بروتوكول للفحوصات رني في البعوض الكبار (A. الغامبية)
Summary
وقد أثبتت عكس النهج الوراثية مفيدة للغاية لتحديد الجينات التي تشكل أساس المقاومة لمسببات الأمراض في ناقلات البعوض. هذا البروتوكول الفيديو يوضح الطريقة التي يستخدمها المختبر Dimopoulos لحقن الرنا المزدوج الجديلة في الأنوفيلة غامبياي ، التي ترعى طفيل الملاريا. ويتجلى أسلوب التلاعب الإعداد الحقن وحقن الرنا المزدوج الجديلة في القفص الصدري.
Abstract
وقد أثبتت عكس النهج الوراثية مفيدة للغاية لتحديد الجينات التي تشكل أساس المقاومة لمسببات الأمراض في ناقلات البعوض. هذا البروتوكول الفيديو يوضح الطريقة التي يستخدمها المختبر Dimopoulos لحقن الرنا المزدوج الجديلة في الأنوفيلة غامبياي ، التي ترعى طفيل الملاريا. ويتجلى أسلوب التلاعب الإعداد الحقن وحقن الرنا المزدوج الجديلة في القفص الصدري.
Protocol
Discussion
كفاءة إسكات الجين هو متغير جدا ويعتمد على عدد من العوامل بما في ذلك نص والبروتين بدوره على أسعار والرنا المزدوج الجديلة كفاءة امتصاص الخلايا والأعضاء. لقد وجدنا أن إسكات يبدأ في وقت مبكر ك 1 حقن آخر النهار ويمكن أن تصل إلى 6 أيام بعد الحقن. استخدام وسائل الكشف عن نص والبروتين مثل PC…
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Megascript | kit | Ambion | for dsRNA synthesis; T7 RNA polymerase-mediated in vitro transcription reaction | |
| RNeasy | Qiagen | For dsRNA purification | ||
| dsRNA | should be quantified and adjusted to 3 μg/ μL in water | |||
| fine-tipped forceps | ||||
| glass slide | ||||
| glass microcapillary needles | ||||
| microinjector | Drummond | Nanoject II | ||
| light microscope | mounted above a cold block | |||
| Petri dish | covered, glass | |||
| paper towels | ||||
| 10% sucrose | food | |||
| A. gambiae | Animal | mosquitos |
