Summary
चूहे में रक्त वाहिकाओं के जीर्ण कैथीटेराइजेशन अक्सर पदार्थों के प्रशासन के लिए आवश्यक है, समय की अवधि में या प्रत्यक्ष होश रक्तचाप मापन के लिए खून का नमूना प्राप्त करने. चूहे और इसी होश में पशुओं में रक्तचाप की माप के और्विक धमनी कैथीटेराइजेशन प्रदर्शन किया जाएगा.
Abstract
अध्ययन के कई क्षेत्रों में, प्रयोगशाला अध्ययन में संचार प्रणाली के लिए पहुँच आवश्यक है. लंबे समय से प्रत्यारोपित कैथेटर का प्रयोग चूहों में भेषज अध्ययन के एक शोधकर्ता को प्रभावी ढंग से करने की अनुमति और humanely पदार्थों प्रशासन, रक्त नमूने दोहराया प्रदर्शन और रक्तचाप और दिल की दर के प्रति सचेत प्रत्यक्ष मापन में सहायता. एक बार कैथेटर प्रत्यारोपित किया जाता है लंबी अवधि के नमूने संभव है. प्रत्यक्षता और कैथेटर जीवन ताला समाधान इस्तेमाल किया, निस्तब्धता आहार और कैथिटर सामग्री सहित कई कारकों पर निर्भर करता है. इस वीडियो और्विक धमनी और चूहे की शिरापरक कैथीटेराइजेशन के कार्यप्रणाली का प्रदर्शन करेंगे. इसके अलावा वीडियो ऊरु शिरापरक और रक्त नमूने, दवा प्रशासन और धमनी कैथेटर की एक होश में रक्तचाप और दिल की दर की माप लेने आज़ादी से बढ़ चूहे में उपयोग के लिए धमनी कैथेटर का उपयोग प्रदर्शन करेंगे. एक पगहा और एक कुंडा प्रणाली से जुड़ी दोहन जानवर हो सकता है के लिए अनुमति देगाका इस्तेमाल किया और जानवर के लिए न्यूनतम विघटन के साथ अनुसंधानकर्ता द्वारा नमूने ले लिया है. कैथेटर की प्रत्यक्षता बनाए रखने के लिए, कैथेटर की सावधान दैनिक रखरखाव ताला (100 यू / एमएल heparinized खारा) समाधान, मशीन जमीन कुंद टिप सिरिंज सुई और सिरिंज फिल्टर का उपयोग का उपयोग करने की क्षमता संदूषण को कम करने के लिए आवश्यक है. सावधान सड़न रोकनेवाला सर्जिकल तकनीक, उचित कैथेटर सामग्री और सावधान कैथेटर रखरखाव तकनीक के साथ, यह संभव है समय की लंबी अवधि (कई हफ्तों) के लिए पेटेंट कैथेटर और स्वस्थ पशुओं को बनाए रखने के लिए.
Protocol
1. पहले सर्जिकल प्रक्रिया शुरू
नोट: पहले शुरुआत करने के लिए किसी भी जानवर की प्रक्रिया सुनिश्चित करें कि आप अपनी संस्था / संगठन के माध्यम से उचित अनुमति प्राप्त है . सभी अस्तित्व सर्जरी के साथ के रूप में, यकीन है कि सर्जरी बाँझ शर्तों के तहत प्रदर्शन किया है और उचित दर्द दवा और जरूरत एंटीबायोटिक दवाओं के एक सफल परिणाम के लिए उपयोग किया जाता है.
- पहले कैथीटेराइजेशन प्रक्रिया की शुरुआत उन्हें बाँझ खारा साथ निस्तब्धता वे पेटेंट कर रहे हैं सुनिश्चित करने के द्वारा कैथेटर का मूल्यांकन.
- चूहे anesthetize.
- चूहे की शल्य चिकित्सा की प्रक्रिया के लिए तैयार.
- शल्य चिकित्सा के क्षेत्रों, जो गर्दन के पीछे कंधे ब्लेड के बीच () और आंतरिक पैर क्षेत्र शामिल हैं से फर दाढ़ी.
- Betadine और एक 70% इथेनॉल साफ़ क्रमशः का प्रयोग, मुंडा शल्य चिकित्सा केंद्र में शुरू और एक परिपत्र झाड़ू बाहर बनाने क्षेत्रों साफ़. दोहरानाप्रत्येक क्षेत्र के लिए इस 3 बार, 70% इथेनॉल के साथ एक अंतिम सफाई के साथ खत्म.
