Summary

Hem oksijenaz-1 ekspresyonunun Gua Sha Usul Biyoparlaklık Görüntüleme

Published: August 28, 2009
doi:

Summary

Gua Sha, geleneksel Çin tedavi cilt kazıma, subkutan mikrovasküler kan ekstravazasyon neden olur. Biz, biyoparlaklık görüntüleme protokolü rapor HO-1<em> Lusiferaz</em> Gua Sha heme upregüle göstermek için transgenik farelerin oksijenaz-1 çoklu organlarda (HO-1).

Abstract

Gua Sha, deri, derialtı mikrovasküler kan ekstravazasyonu ve morluklar neden kazıma istihdam, geleneksel bir Çin halk tedavi. Bioluminescent optik görüntüleme için protokol HO-1-<em> Lusiferaz</em> Bu yazıda bildirilen transgenik farelerin hızlı bir şekilde sağlar<em> In vivo</emUpregülasyonu> tahlil heme oksijenaz-1 (HO-1) gen ekspresyonu Gua Sha prosedürü yanıt. HO-1, oksidatif strese karşı uzun sitoproteksiyonun sağlamak için bilinmektedir. Biyoparlaklık çıkış tarafından değerlendirilen HO-1 upregülasyonu, Gua Sha tarafından serbest dolaşan hemoglobin ürünleri bir antioksidan yanıt temsil ettiği düşünülmektedir. Gua Sha peteşi (splinter hemoraji) veya subkutan kılcal damarların kan ekstravazasyonu göstergesidir ekimoz (çürükler) gözlendi kadar arkasında veya diğer transgenik fare hedeflenen vücut parçası yağlanan cilt üzerinde pürüzsüz bir kaşık kenarından tekrarlanan vuruş tarafından verildi. Gua Sha sonra, birkaç gün için, birden fazla iç organlarda HO-1 ekspresyonu dinamikleri takip etmek biyoparlaklık görüntüleme oturumları günlük olarak yapılmıştır.

Protocol

Kadın HO-1-lusiferaz transgenik farelerin (4-6 hafta yaş), varışta Taconic Çiftlikler, Inc satın alınabilir, farelerin en az 4 gün konaklama izin için bir hayvan barınağı tesisini yerleştirilir . Biyoparlaklık görüntüleme için hazırlanması: HO-1, her bir fare tartılır. Hayvan ağırlığı luciferase dozu hesaplamak için gereklidir. Epilasyon, hayvan ya da geri karın ve / üzerinde saç çıkarıcı Nair ® uygulamak için…

Discussion

HO-1, heme oksijenaz indüklenebilir formu, Transkripsiyon heme, hidrojen peroksit, UV ışını, hipoksi ve fiziksel stresler de dahil olmak üzere birçok faktör tarafından upregüle. HO-1 biyoparlaklık protokolü gibi tüm vücut görüntülemesi çok organlarda sistemik HO-1 ekspresyonu hızlı bir anlık sağlar. Küçük hayvanlar, biyoparlaklık görüntüleme, yüksek hassasiyet in vivo sistemik gen ekspresyon değişiklikler gerçek zamanlı kantitatif uzunlamasına optik değerlendirme, gösterildiği gibi …

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

K. Wong, STC Wong Fonksiyonel ve Moleküler Görüntüleme Merkezi, Brigham ve Kadın hastaneye gelen fon tarafından desteklenen
K. Wong, STC Wong Biyoteknoloji ve Bilişim, Methodist Hastanesi Araştırma Enstitüsü, Weill Cornell Medical College Merkezi tarafından desteklenmektedir.
KK Kwong, I. Chen, JQ Ren Athinoula A. Martinos Merkezi Biyomedikal Görüntüleme, Massachusetts Genel Hastanesi fon tarafından desteklenmektedir.
Lenuta Kloetzer Braden Kuo nöroenterik Araştırma Merkezi, Massachusetts Genel Hastanesi fon tarafından desteklenen
Yazarlar Dr teşekkür. S. Zeng ve Optik Imaging Lab, Brigham ve Kadın Hastanesi, teknik yardım için X. Xu.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Luciferin   Caliper P/N 122796 Previously Xenogen
IVIS 100   Caliper   Previously Xenogen

