Anofel stephensi sivrisinekler, sıtma yaşayan Hindistan ve Asya'da vektörleri. Bu video bu türün sivrisinek sıtma karşı direnç kazandırırlar transgenlerin microinjections gerçekleştirmek için teknik göstermektedir. Bu video gösterdi metodoloji diğer sivrisinek türlerinin mikroenjeksiyon teknikleri uygulanabilir.
Abstract
Sivrisinek genomların ekzojen genlerin giriş, özel ilgi türü için hazırlanmış mikroenjeksiyon teknikleri gerektirir. Bu video protokol dönüştürülmüş sivrisineklerin nesil için Anofel stephensi embriyolar DNA yapıları microinject James laboratuvar tarafından kullanılan bir yöntem gösteriyor. Teknikleri, mikroenjeksiyon iğneler hazırlanması, toplanması ve hazırlanması embriyolar ve mikroenjeksiyon işlemi için gösterilmiştir.
Protocol
Mikroenjeksiyon, önceden hazırlanması: Kan linki sivrisinek: Pazartesi – Çarşamba önceki Cuma günü linki kadın enjeksiyon için. Aynı hafta Pazartesi, Perşembe ve Cuma günleri, yem kadın enjekte etmek. Kuvars iğne programı 2 ve izotonik tampon (Malzeme) kullanarak hazırlayın. Embriyolar "tüp Döşeme" düzenli Drosophila kültür flakon. Kapsayan filtre kağıdı ıslak bir disk ile alt Islak pamuk. Bir ucunda çift …
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
Injection Quartz needles
Sutter Instrument
O.D.- 1.0 mm, I.D.-0.70, 10 cm length, are prepared by drawing capillary tubing into a fine 3-8 um with a shaft of approximately 100-300 mm micropipette puller.
Terenius, O., Juhn, J., James, A. A. Injection of An. stephensi Embryos to Generate Malaria-resistant Mosquitoes. J. Vis. Exp. (5), e216, doi:10.3791/216 (2007).