- एक बाँझ और शल्य चिकित्सा के क्षेत्रों में जगह बाँझ टांगना सतह पर पशु रखें. (प्रेस n सील का उपयोग एक आदर्श शल्य अन्वेषक प्रक्रिया के दौरान पशुओं पर नजर रखने के लिए अनुमति देता है draping है.)
- शल्य चिकित्सा की प्रक्रिया के लिए सभी सर्जिकल उपकरणों सुनिश्चित निष्फल किया गया है.
2. सर्जिकल क्षेत्रों के कैथेटर नियुक्ति के लिए तैयार
- चूहे प्रवण बिछाने (अपने पेट पर) के साथ, लगभग एक आधा इंच (12 मिमी) कैंची के साथ कंधे ब्लेड या एक स्केलपेल, उसके बाद कुंद टुकड़े करना एक उपचर्म में "जेब" के स्तर पर गर्दन के पीछे पर क्षैतिज चीरा वापस एक तिमाही के आकार के लगभग. यह एक क्षेत्र के रूप में इस्तेमाल किया जाएगा के लिए टयूबिंग की एक छोटी राशि है कि पशुओं के विकास और / या आंदोलन के लिए क्षतिपूर्ति करना होगा जगह है, यानी कि कैथेटर पर नहीं निकाला है और इस प्रकार धमनी से हटा यह जगह थीअंदर घ (वैकल्पिक रूप से इस कदम कैथेटर सुरंग से पहले तुरंत प्रदर्शन कर सकते हैं.)
- चूहे को अपनी पीठ (लापरवाह स्थिति) पर प्लेस और वंक्षण क्षेत्र [लगभग साढ़े इंच चीरा (12 मिमी) में हिंद पैर की प्राकृतिक कोण के साथ एक चीरा बनाने के.
- संयोजी ऊतक (चित्रा 1) अलग टुकड़े करना (कुंद कैंची की नोक, hemostats, कपास swabs, आदि का उपयोग कर सकते हैं) (आम तौर पर एक 45 डिग्री के कोण पर अपने कुंद इत्तला दे दी कैंची और / या कपास swabs धारण करके यह आसान स्थानीयकरण सुनिश्चित ब्लंट और्विक धमनी और शिरा जब तक ब्याज की) क्षेत्र को उजागर कर रहे हैं.
- नस गहरे लाल रंग में है और धमनी साफ है और नस की तुलना में उज्जवल है. तंत्रिका कि धमनी के साथ चलाता स्वर में श्वेताभ है.
- लेग क्षेत्र में टुकड़े करना करने के लिए पैर के अंदर के साथ cathete के एक छोटे से अनुभाग के स्थान के लिए त्वचा के नीचे एक छोटा सा खुला क्षेत्र (यानी जेब, लगभग एक चौथाई के आकार) बनाना ब्लंटआर (फिर से खाता पशु आंदोलन में लेने के लिए और पुरानी प्लेसमेंट अगर पशु की वृद्धि).
- चीरा क्षेत्र में retractors इतनी जगह है कि आप पूरी तरह से धमनी और शिरा देख सकते हैं.
- ठीक टिप का उपयोग संदंश धीरे तंत्रिका (रंग में श्वेताभ) है कि और्विक धमनी और शिरा से दूर धमनी के साथ है अलग. (चित्रा 2) करने के लिए काट नुकसान नहीं या तंत्रिका सावधान रहो.
- धमनी और एक इकाई के रूप में नस अलग, एक लगभग ¼ (5-7 मिमी) इंच धमनी / शिरा की लंबाई अनुभाग का पर्दाफाश करने की कोशिश कर रहा है.
- धमनी से नस को अलग करने में इस प्रक्रिया को दोहराएँ. वाहिकाओं के लिए अपने शल्य चिकित्सा उपकरणों (अर्थात् ठीक टिप संदंश) सीधा रखें और समानांतर में जहाजों अलग. यह फाड़, चुभन या वाहिकाओं को नुकसान पहुँचाए से बचने में मदद करता है. ठीक टिप संदंश और नीचे और धीरे धीरे संदंश खोलने और इस दोहरा से नस धमनी के बीच धीरे रखकर, तुम धीरे धीरे वाहिकाओं अलग होगा. नोट: यदि आप आंसू या कुछ निरीक्षणखून बह रहा है एक बाँझ कपास झाड़ू से साफ़ करना और / या 2 एक्स 2 धुंध और क्षेत्र पर दबाव जगह का उपयोग करें जब तक खून बह रहा बंद कर दिया है, तो सर्जरी के साथ जारी है.
