بيض الدجاج النوافذ للدراسات الإنمائية
Summary
وقد سمح لسهولة الوصول لجنين لاجراء تجارب على خارطة مصائر الخلايا باستخدام أساليب عدة ، بما في ذلك فرخ السمان الوهم والتنسيق العلامات صباغة. في هذه المقالة أسلوب واحد نبدي استعدادا البيض الذي تم الأمثل لأوقات طويلة البقاء على قيد الحياة.
Abstract
وقد تم دراسة التنمية ساعد الى حد كبير عن طريق استخدام الجنين الفرخ كنموذج تجريبي. وقد سمح لسهولة الوصول لجنين لاجراء تجارب على خارطة مصائر الخلايا باستخدام أساليب عدة ، بما في ذلك فرخ السمان الوهم والتنسيق العلامات صباغة. بالإضافة إلى ذلك ، فإنه يسمح للاضطرابات الجزيئي لأنواع عدة ، بما في ذلك الموضع من البروتين المغلفة الخرز وإدخال الحمض النووي البلازميد في استخدام electroporation البيضة. وقد أسفرت هذه التجارب بيانات هامة عن تطور الجهاز العصبي المركزي والمحيطي. بالنسبة لكثير من هذه الدراسات ، فمن الضروري فتح قشر البيض وreclose دون إقلاق نمو الجنين. يمكن فحص الجنين في مراحل النمو المتعاقبة من خلال إعادة فتح قشر البيض. في حين أن هناك عدة طرق ممتازة لفتح بيض الدجاج ، في هذه المقالة أن نبرهن أن أسلوب واحد وقد الأمثل لأوقات طويلة البقاء على قيد الحياة. في هذا الأسلوب ، والبيض تقع على جانبها ويتم قطع نافذة صغيرة في وعاء. بعد إجراء العملية التجريبية ، يتم استخدام قذيفة لتغطية البيض لمدة تطورها. شريط من البلاستيك الشفاف التي تغمر قشر البيض يحمي الجنين ويساعد على الاحتفاظ الماء خلال الفترة المتبقية من فترة الحضانة. وقد استخدم هذا الأسلوب في بداية يومين من الحضانة وسمح ببقاء عبر العصور الجنينية ناضجة.
Protocol
Discussion
هذا الأسلوب يسمح لأوقات طويلة البقاء على قيد الحياة بعد التلاعب التجريبية. على سبيل المثال ، سمحت صبغ وضع العلامات دراسات لبقاء E10 أو في وقت لاحق من مصير دراسة الخرائط (1). بالإضافة إلى ذلك ، تم استخدامها في الدراسات عن electroporation البيضة التي توفر تغيير في مستويات التعبير الجيني وال?…
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Rotating incubator | Profi | Maintain at 37° Degrees with relative humidity set above 60% | ||
| 70 % EtOH | ||||
| gauze | ||||
| 3M plastic tape | ||||
| 10cc syringe | 1/egg | |||
| 18G needles | 1½ inch needle, 1/syringe | |||
| Dissection scissors | 4″ sharp straight blades | |||
| Fertilized Eggs |
References
- Cramer, K. S., Fraser, S. E., Rubel, E. W. . Dev Biol. 224, 138-151 (2000).
- Cramer, K. S., Bermingham-McDonogh, O., Krull, C. E., Rubel, E. W. . Dev Biol. 269, 26-35 (2004).
- Cramer, K. S., Cerretti, D. P., Siddiqui, S. A. . Dev Biol. 295, 76-89 (2006).
- Huffman, K. J., Cramer, K. S. . Dev Neurobiol. 67, 1655-1668 (2007).
- Krull, C. E. . Dev Dyn. 229, 433-439 (2004).
- Gerlach-Bank, L. M., Cleveland, A. R., Barald, K. F. . Dev Dyn. 229, 219-230 (2004).
