인간의 탯줄 아티 평활근 세포 절연 (HUASMC)
Summary
탯줄 코드는 여러 가지 방법으로 부드러운 근육 세포를 분리하는 데 사용됩니다. 이 작품에서 우리는 고립 평활근 세포에 효소 처리를 사용합니다.
Abstract
인간의 탯줄 (UC)는 쉽게 바로 출산 후 얻을 수있다 생물 학적 샘플입니다. 이것은 생물 학적 샘플, 대부분의 시간이다 삭제하고 컬렉션은 신생아지나 어머니의 건강에 어떠한 추가 위험을 의미하지는 않습니다. 또한 아무런 윤리적 문제가 제기되지 않습니다. UC 한 정맥 내피 세포와 모두있는 (내장 컴퓨터) 2 동맥에 의해 구성되어있다<sup> 1</sup>와 평활근 세포 (SMCs)<sup> 2</sup> 혈관의 주요 세포 구성 요소의 두, 격리 수 있습니다. 이 프로젝트에서는 SMCs는 이에 따라 UC의 동맥의 효소 치료 이전에 자페에 의해 설명하는 실험 절차 후에 얻은되었습니다<em> 외</em<sup> 3</sup>. 세포 분리 후 그들은 DMEM – F12은 태아 소 혈청의 5 %를 보완하고 여러 구절에 대한 교양했던 T – 플래시에 보관했다. 세포는 서로 다른 세대에서 형태학의 다른 phenotypic 특성을 유지. 본 연구의 목적은 압축시키는 것 약물과 함께 미래를 assays를위한 모델로 사용하기 위해서는 부드러운 근육 세포를 분리하는 것이었다, 분리 및 구조적 혈관 기능의 세포 및 분자 측면을 연구, L – 타입 칼슘 채널을 특징<sup> 4</sup> 및 조직 공학을 사용할 수 있습니다.
Protocol
Discussion
SMC는 분리, 압축시키는 것 약품과 함께 미래를 assays를위한 모델로 사용 구조적, L – 타입 칼슘 채널을 특징 혈관 기능의 세포 및 분자 측면을 연구하고 조직 공학을 사용하실 수 있습니다. SMCs 및 내장 컴퓨터가 인간에 사용되는 세미 합성 혈관의 생산에 사용될 수있는 새로운 biomaterials의 발전을위한 기본입니다.
Acknowledgements
병원 아마토 루시타노, 카스텔루 브랑쿠 포르투갈.
병원 수사 마틴스, Guarda 포르투갈.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DMEM-F12 | Sigma-Aldrich | 095K8311 | ||
| Fetal bovine serum (FBS) | Biochrom-AG | 0117T | ||
| RPMI 1640 | Gibco | 3103806 | ||
| Collagen | Sigma-Aldrich | 067K2302 | ||
| Antibiotic | 10 μL/ 1 mL of medium | |||
| Scissors | Sterilized | |||
| Needle | Diameter of 0.6-1mm | |||
| Syringe | 10 – 20 mL | |||
| Physiological Saline Solution (PSS) | 20-40 mL per artery | |||
| Collagenase type I | Sigma-Aldrich | 047K1052 | 3 mL per artery | |
| Hank’s Buffered Salt Solution(HBSS) | Diluted collagenase | |||
| Phosphate buffered saline solution (PBS) | Warmed to 37°C |
References
- Van Rijen, H. Gap junctions in human umbilical cord endothelial cells contain multiple connexins. The American journal of physiology. 272 (1 PT 1), C117-C117 (1997).
- Martín de Llano, J. Procedure to consistently obtain endothelial and smooth muscle cell cultures from umbilical cord vessels. Translational Research. 149 (1), 1-9 (2007).
- Jaffe, E. A., Nachman, R. L., Becker, C. G., Minick, C. R. Culture of human endothelial cells derived from umbilical veins. Identification by morphologic and immunologic criteria. J Clin Invest. 52 (11), 2745-2756 (1973).
- Cairrão, E., Santos-Silva, A., Alvarez, E., Correia, I., Verde, I. Isolation and culture of human umbilical artery smooth muscle cells expressing functional calcium channels. In Vitro Cellular & Developmental Biology-Animal. 45 (3), 175-184 (2009).