3. कैथेटर टनेलिंग
- प्लेस बाँझ खारा चीरा पर 2 x 2 धुंध लथपथ और अपने पेट को जानवरों की बारी.
- वापस कि पहले बनाया गया था और कूल्हों का स्तर वापस नीचे subcutaneously संदंश गाइड [सुनिश्चित hemostats के सुझावों को बताया, रीढ़ की हड्डी की ओर नहीं (पर चीरा में रोचेस्टर Pean संदंश (लंबी सीधे संदंश) प्लेस ) रीढ़ की हड्डी घायल से बचने के लिए]. लगभग कम कूल्हे क्षेत्र चीरा है कि लेग क्षेत्र में बनाया गया था की ओर hemostat टिप बारी और hemostats के बाहर तैयार पैर चीरा के टिप धक्का.
- धीरे संदंश के साथ कैथेटर (अंत नहीं है कि धमनी / शिरा में डाला जाएगा) के अंत समझ और धीरे गुहा कि बनाया गया था के माध्यम से कैथेटर पुलऔर अंततः गर्दन चीरा बाहर.
- उपयुक्त सुई पा टिप संबंधित कैथेटर के अंत पर 20 हेपरिन / यू मिलीग्राम / खारा से भरा सिरिंज प्लेस और heparinized / खारा साथ कैथेटर (सुनिश्चित करें कि वहाँ कोई हवाई बुलबुले हैं) को भरने. एक बार फिर से जाँच करें कि कैथेटर पेटेंट कर रहे हैं और कोई नुकसान कैथेटर के लिए आ गया है. कैथेटर लाइनों के अंत में संलग्न करने के लिए सुनिश्चित करें कोई हवा कैथेटर लाइनों में मिलता है और अपनी पीठ पर चूहे बारी एक बार फिर कर है सीरिंज छोड़ो.
4. और्विक शिरा और धमनी में कैथेटर डालने (चित्रा 3)
- और्विक शिरा के तहत एक बाँझ / रेशम धागा 4.0 के जोड़ टुकड़ा प्लेस और फिर जोड़ अंत में रेशम में कटौती. वहाँ अब रेशम की नस के तहत दो टुकड़े हो जाएगा. या वैकल्पिक रूप से, नस के तहत 4.0 रेशम के 2 टुकड़ों को अलग - अलग जगह.
- रेशम कि आप नस के अंतर्गत रखा, पैर की दिशा में एक टुकड़ा (बाहर का अंत) और शरीर के प्रति अन्य अलग. टीयानी शरीर के लिए निकटतम तरफ एक ढीला संयुक्ताक्षर, तो छोटे hemostats का उपयोग करने के लिए, रेशम समझ और सिखाया खींच लेकिन गाँठ कस नहीं है. रेशम की अन्य टुकड़ा के रूप में संभव के रूप में में दूर पैर (बाहर का अंत) की ओर खींचो और एक ट्रिपल गाँठ में इस टाई के लिए, छोटे hemostats के साथ रेशम समझ और खींच सिखाया. इस विधि नस रक्त के साथ भरने के लिए, चीरा है कि कैथेटर (चरण 4) डालने के लिए आवश्यक है बनाने के लिए यह आसान बनाने की अनुमति देगा.
- नस पर 1-2 lidocaine की बूंदों रखें.
- Vanna सूक्ष्म विदारक - कैंची का प्रयोग, नस में एक छोटा सा चीरा के माध्यम से और एक 45 डिग्री के कोण पर लगभग ¼ बनाने.
- चीरा और संदंश का एक और जोड़ी का उपयोग में ठीक इत्तला दे दी संदंश (45 संदंश) प्लेस, ध्यान से नस कैथेटर में फ़ीड. धीरे खोलने के संदंश है कि नस में रखा जाता है, के रूप में इस शोधकर्ता धीरे संदंश के तहत और नस में शिरापरक कैथेटर जगह की अनुमति देगा.
