Los huevos de ventanas de pollo para Estudios del Desarrollo
Summary
La facilidad de acceso del embrión ha permitido experimentos para trazar los destinos de células usando varios métodos, incluyendo pollo codorniz quimeras y tinte de etiquetado focal. En este artículo se demuestra un método de preparación de huevo que se ha optimizado el tiempo de supervivencia de largo.
Abstract
El estudio de desarrollo ha sido muy favorecida por el uso del embrión de pollo como modelo experimental. La facilidad de acceso del embrión ha permitido experimentos para trazar los destinos de células usando varios métodos, incluyendo pollo codorniz quimeras y tinte de etiquetado focal. Además, permite que las perturbaciones moleculares de varios tipos, incluyendo la colocación de revestimiento de proteínas cuentas y la introducción de ADN plásmido en el uso de la electroporación in ovo. Estos experimentos han arrojado datos importantes en el desarrollo de los sistemas nerviosos central y periférico. Para muchos de estos estudios, es necesario para abrir la cáscara del huevo y volver a cerrar sin perturbar el crecimiento del embrión. El embrión puede ser examinado en las sucesivas etapas de desarrollo en la reapertura de la cáscara del huevo. Aunque existen varios métodos excelentes para la apertura de los huevos de gallina, en este artículo se demuestra un método que se ha optimizado el tiempo de supervivencia de largo. En este método, el huevo descansa sobre un costado y una pequeña ventana se corta en la cáscara. Después del procedimiento experimental, la cáscara se usa para cubrir el huevo de la duración de su desarrollo. Cinta de plástico transparente que recubre la cáscara del huevo protege al embrión y ayuda a retener la hidratación durante el resto del período de incubación. Este método ha sido utilizado a partir de dos días de incubación, y ha permitido la supervivencia a través de las edades maduras de embriones.
Protocol
Discussion
Este método permite que el tiempo de supervivencia a largo después de las manipulaciones experimentales. Por ejemplo, el etiquetado de tinte estudios permitieron la supervivencia de E10 o más tarde en un estudio de mapeo destino (1). Además, se ha utilizado en estudios de electroporación in ovo que proporcionan la alteración de los niveles de expresión génica y el desarrollo necesario para proceder a las etapas posteriores del desarrollo (2-6). Esta técnica de ventanas se pueden utilizar en combinación con cualquier otro procedimi…
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Rotating incubator | Profi | Maintain at 37° Degrees with relative humidity set above 60% | ||
| 70 % EtOH | ||||
| gauze | ||||
| 3M plastic tape | ||||
| 10cc syringe | 1/egg | |||
| 18G needles | 1½ inch needle, 1/syringe | |||
| Dissection scissors | 4″ sharp straight blades | |||
| Fertilized Eggs |
References
- Cramer, K. S., Fraser, S. E., Rubel, E. W. . Dev Biol. 224, 138-151 (2000).
- Cramer, K. S., Bermingham-McDonogh, O., Krull, C. E., Rubel, E. W. . Dev Biol. 269, 26-35 (2004).
- Cramer, K. S., Cerretti, D. P., Siddiqui, S. A. . Dev Biol. 295, 76-89 (2006).
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- Krull, C. E. . Dev Dyn. 229, 433-439 (2004).
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