الأنوفيلة البعوض stephensi نواقل الملاريا في الهند والتي تسكن في جميع أنحاء آسيا. هذا الفيديو يوضح هذه التقنية لأداء microinjections من هذا النوع مع الجينات المحورة التي من شأنها أن تضفي على الملاريا المقاومة للبعوض. الكثير من منهجية تظاهروا في هذا الفيديو هو تطبيق لتقنيات microinjection أنواع أخرى من البعوض.
Abstract
إدخال جينات دخيلة في الجينوم من البعوض microinjection يتطلب تقنيات مصممة خصيصا لأنواع محددة من الفائدة. هذا البروتوكول الفيديو يوضح الطريقة المستخدمة من قبل المختبر جيمس microinject يبني الحمض النووي في الأجنة stephensi الأنوفيلة لجيل من البعوض المتحول. وتتجلى أساليب إعداد microinjection الإبر ، وجمع واعداد وتنفيذ الأجنة microinjection.
Protocol
إعداد مقدما من microinjection : البعوض الدم : للحقن من الاثنين إلى الأربعاء الإناث إطعام في يوم الجمعة السابق. لحقن الخميس والجمعة ، تتغذى على الإناث يوم الاثنين من الأسبوع نفسه. تعد الإبر كو?…
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
Injection Quartz needles
Sutter Instrument
O.D.- 1.0 mm, I.D.-0.70, 10 cm length, are prepared by drawing capillary tubing into a fine 3-8 um with a shaft of approximately 100-300 mm micropipette puller.
Terenius, O., Juhn, J., James, A. A. Injection of An. stephensi Embryos to Generate Malaria-resistant Mosquitoes. J. Vis. Exp. (5), e216, doi:10.3791/216 (2007).