- जब कैथेटर पूरी तरह से डाला जाता है (approएक्स 6-7 सेमी) (जब कैथेटर एक निशान बनाने कैथेटर पर रखा गया है की पहचान जब कैथेटर पूरी तरह से डाला जाता है में सर्जन की सहायता है) (यह पेट रग Cava में शिरापरक कैथेटर स्थानों), नस के आसपास पूर्वकाल संयुक्ताक्षर कस और कैथेटर, एक ट्रिपल गाँठ बांधने (यह सुनिश्चित करें कि यह नस नहीं occluding है). पैर के पास रेशम सीवन (पीछे संयुक्ताक्षर) का उपयोग फिर से कैथेटर (ट्रिपल गाँठ) सुरक्षित और स्थान सुनिश्चित करने के लिए. धीरे धीरे वापस सिरिंज आकर्षित जब तक वहाँ एक छोटे कैथेटर, जो करने के लिए सुनिश्चित करें कि सिवनी समुद्री मील भी तंग और कैथेटर कार्यात्मक है कि नहीं कर रहे हैं में मदद करता है में दिखाई रक्त है. जाँच के बाद, सवार दबाना जब तक रक्त अब कैथेटर में दिखाई नहीं है.
नोट: यह संभव है ऊरु नस में 2 कैथेटर सम्मिलित अगर जरूरत है. - 9-13 कदम निम्नलिखित अपवादों के साथ एक और्विक धमनी कैथेटर जगह दोहराएँ:
- पैर (पीछे) एक ट्रिपल गाँठ के साथ निकटतम रेशम टाई और ताऊ पुलपहले शरीर (पूर्वकाल) के पास ढीले संयुक्ताक्षर पहले से बांधने कैथेटर प्लेसमेंट के लिए चीरा ght. यह धमनी खून में कटौती के लिए यह आसान बनाने के साथ भरने के लिए अनुमति देगा. सुनिश्चित करें प्रॉक्सिमल सीवन खींच लिया है करने के लिए धमनी काटने धमनी से पहले रोक देना सिखाया. यह खून की कमी से बचने जब काट दिया है.
- सम्मिलित धमनी कैथेटर और्विक धमनी से लगभग 5 सेमी (यह उदर महाधमनी में कैथेटर स्थानों).
- जब सीवन के साथ कैथेटर हासिल यकीन है कि सिवनी भी तंग और कैथेटर occluding नहीं है.
5. सर्जिकल लपेटें - अप
- कैथेटर और पैर के अंदर पर जगह (पाश क्षेत्र था कि कुंद पहले dissected में फिट होना चाहिए) में चौथाई आकार पाश के लिए एक पैसा भी बनाओ. दोनों कैथेटर रखने के बाद, उन्हें 5.0 सर्जिकल सिवनी की मांसपेशी परत में 1-2 टांके के साथ सुरक्षित.
- गैर निरंतर sutur के साथ 4.0 Ethilon के साथ चीरा बंदतों.
- अपने पेट पर चूहे मुड़ें और और पीठ में विच्छेदित जेब में जगह तिमाही के आकार के बारे में कैथेटर में एक पाश बना. सिवनी के साथ चीरा बंद करें.
- Vetbond की एक बूंद का प्रयोग, पीठ में कैथेटर को सुरक्षित.
- गद्देदार hemostats के साथ वापस चीरा के निकट कैथेटर को दबाना और छोर से सीरिंज को हटाने.
- पगहा प्रकार एक जैकेट के साथ चूहे फ़िट, कैथेटर (हेपरिन ताला बनाए रखने), टोपी और गद्देदार hemostats हटायें.
- लंबी अवधि के रखरखाव के लिए 20 हेपरिन / यू मिलीग्राम / खारा के साथ नमकीन घोल कैथेटर की जगह.
6. कैथेटर का रखरखाव (बाँझ दस्ताने प्रक्रिया के दौरान पहना होना चाहिए)
- गद्देदार संदंश के साथ कैथेटर दबाना.
- कैथेटर प्लग निकालें.
- कैथेटर पर ताला समाधान के साथ एक कुंद इत्तला दे दी सिरिंज रखें.
- संदंश Unclamp.
- ताला समाधान के साथ कैथेटर भरें (पूर्व देते मात्रा हैrmined आमतौर पर 0.3 मिलीलीटर).