References

  1. Zhang, W. Selection of potential therapeutics based on in vivo spatiotemporal transcription patterns of heme oxygenase-1. J Mol Med. 80, 655-6564 (2002).
  2. Zhang, W. Rapid in vivo functional analysis of transgenes in mice using whole body imaging of luciferase expression. Transgenic Res. 10, 423-434 (2001).
  3. Contag, C. H., Stevenson, D. K. In vivo patterns of heme oxygenase-1 transcription. J Perinatol. 21, 119-1124 (2001).
  4. Nielsen, A., Knoblauch, N. T., Dobos, G. J., Michalsen, A., Kaptchuk, T. J. The effect of Gua Sha treatment on the microcirculation of surface tissue: a pilot study in healthy subjects. Explore (NY). 3, 456-466 (2007).
  5. Schwickert, M. E., Saha, F. J., Braun, M., Dobos, G. J. Gua Sha for migraine in inpatient withdrawal therapy of headache due to medication overuse. Forsch Komplementmed. 14, 297-300 (2007).
  6. Tsai, P. S., Lee, P. H., Wang, M. Y. Demographics, training, and practice patterns of practitioners of folk medicine in Taiwan: a survey of the Taipei metropolitan area. J Altern Complement Med. 14, 1243-1248 (2008).
  7. Nielsen, A. Gua sha research and the language of integrative medicine. J Bodyw Mov Ther. 13, 63-72 (2009).
  8. Contag, C. H. Visualizing gene expression in living mammals using a bioluminescent reporter. Photochem Photobiol. 66, 523-531 (1997).
  9. Cui, K., Xu, X., Zhao, H., Wong, S. T. A quantitative study of factors affecting in vivo bioluminescence imaging. Luminescence. 23, 292-295 (2008).
  10. Shibahara, S., Yoshida, T., Kikuchi, G. Mechanism of increase of heme oxygenase activity induced by hemin in cultured pig alveolar macrophages. Arch Biochem Biophys. 197, 607-617 (1979).
  11. Lee, P. J. Hypoxia-inducible factor-1 mediates transcriptional activation of the heme oxygenase-1 gene in response to hypoxia. J Biol Chem. 272, 5375-5381 (1997).
  12. Maines, M. D. The heme oxygenase system: a regulator of second messenger gases. Annu Rev Pharmacol Toxicol. 37, 517-554 (1997).
  13. Wunder, C., Potter, R. F. The heme oxygenase system: its role in liver inflammation. Curr Drug Targets Cardiovasc Haematol Disord. 3, 199-208 (2003).
  14. Hoekstra, K. A., Godin, D. V., Cheng, K. M. Protective role of heme oxygenase in the blood vessel wall during atherogenesis. Biochem Cell Biol. 82, 351-359 (2004).
  15. Yang, N. C., Lu, L. H., Kao, Y. H., Chau, L. Y. Heme oxygenase-1 attenuates interleukin-1beta-induced nitric oxide synthase expression in vascular smooth muscle cells. J Biomed Sci. 11, 799-809 (2004).
  16. Morse, D., Choi, A. M. Heme oxygenase-1: from bench to bedside. Am J Respir Crit Care Med. 172, 660-670 (2005).
  17. Ryter, S. W. Protective functions of heme oxygenase-1 and carbon monoxide in the respiratory system. Antioxid Redox Signal. 9, 2157-2173 (2007).
  18. Wilson, K., Yu, J., Lee, A., Wu, J. C. In vitro and in vivo bioluminescence reporter gene imaging of human embryonic stem cells. J Vis Exp. , (2008).
  19. Calabrese, V. Vitagenes, dietary antioxidants and neuroprotection in neurodegenerative diseases. Front Biosci. 14, 376-397 (2009).
  20. Contag, P. R., Olomu, I. N., Stevenson, D. K., Contag, C. H. Bioluminescent indicators in living mammals. Nat Med. 4, 245-247 (1998).

Play Video

Citer Cet Article
Kwong, K. K., Kloetzer, L., Wong, K. K., Ren, J., Kuo, B., Jiang, Y., Chen, Y. I., Chan, S., Young, G. S., Wong, S. T. Bioluminescence Imaging of Heme Oxygenase-1 Upregulation in the Gua Sha Procedure. J. Vis. Exp. (30), e1385, doi:10.3791/1385 (2009).

View Video