Biolumineszenz-Bildgebung von HO-1 Hochregulation in der Gua Sha Procedure
Summary
Gua Sha, traditionelle chinesische therapeutische Hautgeschabsel, verursacht subkutane mikrovaskuläre Blutextravasat. Wir berichten über einen Protokoll der Biolumineszenz-Bildgebung von HO-1-<em> Luciferase</em> Transgenen Mäusen zeigen, dass Gua Sha Häm hochreguliert Oxygenase-1 (HO-1) in mehreren Organen.
Abstract
Gua Sha ist eine traditionelle chinesische Volksmusik Therapie, die Haut beschäftigt Schaben zur subkutanen mikrovaskuläre Blutextravasat und Prellungen verursachen. Das Protokoll für Biolumineszenz optische Bildgebung von HO-1-<em> Luciferase</em> Transgenen Mäusen in diesem Manuskript berichtet bietet eine schnelle<em> In vivo</em> Test der Hochregulation des HO-1 (HO-1) Gen-Expression als Reaktion auf die Gua Sha Verfahren. HO-1 ist seit langem bekannt, Zellschutz gegen oxidativen Stress sorgen. Die Hochregulation von HO-1, durch die Biolumineszenz-Ausgang beurteilt, wird angenommen, dass eine antioxidative Reaktion auf zirkulierende Hämoglobin Produkte Gua Sha freigegeben darstellen. Gua Sha wurde durch wiederholte Schläge für einen reibungslosen Löffel Vorteil gegenüber geschmiert Haut auf dem Rücken oder andere gezielte Körperteil der transgenen Maus, bis Petechien (splinter Blutungen) oder Hautblutungen (blaue Flecken) bezeichnend für Blutaustritt aus dem subkutanen Kapillaren beobachtet wurde verabreicht. Nach Gua Sha, wurden Biolumineszenz-Bildgebung Sessions werden täglich über mehrere Tage durchgeführt, um die Dynamik der HO-1-Expression in mehreren inneren Organen zu folgen.
Protocol
Discussion
Transkription von HO-1, eine induzierbare Form von Häm-Oxygenase, wird von vielen Faktoren ab, einschließlich Häm, Wasserstoffperoxid, UV-Bestrahlung, Hypoxie und körperlichen Belastungen hochreguliert. Ganzkörper-Bildgebung, wie die gemeldeten HO-1 Biolumineszenz-Protokoll bietet einen schnellen Überblick über systemische HO-1-Expression in mehreren Organen. Bei Kleintieren erlaubt Biolumineszenz-Bildgebung mit hoher Empfindlichkeit in-vivo Echtzeit quantitative Längs-optische Beurteilung der Veränderungen in …
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
K. Wong, STC Wong durch die Finanzierung von Functional and Molecular Imaging Center, Brigham and Womens Hospital unterstützt
K. Wong, STC Wong sind durch das Center for Biotechnology and Informatics, The Methodist Hospital Research Institute, Weill Cornell Medical College unterstützt.
KK Kwong, I. Chen, JQ Ren werden durch die Mittel aus dem Athinoula A. Martinos Center for Biomedical Imaging, Massachusetts General Hospital unterstützt.
Lenuta Klötzer, Braden Kuo werden durch Mittel aus dem Neuroenteric Research Center, Massachusetts General Hospital unterstützt
Die Autoren danken Drs. Q. Zeng und X. Xu von Optical Imaging Lab, Brigham and Womens Hospital for technische Hilfe.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Luciferin | Caliper | P/N 122796 | Previously Xenogen | |
| IVIS 100 | Caliper | Previously Xenogen |
References
- Zhang, W. Selection of potential therapeutics based on in vivo spatiotemporal transcription patterns of heme oxygenase-1. J Mol Med. 80, 655-6564 (2002).
- Zhang, W. Rapid in vivo functional analysis of transgenes in mice using whole body imaging of luciferase expression. Transgenic Res. 10, 423-434 (2001).
- Contag, C. H., Stevenson, D. K. In vivo patterns of heme oxygenase-1 transcription. J Perinatol. 21, 119-1124 (2001).
- Nielsen, A., Knoblauch, N. T., Dobos, G. J., Michalsen, A., Kaptchuk, T. J. The effect of Gua Sha treatment on the microcirculation of surface tissue: a pilot study in healthy subjects. Explore (NY). 3, 456-466 (2007).
- Schwickert, M. E., Saha, F. J., Braun, M., Dobos, G. J. Gua Sha for migraine in inpatient withdrawal therapy of headache due to medication overuse. Forsch Komplementmed. 14, 297-300 (2007).
- Tsai, P. S., Lee, P. H., Wang, M. Y. Demographics, training, and practice patterns of practitioners of folk medicine in Taiwan: a survey of the Taipei metropolitan area. J Altern Complement Med. 14, 1243-1248 (2008).
- Nielsen, A. Gua sha research and the language of integrative medicine. J Bodyw Mov Ther. 13, 63-72 (2009).
- Contag, C. H. Visualizing gene expression in living mammals using a bioluminescent reporter. Photochem Photobiol. 66, 523-531 (1997).
- Cui, K., Xu, X., Zhao, H., Wong, S. T. A quantitative study of factors affecting in vivo bioluminescence imaging. Luminescence. 23, 292-295 (2008).
- Shibahara, S., Yoshida, T., Kikuchi, G. Mechanism of increase of heme oxygenase activity induced by hemin in cultured pig alveolar macrophages. Arch Biochem Biophys. 197, 607-617 (1979).
- Lee, P. J. Hypoxia-inducible factor-1 mediates transcriptional activation of the heme oxygenase-1 gene in response to hypoxia. J Biol Chem. 272, 5375-5381 (1997).
- Maines, M. D. The heme oxygenase system: a regulator of second messenger gases. Annu Rev Pharmacol Toxicol. 37, 517-554 (1997).
- Wunder, C., Potter, R. F. The heme oxygenase system: its role in liver inflammation. Curr Drug Targets Cardiovasc Haematol Disord. 3, 199-208 (2003).
- Hoekstra, K. A., Godin, D. V., Cheng, K. M. Protective role of heme oxygenase in the blood vessel wall during atherogenesis. Biochem Cell Biol. 82, 351-359 (2004).
- Yang, N. C., Lu, L. H., Kao, Y. H., Chau, L. Y. Heme oxygenase-1 attenuates interleukin-1beta-induced nitric oxide synthase expression in vascular smooth muscle cells. J Biomed Sci. 11, 799-809 (2004).
- Morse, D., Choi, A. M. Heme oxygenase-1: from bench to bedside. Am J Respir Crit Care Med. 172, 660-670 (2005).
- Ryter, S. W. Protective functions of heme oxygenase-1 and carbon monoxide in the respiratory system. Antioxid Redox Signal. 9, 2157-2173 (2007).
- Wilson, K., Yu, J., Lee, A., Wu, J. C. In vitro and in vivo bioluminescence reporter gene imaging of human embryonic stem cells. J Vis Exp. , (2008).
- Calabrese, V. Vitagenes, dietary antioxidants and neuroprotection in neurodegenerative diseases. Front Biosci. 14, 376-397 (2009).
- Contag, P. R., Olomu, I. N., Stevenson, D. K., Contag, C. H. Bioluminescent indicators in living mammals. Nat Med. 4, 245-247 (1998).
