Summary

Imaging bioluminescenza di eme ossigenasi-1 sovraregolazione alla Procedura di Gua Sha

Published: August 28, 2009
doi:

Summary

Gua Sha, raschiamento tradizionale cinese pelle terapeutiche, provoca stravaso di sangue sottocutaneo microvascolare. Riportiamo un protocollo di imaging bioluminescenza di HO-1-<em> Luciferasi</em> Topi transgenici per dimostrare che Gua Sha sovraregolazione eme ossigenasi-1 (HO-1) in molti organi.

Abstract

Gua Sha è una terapia tradizionale popolare cinese che impiega la pelle raschiando a causa microvascolare sottocutaneo stravaso di sangue e lividi. Il protocollo per bioluminescenti imaging ottico di HO-1-<em> Luciferasi</emTopi> transgenici riportati in questo manoscritto fornisce una rapida<em> In vivo</emDosaggio> del upregulation della eme ossigenasi-1 (HO-1) l'espressione genica in risposta alla procedura di Gua Sha. HO-1 è nota da tempo per fornire citoprotezione contro lo stress ossidativo. La sovraregolazione di HO-1, valutata l'uscita bioluminescenza, è pensato per rappresentare una risposta antiossidante ai prodotti di emoglobina circolante rilasciati da Gua Sha. Gua Sha è stato somministrato a colpi ripetuti di un cucchiaio bordo liscio sulla pelle lubrificata sul retro o altre parti del corpo mirata del topo transgenico fino petecchie (emorragie scheggia) o ecchimosi (contusioni), indicative di stravaso di sangue dai capillari sottocutanei è stata osservata. Dopo Gua Sha, le sessioni di imaging bioluminescenza sono state effettuate al giorno per diversi giorni per seguire le dinamiche di HO-1 espressione in molteplici organi interni.

Protocol

Femmina topi transgenici HO-1-luciferasi (età di 4-6 settimane) possono essere acquistati presso Taconic Farms, Inc. All'arrivo, i topi sono collocati in una struttura di stabulazione degli animali per almeno 4 giorni per consentire alloggio. Preparazione per l'imaging bioluminescenza: Pesare ogni HO-1 del mouse. Peso dell'animale è necessario per calcolare il dosaggio di luciferina. Depilazione: usare uno swap di cotone per applica…

Discussion

Trascrizione di HO-1, una forma inducibile di eme ossigenasi, è upregulated da molti fattori tra cui l'eme, perossido di idrogeno, l'irradiazione UV, ipossia e stress fisici. Immagini del corpo intero come il riferito HO-1 protocollo bioluminescenza fornisce un'istantanea delle sistemica HO-1 espressione di organi multipli. Nei piccoli animali, imaging bioluminescenza permette ad alta sensibilità in vivo quantitativa in tempo reale valutazione longitudinale ottica di alterazioni nell'espressione genica…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

K. Wong, Wong STC sono supportati da finanziamenti funzionali e Molecular Imaging Center, Brigham e l'ospedale delle donne
K. Wong, Wong STC sono supportati dal Centro per le Biotecnologie e Informatica, Il Methodist Hospital Research Institute, Weill Cornell Medical College.
KK Kwong, I. Chen, JQ Ren sono supportate dal finanziamento della A. Athinoula Martinos Center for Biomedical Imaging, Massachusetts General Hospital.
Lenuta Kloetzer, Braden Kuo sono supportati da un finanziamento della Neuroenteric Research Center, Massachusetts General Hospital
Gli autori ringraziano Drs. D. Zeng e X. Xu di Optical Imaging Lab, Brigham and Women Hospital per l'assistenza tecnica.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Luciferin   Caliper P/N 122796 Previously Xenogen
IVIS 100   Caliper   Previously Xenogen

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Citer Cet Article
Kwong, K. K., Kloetzer, L., Wong, K. K., Ren, J., Kuo, B., Jiang, Y., Chen, Y. I., Chan, S., Young, G. S., Wong, S. T. Bioluminescence Imaging of Heme Oxygenase-1 Upregulation in the Gua Sha Procedure. J. Vis. Exp. (30), e1385, doi:10.3791/1385 (2009).

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