- जबकि कैथेटर टिप में रक्त के किसी भी backflow को रोकने के लिए और सिरिंज हटायें निस्तब्धता कैथेटर दबाना.
- कैथेटर प्लग बदलें.
- संदंश Unclamp और धीरे से थोड़ा में प्लग पुश करने के लिए सुनिश्चित करें कोई खून कैथेटर की नोक में है.
7. रक्त नमूनाकरण (बाँझ दस्ताने प्रक्रिया के दौरान पहना होना चाहिए)
गद्देदार संदंश के साथ कैथेटर दबाना.
- कैथेटर प्लग निकालें.
- धीरे धीरे ताला समाधान का उपयोग कर एक कुंद इत्तला दे दी सिरिंज और त्यागें वापस ले लें.
- कैथेटर के नमूने सिरिंज संलग्न और धीरे धीरे वापस लेने का नमूना है.
- गद्देदार संदंश के साथ दबाना कैथेटर और ताला समाधान के साथ एक सिरिंज जगह कैथेटर पर कैथेटर और ताला समाधान के साथ फिर से भरना.
- कैथेटर क्लैंप जबकि समाधान के साथ कैथेटर फिर से भरने.
- कैथेटर प्लग को पुन: सम्मिलित करें.
- गद्देदार संदंश निकालें और धीरे से धक्का टी वह थोड़ा आगे में प्लग.
8. औषधि आसव
- गद्देदार संदंश के साथ कैथेटर दबाना.
- कैथेटर प्लग निकालें.
- धीरे धीरे ताला समाधान का उपयोग कर एक कुंद इत्तला दे दी सिरिंज और त्यागें वापस ले लें.
- कैथेटर के दवा भरा सिरिंज संलग्न और जानवर में पदार्थ पानी में डालना.
- एक 3 तरह के रूप में के रूप में अच्छी तरह से पानी निकलने की टोंटी एक मध्यवर्ती का उपयोग करें यदि एकाधिक इंजेक्शन की आवश्यकता हैं, कर सकते हैं इस तरह के जानवरों में कम तरल पदार्थ जलसेक की आवश्यकता होती है.
- एक भी निरंतर सुई लेनी लिए एक बाँझ फिल्टर के साथ एक निरंतर प्रेरणा सिरिंज पंप संलग्न कर सकते हैं.
- गद्देदार संदंश के साथ दबाना और ताला समाधान के साथ एक सिरिंज जगह कैथेटर पर कैथेटर और ताला समाधान के साथ फिर से भरना.
- कैथेटर क्लैंप जबकि समाधान के साथ कैथेटर फिर से भरने.
- कैथेटर प्लग को पुन: सम्मिलित करें.
- गद्देदार संदंश निकालें और धीरे से थोड़ा आगे प्लग धक्का.
- गद्देदार संदंश के साथ धमनी कैथेटर दबाना और कैथेटर प्लग निकाल.
- दबाव transducer धमनी पंक्ति संलग्न करें.
- रक्तचाप संग्रह के लिए सॉफ्टवेयर का उपयोग कर करने के लिए निर्माण निर्देशों का पालन करें.
- रक्तचाप की निगरानी अवधि के समापन पर, गद्देदार संदंश का उपयोग कैथेटर दबाना और transducer से डिस्कनेक्ट.
- ताला समाधान के साथ कैथेटर फ्लश और कैथेटर प्लग की जगह के रूप में ऊपर वर्णित है.
10. प्रतिनिधि परिणाम
एक प्रतिनिधि रक्तचाप को मापने के एक सचेत आज़ादी चलती जानवर से लिया गया था और चित्रा 4 में प्रस्तुत है. (3 / स्नातकीय किग्रा iv) Phenylephrine, एक अल्फा 1 एड्रीनर्जिक रिसेप्टर agonist, और्विक शिरा लाइन रक्तचाप बढ़ाने में प्रशासित किया गया था, जबकि एक साथ और्विक धमनी लाइन से ब्लड प्रेशर को मापने. Phentolamine (4 मिलीग्राम / किग्रा, iv),nonselective अल्फा एड्रीनर्जिक प्रतिपक्षी, तो रक्तचाप कम दिलाई.
