El aislamiento de los Derechos Humanos de la arteria umbilical células musculares lisas (HUASMC)
Summary
El cordón umbilical se utilizan para aislar las células musculares lisas de diferentes maneras. En este trabajo se utilizó el tratamiento enzimático de células aisladas de músculo liso.
Abstract
El cordón umbilical humano (UC) es una muestra biológica que se puede obtener fácilmente justo después del nacimiento. Esta muestra biológica es que la mayoría de las veces, descartados y su cobro no implica ningún riesgo añadido para la salud del recién nacido o de s madre. Además, no se plantean problemas éticos. La UC está compuesto por una vena y dos arterias de la que tanto las células endoteliales (EC)<sup> 1</sup> Y células musculares lisas (CML)<sup> 2</sup>, Dos de los principales componentes celulares de los vasos sanguíneos, se puede aislar. En este proyecto, el SMC se han obtenido tras el tratamiento enzimático de las arterias de la UC en consecuencia el procedimiento experimental descrito previamente por Jaffe<em> Et al</em<sup> 3</sup>. Tras el aislamiento de células que se mantienen en t-flash con DMEM-F12 suplementado con 5% de suero fetal bovino y se cultivaron durante varios pasajes. Las células mantienen sus características fenotípicas, morfológicas y otras en las diferentes generaciones. El objetivo de este estudio fue aislar las células del músculo liso con el fin de usarlos como modelos para futuros ensayos con fármacos constrictor, aislar y caracterizar la estructura tipo L-canales de calcio, para estudiar los aspectos celulares y moleculares de la función vascular<sup> 4</sup> Y para su uso en la ingeniería de tejidos.
Protocol
Discussion
El SMC se puede utilizar como modelo para futuros ensayos con fármacos constrictor, para aislar y caracterizar la estructura tipo L-canales de calcio, para estudiar los aspectos celulares y moleculares de la función vascular y para su uso en la ingeniería de tejidos. SMC y EC son fundamentales para el desarrollo de nuevos biomateriales que se pueden utilizar en la producción de vasos sanguíneos semi sintéticos para su uso en seres humanos.
Acknowledgements
El hospital Amato Lusitano, Castelo Branco en Portugal.
El hospital Sousa Martins, Guarda Portugal.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DMEM-F12 | Sigma-Aldrich | 095K8311 | ||
| Fetal bovine serum (FBS) | Biochrom-AG | 0117T | ||
| RPMI 1640 | Gibco | 3103806 | ||
| Collagen | Sigma-Aldrich | 067K2302 | ||
| Antibiotic | 10 μL/ 1 mL of medium | |||
| Scissors | Sterilized | |||
| Needle | Diameter of 0.6-1mm | |||
| Syringe | 10 – 20 mL | |||
| Physiological Saline Solution (PSS) | 20-40 mL per artery | |||
| Collagenase type I | Sigma-Aldrich | 047K1052 | 3 mL per artery | |
| Hank’s Buffered Salt Solution(HBSS) | Diluted collagenase | |||
| Phosphate buffered saline solution (PBS) | Warmed to 37°C |
References
- Van Rijen, H. Gap junctions in human umbilical cord endothelial cells contain multiple connexins. The American journal of physiology. 272 (1 PT 1), C117-C117 (1997).
- Martín de Llano, J. Procedure to consistently obtain endothelial and smooth muscle cell cultures from umbilical cord vessels. Translational Research. 149 (1), 1-9 (2007).
- Jaffe, E. A., Nachman, R. L., Becker, C. G., Minick, C. R. Culture of human endothelial cells derived from umbilical veins. Identification by morphologic and immunologic criteria. J Clin Invest. 52 (11), 2745-2756 (1973).
- Cairrão, E., Santos-Silva, A., Alvarez, E., Correia, I., Verde, I. Isolation and culture of human umbilical artery smooth muscle cells expressing functional calcium channels. In Vitro Cellular & Developmental Biology-Animal. 45 (3), 175-184 (2009).
