References
- West, M., Slomianka, L., Gundersen, H. Unbiased stereological estimation of the total number of neurons in the subdivisions of the rat hippocampus using the optical fractionator. Aat Rec. 231, 482-497 (1991).
- Saper, C. B. Any way you cut it: a new journal policy for the use of unbiased counting methods. J Comp Neurol. 364, 5-5 (1996).
- Sterio, D. C. The unbiased estimation of number and sizes of arbitrary particles using the disector. J Microsc. 134, 127-136 (1984).
- Mouton, P. R. . Principles and Practices of Unbiased Stereology. , (2002).
- Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M. Dissecting the non-human primate brain in stereotaxic space. J Vis Exp. 29, (2009).
- Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M. Brain banking: Making the most of your research. J Vis Exp. 29, (2009).
- Manaye, K. F., Wang, P., O’Neil, J., Huafu, S., Tizabi, Y., Thompson, N., Ottinger, M. A., Ingram, D. K., Mouton, P. R. Neuropathological Quantification Of Dtg APP/PS1: Neuroimaging, Stereology, And Biochemistry. AGE. 29, 87-96 (2009).
- Burke, M. W., Palmour, R. M., Ervin, F. R., Ptito, M. Neuronal reduction in frontal cortex of primates after prenatal alcohol exposure. Neuroreport. 20, 13-17 (2009).
- Zangenehpour, S., Burke, M. W., Chaudhuri, A., Ptito, M. Batch immunostaining for large-scale protein detection in the whole monkey brain. J Vis Exp. 29, (2009).