चित्रा 1 ऊतक के ब्लंट विच्छेदन. उसकी पीठ पर चूहे के साथ, आप लगभग एक आधा इंच (12 मिमी) चीरा है हिंद पैर के कोण पर किया जाएगा और कुंद कैंची या hemostats आप कुंद संयोजी ऊतक टुकड़े करना और्विक धमनी और शिरा का पर्दाफाश का उपयोग.
चित्रा 2 और्विक धमनी और संयोजी ऊतक से नस के पृथक्करण.
चित्रा 3 कैथेटर नियुक्ति. Vanna का उपयोग सूक्ष्म विदारक कैंची एक छोटा सा चीरा जगह लगभग ¼ पोत के माध्यम से रास्ते से एक 45 डिग्री के कोण (ऊपर) और वें में ठीक - इत्तला दे दी संदंश जगहई चीरा और संदंश का एक और जोड़ी का उपयोग पोत (मध्य) में कैथेटर खिलाओ. अन्त में, कैथेटर के स्थान के पूरा होने पर जगह (नीचे) में कैथेटर सिवनी.
चित्रा 4 प्रतिनिधि रक्तचाप एक सचेत आज़ादी चलती जानवर से ली गई है उपाय.
Discussion
धमनी और शिरा कैथीटेराइजेशन ऐतिहासिक दोनों तीव्रता और लंबे समय से रक्तचाप, रक्त नमूना की निगरानी के लिए इस्तेमाल किया गया है और प्रयोगात्मक चूहे पशु मॉडल 1-4 पदार्थों में वितरित. इन शल्य इंस्ट्रुमेन्टेशन्स के एक प्रमुख लाभ यह है कि यह निगरानी प्रक्रियाओं सहित, रक्त नमूने, दवा प्रशासन और रक्तचाप की निगरानी, को न्यूनतम गड़बड़ी और / एक पशु के लिए या तनाव के साथ आयोजित किया करने की अनुमति देता है. कई जांचकर्ताओं प्रोटोकॉल लिखा है और विशिष्ट तरीके है जिसके द्वारा उनकी प्रयोगशाला शल्य 5-8 प्रक्रिया करता है. वीडियो और चित्र प्रदर्शित हमारी प्रयोगशाला क्या और्विक धमनी और शिरापरक कैथीटेराइजेशन प्रक्रिया का संबंध है के साथ सफल हो पाया है.
चूहे आमतौर पर उनके छोटे आकार और हैंडलिंग में सुविधा की वजह से वैज्ञानिक अध्ययन के एक भीड़ के लिए प्रयोगशाला में इस्तेमाल किया. वहाँ कई स्थानों जहां एक पुरानी हैंकैथेटर एक जानवर के भीतर रखा जा सकता है गले का शिरा, उदर महाधमनी, मन्या धमनी और और्विक धमनी, कुछ नाम सहित. कैथेटर प्रत्यक्षता की वृद्धि की लंबाई में चूहे पुराने कैथीटेराइजेशन परिणामों के लिए ऊरु स्थान और पूर्व शल्य पशु वजन के सबसे तेजी से अन्य कैथेटर 9 स्थानों के लिए तुलना में वसूली की थी.
कई जांचकर्ताओं के रूप में के रूप में अच्छी तरह से तीव्र क्रोनिक रक्त नमूने 1-5,11-13 लिए निबाह कैथेटर का इस्तेमाल किया है. एक जानवर के कई अध्ययनों में अनेक रक्त की आवश्यकता ड्रॉ और बाहरी केन्युलेशन / कैथीटेराइजेशन एक पद्धति है कि इसकी प्रकृति गैर अभिघातजन्य कारण लाभप्रद है, इसके अलावा यह जबकि पशु के प्रति सचेत है किया जा सकता है, इस प्रकार anesthetics के प्रभाव के द्वारा ही सीमित नहीं है और भी आज़ादी जानवर 1,10 हो जा सकते हैं. सबसे अच्छा तरीका है जिसके द्वारा रक्त के नमूनों को प्राप्त करने के लिए और कृन्तकों में तनाव हार्मोन उपाय लंबे समय से किया गया है 6,13 बहस. Pharmacokinetic Studi संबंध के साथते, अनुसंधान जानवर के कैथीटेराइजेशन न्यूनतम संयम के साथ दोहराया रक्त नमूने परमिट जब एक लंबे समय से प्रत्यारोपित कैथेटर प्रणाली का उपयोग कर. इसके अलावा, अध्ययन एड्रेनालाईन, noradrenaline और आज़ादी जानवरों (30 सेकंड) संभाला है और या (5 मिनट) स्र्द्ध 14 की तुलना में चूहों (कंठ कैथेटर) हिल के प्लाज्मा में dopamine के कम बेसल सांद्रता से पता चला है. एक अतिरिक्त विधि है जिसके द्वारा तनाव में वृद्धि विचार करने के लिए प्लाज्मा corticosterone स्तर को मापने के द्वारा है. पहले यह सुझाव दिया गया था कि यहां तक कि शल्य चिकित्सा वसूली समय की तीन से चार दिनों के बाद कि प्लाज्मा corticosterone स्तर पुरानी cannulated 15 चूहे में बुलंद थे . हालांकि, पद्धति में हाल ही में सुधार निर्धारित किया है कि वहाँ uncannulated 16 चूहों की तुलना में गले का शिरा cannulated चूहों में आधारभूत प्लाज्मा corticosterone स्तर में कोई मतभेद नहीं हैं. इसके अलावा, corticosterone विश्लेषण के लिए HPLC पद्धति भी पता चला है कि corticosterएक स्तर संयम तनाव से बुलंद कर रहे हैं, लेकिन कंठ 16 कैथीटेराइजेशन के बाद स्थिर,.
