Summary

في القياس الصغير تداول المجراة في الهيكل العظمي والعضلات التي البينية الحيوية الميكروسكوب

Published: May 28, 2007
doi:

Summary

ويقدم طريقة جديدة لمراقبة تنوعا من دوران الأوعية الدقيقة. فهو يعتبر مناسبة للمراقبة على المدى الطويل ، وعلى تركيبة مع التدخلات البيولوجية pharmacophysiological أو الجزيئي.

Abstract

معلومات أساسية : العوامل التنظيمية والفيزيولوجيا مفصل في الجسم الحي دوران الأوعية الدقيقة ظلت لم تتضح تماما بعد طرائق عديدة ومختلفة من التصوير قد اخترعت. في حين أن العديد من المعلمات العيانية تدفق الدم تعكس سرعة تدفق ، والتغيرات في سرعة تدفق الدم وخلايا الدم الحمراء (RBC) متقلب لا تعقد العلاقة الخطية في هذه الملاحظات المجهرية. هناك تقارير عن التفاوت بين سرعة وتدفق RBC RBC ، RBC تدفق البلازما وحجم التدفق والتنوع المكاني والزماني للتنظيم التدفق في الأنسجة الطرفية في الملاحظات المجهرية ، والأساس العلمي لشرط دراسات أكثر تفصيلا في مجال تنظيم استخدام microcirculatory intravital المجهري.

الطريقة : نحن تعديل طريقة جيف يختمن من الملاحظة المجهرية في الجسم الحي للعضلات القصية الخشائية الماوس. الفئران هي تخدير التهوية ، وحقنوا PKH26L fluorescently كرات الدم الحمراء ، المسمى لمراقبة مجهرية.

نتائج واستنتاجات : تم الكشف عن كرات الدم الحمراء وfluorescently المسمى حاليا بشكل جيد من قبل المجهر واسعة المجال. تقلص العضلات التي حركها زيادة التحفيز الكهربائي يتسبب في تدفق RBC. والكمي للمعلمات أخرى بما في ذلك السرعة والكثافة الشعرية RBC ممكنا. التسامح مع الفئران جيدا لعملية جراحية ، وحقن من كرات الدم الحمراء الملطخة ، والمراقبة المجهرية ، والتحفيز الكهربائي. لم يلاحظ أي ضرر العضلات أو الدم السفينة ، مما يوحي بأن لدينا وسيلة نسبيا أقل الغازية وملاءمة لفترة طويلة الأجل الملاحظات.

Protocol

RBC غشاء تلوين تم تصحيح خلايا الدم الحمراء الماوس من سلالة الفأر نفسه مع heparinization. وكانت ملطخة الماوس RBC مع PKH26 صبغ (551/567 نانومتر ؛ الأحمر رابط الخلية الفلورسنت عدة ، سيغما ، الولايات المتحدة). </li…

Discussion

نقاط هامة techinical هي كما يلي : (1) الحفاظ على الوضع الفسيولوجي للحيوان (التهوية ، ودرجة الحموضة ودرجة الحرارة حل perfusative الجسم ،) ، (2) حجم حقن RBC الملون ، والظروف (3) لمراقبة (عدسة الأمثل الاختيار ، وكثافة مضان). التطبيقات المحتملة في المستقبل هي على النحو التالي : (أ) بالاشتراك مع التدخلا?…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

نشكر ليختمن JW نصيحته في المراقبة المجراة في العضلات.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
PKH26 dye   Sigma   551/567 nm; Red fluorescent cell linker kit
C57BL/10 mice Animal     Three to six month old males
pentobarbital       anesthetic, 50mg/kgBW, i.p.

References

  1. Lichtman, J. W., Magrassi, L., Purves, D. Visualization of neuromuscular junctions over periods of several months in living mice. J Neurosci. 7, 1215-1222 (1987).
check_url/fr/210?article_type=t

Play Video

Citer Cet Article
Asai, A., Sahani, N., Ouchi, Y., Martyn, J., Yasuhara, S. In vivo Micro-circulation Measurement in Skeletal Muscle by Intra-vital Microscopy. J. Vis. Exp. (4), e210, doi:10.3791/210 (2007).

View Video