Summary

Imagem de bioluminescência de heme oxigenase-1 Upregulation no Procedimento de Gua Sha

Published: August 28, 2009
doi:

Summary

Gua Sha, raspagem de pele tradicional chinesa terapêutica, causa extravasamento de sangue por via subcutânea microvascular. Relatamos um protocolo de imagem de bioluminescência de HO-1-<em> Luciferase</em> Camundongos transgênicos para demonstrar que Gua Sha upregulates heme oxigenase-1 (HO-1) em vários órgãos.

Abstract

Gua Sha é uma terapia popular tradicional chinesa que emprega raspagem da pele para causar subcutânea extravasamento de sangue microvascular e contusões. O protocolo de imagem óptica bioluminescente da HO-1-<em> Luciferase</em> Camundongos transgênicos reportados neste manuscrito oferece uma rápida<em> In vivo</em> Ensaio da upregulation da heme oxigenase-1 (HO-1) a expressão gênica em resposta ao procedimento Sha Gua. HO-1 tem sido conhecido para fornecer citoproteção contra o estresse oxidativo. A regulação alta de HO-1, avaliados pela saída bioluminescência, é pensado para representar uma resposta antioxidante de produtos hemoglobina circulante lançado pela Gua Sha. Gua Sha foi administrada por golpes repetidos de uma borda colher suave sobre a pele lubrificada nas costas ou outra parte do corpo alvo do camundongo transgênico até petéquias (hemorragias lasca) ou equimoses (manchas roxas) indicativo de extravasamento de sangue de capilares subcutâneos foi observada. Depois de Gua Sha, sessões de imagem de bioluminescência foram realizadas diariamente durante vários dias para acompanhar a dinâmica de expressão de HO-1 em vários órgãos internos.

Protocol

Feminino HO-1-luciferase camundongos transgênicos (idade de 4-6 semanas) pode ser comprado de Taconic Farms, Inc. Após a chegada, os ratos são colocados em uma instalação de alojamento dos animais durante pelo menos 4 dias para permitir acomodação. Preparação para a imagem de bioluminescência: Pesar cada rato HO-1. Peso do animal é necessário para calcular a dosagem de luciferina. Depilação: Use um cotonete para aplicar removedor de…

Discussion

Transcrição de HO-1, uma forma induzível da heme oxigenase, é regulada por vários fatores, incluindo heme, peróxido de hidrogênio, radiação UV, hipóxia e stress físico. Imagens de corpo inteiro, como o relatado HO-1 protocolo de bioluminescência fornece uma visão rápida de expressão de HO-1 sistêmica em múltiplos órgãos. Em pequenos animais, imagem de bioluminescência permite alta sensibilidade in vivo em tempo real avaliação quantitativa longitudinal óptico de alterações na expressão genética…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

K. Wong, Wong STC são suportados pelo financiamento do Funcional e Molecular Imaging Center, Brigham e hospital das mulheres
K. Wong, Wong STC são suportados pelo Centro de Biotecnologia e Informática, The Methodist Hospital Research Institute, Weill Cornell Medical College.
KK Kwong, I. Chen, JQ Ren são suportados pelo financiamento do A. Athinoula Martinos Center for Biomedical Imaging, Massachusetts General Hospital.
Lenuta Kloetzer, Braden Kuo são suportados por fundos do Centro de Pesquisa neuroentérico, Massachusetts General Hospital
Os autores agradecem os drs. Q. Xu X. Zeng e de imagem Optical Lab, Brigham e do Hospital da Mulher para ajuda técnica.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Luciferin   Caliper P/N 122796 Previously Xenogen
IVIS 100   Caliper   Previously Xenogen

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Citer Cet Article
Kwong, K. K., Kloetzer, L., Wong, K. K., Ren, J., Kuo, B., Jiang, Y., Chen, Y. I., Chan, S., Young, G. S., Wong, S. T. Bioluminescence Imaging of Heme Oxygenase-1 Upregulation in the Gua Sha Procedure. J. Vis. Exp. (30), e1385, doi:10.3791/1385 (2009).

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