पुरानी कैथीटेराइजेशन का एक अतिरिक्त उपयोग कृन्तकों में रक्त और हृदय की दर के दबाव के माप है. वहाँ कई तरीके है कि चूहे में रक्तचाप और दिल की दर को मापने के लिए उपयोग कर रहे हैं, इन गैर इनवेसिव पूंछ कफ के तरीके, radiotelemetry प्रक्रियाओं और प्रत्यक्ष निबाह कैथेटर शामिल हैं. प्रत्येक विधि अपने फायदे और नुकसान है, जो विस्तार में अन्य प्रकाशनों में वर्णित हैं. निबाह तरल पदार्थ से भरे कैथेटर चूहे के भीतर कई धमनियों में प्रत्यारोपित किया जा सकता है है. और्विक धमनी है, लेकिन एक धमनी है कि इस उपाय के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. रक्त दबाव / दिल की दर के उपायों के लिए, कैथेटर के बाहर का अंत एक calibrated दबाव transducer से जुड़ा है. कैथेटर है कि एक कुंडा से जुड़ा है जानवर की मुक्त आवाजाही की अनुमति एक सुरक्षात्मक वसंत में रखे जा सकता है, या एक बटन SURGI जुड़ीबड़ी सफाई जानवर को प्रत्यारोपित. निबाह कैथेटर 17,18 जानवर पर लंबे समय तक तनाव कम से कम करने का लाभ है . इसके अलावा सामग्री सस्ती कर रहे हैं, अंशांकन दबाव उपायों और सतत दीर्घकालिक उपायों के लिए आसान है कई 19 हफ्तों के लिए अपेक्षाकृत कम तनाव की शर्तों के तहत प्राप्त किया जा सकता है. हम आलसी हो अगर हम उल्लेख नहीं किया है कि इस तकनीक को नुकसान कर रहे हैं सहित, यह एक शल्य चिकित्सा इनवेसिव तकनीक है, कैथेटर के रखरखाव के लिए प्रत्यक्षता, धमनी को नुकसान कैथेटर का आरोपण के कारण और बनाए रखने के लिए आवश्यक है के संभावित संक्रमण के लिए कुछ नाम.
लंबे समय से प्रत्यारोपित धमनी कैथेटर से रक्त दबाव प्रत्यक्ष रिकॉर्डिंग के जीर्ण उपायों के लिए और अधिक तकनीकी चुनौती है लेकिन अधिक सटीक हैं और लगातार जानवर परेशान बिना किया जा सकता है. टेल - कफ माप कम सटीक हैं, लेकिन वे सर्जरी की आवश्यकता नहीं है और भी दोहराना जा सकता हैएड. टेल - कफ तरीके जानवर की पूंछ वाहिकाओं को चौड़ा करना 20 नाड़ी का पता लगाने की सुविधा हीटिंग के रूप में की आवश्यकता के रूप में अच्छी तरह से निपटने. हैंडलिंग और जोडी गर्मी तनाव रक्तचाप मापन प्रभावित करती है, इस तरह वास्तव में सटीक उपाय प्रदान नहीं कर सकते हैं. इसके अलावा, गैर प्रत्यक्ष विधि पूंछ - कफ आसान एक साथ रक्त नमूने या दवा प्रशासन की अनुमति नहीं है.
