Summary
Este artigo descreve um procedimento para a indução de tumores de fígado ortotópico bioluminescentes em camundongos, e posterior análise do crescimento do tumor confinado ao fígado usando imagens de luminescência ao vivo de todo o corpo.
Abstract
Este vídeo descreve o estabelecimento de metástases hepáticas em um modelo de mouse que pode ser posteriormente analisados por imagens bioluminescente. As células tumorais são administrados especificamente para o fígado para induzir um tumor do fígado localizada, por meio da mobilização do baço e dividir em duas, deixando intacto o pedículo vascular para cada metade do baço. Lewis células de carcinoma de pulmão que constitutivamente expressam o gene luciferase do firefly (luc1) são inoculados em um hemi-baço, que é então ressecado 10 minutos depois. A outra hemi-baço é deixada intacta e voltou para o abdômen. O crescimento do tumor do fígado pode ser monitorado por imagem de bioluminescência usando o IVIS sistema de imagem de corpo inteiro. Imagens quantitativas do crescimento tumoral utilizando IVIS fornece a quantificação precisa das células tumorais viáveis. Morte celular e necrose do tumor devido ao tratamento medicamentoso é indicado no início por uma redução no sinal bioluminescente. Este modelo do rato permite investigar os mecanismos subjacentes a sobrevivência das células tumorais metastáticos e crescimento e pode ser usado para a avaliação da terapêutica das metástases hepáticas.
Protocol
Discussion
O desenvolvimento da confiança em modelos in vivo para o estudo da metástase hepática está se tornando cada vez mais importante com o advento de novas estratégias terapêuticas. Para o estudo precisa de novas estratégias, modelos animais deveria ser relativamente fácil de executar, formam um número significativo de metástase, envolvem todas as etapas da cascata metastática e têm um sistema repórter que permite a detecção e contagem de um número limitado de células metastáticas. A abord…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabalho foi financiado através da Enfermaria Cork South Victoria University Hospital fundo do peito, a Sociedade do Câncer irlandês (CRI07TAN) e do Centro de Cork Cancer Research. Lewis linha de pulmão de células expressando estavelmente luciferase foi um presente amável do Dr. Karin Jooss, Cell Genesys, Inc., San Francisco, EUA.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DMEM | Sigma-Aldrich | D6429 | ||
| PBS | Sigma-Aldrich | D8537 | ||
| Ketamine | Vetoquinol | |||
| Xylazine | Vetoquinol | |||
| Carprofen | Vetoquinol | |||
| Videne | Ecolab, Leeds, UK | |||
| Vicryl 4-0 suture | Ethicon | |||
| PDS 4-0 suture | Ethicon | |||
| Prolene 4-0 suture | Ethicon | |||
| Firefly Luciferin | Biosynth, Zurich, Switzerland |
References
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