Summary

防污图案生物分子自组装膜的微电极为

Published: August 25, 2009
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Summary

我们目前与金微电极的硅衬底上形成一个聚乙二醇(PEG)自组装单层膜(PEG – SAM)的一个过程。 PEG – SAM是形成了一个步骤,并防止在硅和金表面的生物污染。电泳是用于图案的生物分子到纳米级。

Abstract

我们目前与金微电极的硅衬底上形成一聚乙二醇(PEG)的三甲氧基硅烷自组装单层膜(SAM)的一个过程。 PEG – SAM是形成一个单一的装配步骤,防止在硅和金表面的生物污染。 SAM是用来与标准,积极音光刻图案的大衣微电极。微管作为一个例子,我们应用诱导电泳迁移到一个可逆的方式SAM涂层电极直流电压。甲流室是用于成像的电泳迁移和微管的图案<em>原位</em>使用epifluorescence显微镜。这种方法一般适用于生物分子的图案,因为它采用电泳固定靶标分子,因此不需要特定的分子间的相互作用。此外,它避免了试图模式自组装单分子直接使用平版印刷技术时所遇到的问题。允许这种方法用于模式生物分子在纳米电子束光刻技术的兼容性。

Protocol

试剂的制备准备管道的缓冲液(80毫米的管道,1MM氯化镁2,为1mM EGTA,用KOH调节pH至6.8)。分装和储存葡萄糖氧化酶,过氧化氢 ​​酶和葡萄糖在-70 ° C和紫杉醇在-20 ° C根据现有的协议。1,2分装和存储微管蛋白在-70 ° C,根据供应商包括的指示。 图案的金微电极使用光刻切成1厘米,1.5厘米,用抄写员或晶圆切割机基板的硅晶片。他?…

Discussion

MTS的迁移是很容易的可视化使用,因为它们的亮度和低背景荧光的荧光显微镜。方法一般适用于生物分子的图案,因为它仅需要诱导的生物分子进行适当的调整缓冲液pH值的净电荷。电渗是避免在此设置,因为有没有收取的表面,如毛细管电泳中使用的硅墙壁。

这种方法的若干修改是可能的。密封流室的两端是至关重要的观察,因为从开完的蒸发导致散装流体流动和不良吨?…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

我们承认梅利莎Grunlan SAM的形成有益的讨论。这项研究是支持的,一部分由罗伯特A ·韦尔奇基金会(1585年)。

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
2-[methoxypoly-(ethyleneoxy)propyl]-trimethoxysilane (PEG-silane)   Gelest, Inc. SIM6492.7 6-9 PEG units; molecular weight 450-600 g mol-1
2-mercaptoethanol   Sigma M7522  
Acetone   EMD Chemicals AX0120-8 ACS grade
Catalase   Calbiochem 219001-5MU  
Chlorobenzene   EMD Chemicals MK441908 ACS grade
Ethylene glycol-bis(2-aminoethylether)-N,N,N’,N’-tetraacetic acid (EGTA)   Calbiochem 324626  
Glucose   EMD Chemicals DX0145-1  
Glucose oxidase   MP Biomedicals 100330  
Guanosine-5’-[(α,Β)-methyleno]triphosphate, Sodium salt (GMPCPP)   Jena Biosciences, GmbH NU-405s  
Guanosine-5’-triphosphate   Sigma G8752  
Isopropanol   EMD Chemicals PX1835-5 ACS grade
Methyl isobutyl ketone (MIBK)   Fisher Scientific AC12739-0010  
Paclitaxel (taxol)   Calbiochem 580555  
Piperazine-N,N”-bis(2-ethanesulfonic acid) (PIPES)   Sigma P1851  
Polymethylmethacrylate (PMMA)   Brewer Science, Inc. 950K molecular weight 950K
Rhodamine tubulin   Cytoskeleton, Inc. T331M from bovine brain 99% pure, lyophilized
Toluene   EMD Chemicals TX0735-5 ACS grade
Tubulin   Cytoskeleton, Inc. T238 from bovine brain 99% pure, lyophilized

No. 1 borosilicate glass coverslips (22 X 50 mm) were purchased from VWR. Polished electronic grade p-type <111> silicon wafers were purchased from Addison Engineering, Inc. High-purity silver paint was obtained from Structure Probe, Inc. (Catalog # 5001 AB). Insulated fine gauge copper magnet wire (~ 0.08 mm (0.003”) diameter) can be obtained from electronic supply companies.

References

  1. Rai-Choudhury, P. . Handbook of Microlithography, Micromachining, and Microfabrication: Microlithography. , (1997).

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Citer Cet Article
Noel, J., Teizer, W., Hwang, W. Antifouling Self-assembled Monolayers on Microelectrodes for Patterning Biomolecules. J. Vis. Exp. (30), e1390, doi:10.3791/1390 (2009).

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