イントラ不可欠な顕微鏡による骨格筋のin vivo微小循環測定における
Summary
微小循環の観察のための新たな汎用性の高い方法が提示される。それは長期的な観察のため、およびpharmacophysiologicalまたは分子生物学的介入との組み合わせに適して考えられている。
Abstract
背景：画像処理のさまざまなモダリティが発明した後調節因子およびin vivo微小循環での詳細な生理機能は十分に明らかではない残っている。血流の多くの巨視的パラメータは流速を反映しながら、血流速度および赤血球（RBC）フラックスの変化は、顕微鏡観察で直線関係を保持しません。 RBC速度とRBCフラックス、RBCフラックスとプラズマ流の量、および顕微鏡観察の末梢組織での流量調節の時間的空間的異質性、使用して微小循環調節におけるより詳細な研究の必要条件のための科学的根拠との間の矛盾の報告がある生体顕微鏡。
方法：我々はマウスの胸骨乳様突起の筋の生体顕微鏡観察でのジェフリヒトマンの方法を変更した。マウスは麻酔、換気、および顕微鏡観察のためのPKH26L -蛍光標識赤血球を注入。
結果＆結論：蛍光標識された赤血球が検出さと広視野顕微鏡でも区別される。電気刺激による誘発筋収縮は、RBCフラックスの増加を誘発した。赤血球速度と毛細血管密度を含む他のパラメータの定量化が可能であった。マウスは、よく染色された赤血球は、顕微鏡観察、および電気刺激の注射を手術を容認。いいえ筋肉や血管の損傷は、提案手法は、比較的低侵襲と長期的な観測のために適していることを示唆し、観察されなかった。
Protocol
Discussion
重要なtechinicalな点は次のとおりです：観測（最適なレンズのための動物の生理状態の（1）メンテナンス（換気、perfusative溶液のpH、体温）、ステンドRBCの（2）注入量、および（3）の条件選択、蛍光強度）。潜在的な将来のアプリケーションは、次のとおりです。pharmacophysiologicalおよび/または分子生物学的介入と（a）の組み合わせ、動脈/細動脈 – 硬化症および血管新生の（b）の長期観測。
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我々は、筋肉の生体観察での彼のアドバイスをJWリヒトマンに感謝。
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| PKH26 dye | Sigma | 551/567 nm; Red fluorescent cell linker kit | ||
| C57BL/10 mice | Animal | Three to six month old males | ||
| pentobarbital | anesthetic, 50mg/kgBW, i.p. |
References
- Lichtman, J. W., Magrassi, L., Purves, D. Visualization of neuromuscular junctions over periods of several months in living mice. J Neurosci. 7, 1215-1222 (1987).
