Murine Bioluminescent Lever Tumor Model
Summary
Dit artikel beschrijft een procedure voor de inductie van orthotope bioluminescente levertumoren bij muizen, en daaropvolgende analyse van groei van de tumor beperkt tot de lever met behulp van live-hele lichaam luminescentie beeldvorming.
Abstract
Deze video beschrijft de oprichting van levermetastasen in een muismodel die vervolgens kunnen worden geanalyseerd door bioluminescente beeldvorming. Tumor-cellen zijn specifiek toegediend aan de lever om een gelokaliseerde tumor lever veroorzaken, via mobilisatie van de milt en splitsen in twee, waardoor intact de vasculaire pedikel voor elk de helft van de milt. Lewis longcarcinoom cellen die constitutief uitdrukken van de vuurvlieg luciferase gen (luc1) zijn geënt in een hemi-milt, die vervolgens wordt 10 minuten later gereseceerd. De andere hemi-milt is intact gelaten en keerde terug naar de buik. Lever groei van de tumor kan worden gecontroleerd door bioluminescentie beeldvorming met behulp van de IVIS hele lichaam imaging-systeem. Kwantitatieve beeldvorming van de groei van tumoren met behulp van IVIS zorgt voor een nauwkeurige kwantificering van levensvatbare tumorcellen. Tumor celdood en necrose als gevolg van medicamenteuze behandeling is vroeg aangegeven door een vermindering van de lichtgevende signaal. Deze muis model maakt voor het onderzoeken van de mechanismen die ten grondslag liggen aan uitgezaaide tumor-cel overleving en de groei en kan worden gebruikt voor de evaluatie van therapeutica van levermetastasen.
Protocol
Discussion
De ontwikkeling van betrouwbare in vivo modellen voor de studie van de lever metastase wordt steeds steeds belangrijker met de komst van nieuwe therapeutische strategieën. Voor de nauwkeurige studie van nieuwe strategieën, diermodellen moeten relatief gemakkelijk uit te voeren, vormen een aanzienlijk aantal van de metastase, omvatten alle stappen van de metastatische cascade en hebben een verslaggever systeem dat de detectie en telling van een beperkt aantal metastatische cellen mogelijk maakt. De split-milt …
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Dit werk werd gefinancierd door de Cork South Ziekenhuis Victoria University Hospital Borst fonds, de Ierse Cancer Society (CRI07TAN) en de Cork Cancer Research Centre. Lewis long cellijn stabiel tot expressie luciferase was een vriendelijke gift van Dr Karin Jooss, Cell Genesys, Inc, San Francisco, USA.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DMEM | Sigma-Aldrich | D6429 | ||
| PBS | Sigma-Aldrich | D8537 | ||
| Ketamine | Vetoquinol | |||
| Xylazine | Vetoquinol | |||
| Carprofen | Vetoquinol | |||
| Videne | Ecolab, Leeds, UK | |||
| Vicryl 4-0 suture | Ethicon | |||
| PDS 4-0 suture | Ethicon | |||
| Prolene 4-0 suture | Ethicon | |||
| Firefly Luciferin | Biosynth, Zurich, Switzerland |
References
- Kasuya, H. Mouse models of subcutaneous spleen reservoir for multiple portal venous injections to treat liver malignancies. Cancer Res. 65, 3823-3827 (2005).
- Liu, Q. Z., Tuo, C. W., Wang, B., Wu, B. Q., Zhang, Y. H. Liver metastasis models of human colorectal carcinoma established in nude mice by orthotopic transplantation and their biologic characteristic. World J Gastroenterol. 4, 409-411 (1998).
- Li, Z. Y., Ni, S., Yang, X., Kiviat, N., Lieber, A. Xenograft models for liver metastasis: Relationship between tumor morphology and adenovirus vector transduction. Mol Ther. 9, 650-657 (2004).
- Cashman, J. P. Immune gene therapy as a neoadjuvant to surgical excision to control metastatic cancers. Cancer Lett. , (2008).
