마우스 내유 상피 세포는 Lactogenic 차별 동안 Mammospheres를 형성
Summary
HC11 lactogenic 차별화는 mammospheres이라고 돔 구조의 형성에 의해 특징 수 있습니다. 구조 lactogenic 차별 quantifying에 투입 위상 콘트라스트 현미경에 의해 열거 수 있습니다.
Abstract
일반적으로 내유 마우스 상피 세포 배양에 lactogenic 분화의 정도를 결정하는 데 사용 phenotypic 측정 mammospheres이라고 돔 모양의 세포 구조의 형성이다<sup> 1</sup>. HC11 세포 라인은 내유 lactogenic 분화 모두의 규제 연구를위한 모델 시스템으로 채용되었습니다<em> 체외에서</em>과<em> 생체내에</em<sup> 2</sup>. HC11 세포 lactogenic 호르몬 치료에 대한 응답으로 우유 단백질을 차별하고 종합. 합류하는 HC11 마우스 상피 세포 내유의 성장에 따라, lactogenic 차별화는 dexamethasone, 인슐린 및 prolactin 포함한 lactogenic 호르몬 조합의 추가에 의해 유도된으로 DIP 언급했다. 차별화 유도 HC11 세포 1백20시간 게시물 분화의 유도 및 열거되었다 각 문화에 나타난 mammospheres의 수에 번에서 촬영했다. 개인 mammospheres의 크기는 분화의 정도와 연결합니다 그리고 이것은 차별 세포의 이미지에 그려져 있습니다.
Protocol
Discussion
위해서는이 기술에 대한 성공과 최고의 품질의 상피 세포가 lactogenic 호르몬으로 유도되고 이전에 합류 유지되어야합니다. 부량 어려운 만드는 수많은 mammospheres가있다 상황이있을 수 있습니다. 따라서, 정량 목적은 mammospheres의 숫자가 계산되는 수있는 때 시점에서 mammospheres을 사진에 좋습니다.
내유 상피 세포의 분화 lactogenic에 노출된 정도를 확인하는 데 사용되는 다양한 ?…
Acknowledgements
Congressionally 감독 의학 연구 기금 부여 (DAMD17 – 01-0264)에서 ML 커틀러와 ML 커틀러하는 방법 United States 군사 암 연구소에 기금이 작업을 지원합니다.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| RPMI | Invitrogen | 21870076 | ||
| Fetal Bovine Serum | Atlanta Biologicals | S11550 | ||
| L-Glutamine | Gibco | 25030 | ||
| PenStrep | Gibco | 15140 | ||
| Hepes | Quality Biologicals | 118089060 | ||
| EGF | Sigma | E9644 | ||
| Insulin | Gibco | 12585-014 | ||
| Dexamethasone | Sigma | D1756 | ||
| Microscope | Olympus | IX71 | ||
| Digital Camera | QImaging | Retiga 2000RV Fast 1394 |
References
- Blatchford, D. R., Hendry, K. A., Turner, M. D., Burgoyne, R. D., Wilde, C. J. Vectorial secretion by constitutive and regulated secretory pathways in mammary epithelial cells. Epithelial Cell Biol. 4, 8-16 (1995).
- Wang, W. Glucocorticoid induced expression of connective tissue growth factor contributes to lactogenic differentiation of mouse mammary epithelial cells. J Cell Physiol. 214, 38-46 (2008).
