Creazione di Murine aneurismi dell'aorta addominale Sperimentale con elastasi
Summary
Questo video mostra come per indurre aneurismi dell'aorta addominale (AAA) nei topi via transitoria infusione intraluminale di elastasi pancreatica porcina nel segmento infrarenale dell'aorta addominale. Il modello ha la possibilità di aggiungere visione ampia in biologia e la patologia di AAA per la nascita di numerose transgenici e topi knockout del gene.
Abstract
Transitori infusione intraluminale di elastasi pancreatica porcina nel segmento infrarenale dell'aorta addominale è il modello animale più usato di aneurisma dell'aorta addominale (AAA) da quando è stata descritta per la prima nei ratti da Anidjar e colleghi. 1 Il razionale per il suo sviluppo si è basata sulla natura interrotto di elastina osservato in AAA. Questo modello di ratto è stato modificato per produrre AAA nella regione aortica infrarenale di topi. 2 Il modello ha la possibilità di aggiungere visione ampia in biologia e la patologia di AAA per la nascita di numerose transgenici e topi knockout del gene. Inoltre, è una valida piattaforma per testare potenziali agenti terapeutici per AAA. In questo video, dimostriamo la procedura di elastasi infusione AAA utilizzato nel nostro laboratorio.
I topi vengono anestetizzati con isoflurano 2,5%, e una laparotomia viene eseguita in condizioni sterili. Il aortais addominale isolato con l'aiuto di un stereomicroscopio operativo (Leica). Dopo aver posizionato le legature temporaneo intorno dell'aorta prossimale e distale, un aortotomy viene creato alla biforcazione con la punta di un 30-gauge. Un calore-conica segmento di tubo in polietilene PE-10 è introdotto attraverso il aortotomy e assicurato. Il lume aortico è successivamente perfuso per 5-15 minuti a 100 mm Hg con soluzione salina di tipo I contenenti elastasi pancreatica porcina (4,5 U / mL; Sigma Chemical Co.). Dopo aver rimosso il catetere perfusione, la aortotomy viene riparato senza restringimento del lume.
Protocol
Discussion
Precedenti studi hanno notato notevoli lotto a lotto variazione sviluppo AAA da differenti preparazioni elastasi commerciale 3. Quindi, è fondamentale per il monitoraggio dei lotti di produzione così come di avere gruppi di controllo appropriate al fine di documentare la capacità della preparazione per indurre AAA.
È interessante notare che la suscettibilità allo sviluppo di AAA in questo modello dipende dal ceppo di topi utilizzato 3. Il mouse usato nel video corr…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Questo lavoro è stato la concessione SCCOR "Malattia AAA: Meccanismi, Stratificazione e trattamento" (P50 HL083800-03) dal National Institutes of Health
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Type I porcine pancreatic elastase | Reagent | Sigma | E1250 | |
| polyethylene tubing (PE-10) | CLAY ADAMS | 427400 | ||
| CHANGE-A-TIP | Bovie | 18010-00 (FST) | cautery knife | |
| LEICA MZ6 | Leica | stereomicroscope | ||
| LEICA DFC290HD | Leica | USB camera | ||
| Image Pro Express ver. 6.0 | Media Cybernetics | software |
References
- Anidjar, S., Salzmann, J. L., Gentric, D. Elastase-induced experimental aneurysms in rats. Circulation. 82 (3), 973-973 (1990).
- Pyo, R., Lee, J. K., Shipley, J. M. Targeted gene disruption of matrix metalloproteinase-9 (gelatinase B) suppresses development of experimental abdominal aortic aneurysms. J Clin Invest. 105 (11), 1641-1641 (2000).
- Carsten, C. G., Calton, W. C., Johanning, J. M. Elastase is not sufficient to induce experimental abdominal aortic aneurysms. J Vasc Surg. 33 (6), 1255-1255 (2001).