एक अतिरिक्त विधि टैलिमीटर का सीधा उपाय है जिसके द्वारा प्राप्त किया जा सकता है पद्धति का उपयोग कर रहा है. टेलीमेटरी होश में स्वतंत्र रूप से चलती पशुओं में संयम के बिना या 18 anesthetics के समय की लंबी अवधि के लिए लगातार रक्तचाप (और अन्य उपायों) उच्च गुणवत्ता रिकॉर्डिंग की अनुमति देता है. हालांकि, टेलीमेटरी उपकरणों आदर्श जबकि बहुत महंगा है. "सेटअप" की कमी हुई और परिचालन लागत, आसानी से दवाओं प्रशासन और आसानी से होश में स्वतंत्र रूप से चलती जानवरों में रक्त के नमूने लेने की क्षमता: जब टेलीमेटरी की तुलना में, कैथीटेराइजेशन लाभ में शामिल हैं. administratदवाओं और पदार्थों, और अनुसंधान जानवर से रक्त के नमूने प्राप्त करने के आयन जबकि न्यूनतम जानवर परेशान है, इस प्रकार के जानवरों को तनाव कम करने और एक अधिक सटीक उपाय के लिए अनुमति देता है किया जा सकता है.
Disclosures
उत्पादन और इस वीडियो लेख के नि: शुल्क प्रवेश ADInstruments द्वारा प्रायोजित है.
Acknowledgments
लेखकों के चित्र के योगदान के लिए डॉ. एंड्रयू राजा पीएचडी, और कैटरीना राजा स्वीकार करते हैं कामना करता हूं. NIH अनुदान: R00HL087927.
Materials
Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
Arterial Catheter | Consumable | SAI Infusion | RFA-01 | |
Venous Catheter | Consumable | Scientific Commodities Inc. | BB518-20 & BB31785-V/2 | |
27g 1/2" Blunt Needle | Equipment | Integrated Dispensing Solutions, Inc. | 9991113 | |
23g 1/2" Blunt Needle | Equipment | Integrated Dispensing Solutions, Inc. | 9991109 | |
PowerLab/8SP | Equipment | ADInstruments | ML765 | |
Quad Bridge | Equipment | ADInstruments | ML118 | |
LabChart 7.2 | Software | ADInstruments | ||
BP Transducer with stopcock & Cable | Equipment | ADInstruments | MLT844 | |
Single Channel Swivel | Equipment | Instech Laboratories, Inc | 375/22PS | |
Single Axis-Counter Balance Swivel Mount | Equipment | Instech Laboratories, Inc | CM375BP | |
Covance Infusion Harness | Equipment | Instech Laboratories, Inc | CIH105 | |
Table Top Isoflurane Anesthesia Unit | Equipment | Protech International, Inc. | 61020 | |
Rodent Anesthesia Mask | Equipment | Protech International, Inc. | RAM-02 | |
Rodent Induction Chamber | Equipment | Protech International, Inc. | RIC-01 | |
Anesthesia Gas Filter Canister | Equipment | Protech International, Inc. | 80120 | |
Tabletop Laminar Flow Hood | Equipment | Sentry Air Systems, Inc. | SS-200-WSL | |
Oster Golden A5 | Equipment | Oster Professional Products | 78005-140 | |
Fiber Optic Light with Dual Gooseneck Guide | Equipment | LW Scientific, Inc. | ILL-1502-DGG1 | |
Deltaphase Isothermal Pad | Equipment | Braintree Scientific, Inc. | 39DP | |
Cotton-Tipped Applicators | Consumable | Solon Manufacturing Company | 36200 | |
Gauze Sponges 2"x2" | Consumable | Kendall | 2146 | |
5-0 Nylon Suture | Consumable | Ethicon Inc. | 661G | |
4-0 Silk Suture | Consumable | Deknatel | 8-S, 136075-0208 | |
Tissue Adhesive | Consumable | 3M | 1469SB | |
Splinter & Fixation Forceps | Equipment | George Tiemann & Co. | 160-55 | |
Student Tissue Forceps | Equipment | Fine Science Tools | 91121-12 | |
Micro Forceps/Bracken Forceps | Equipment | George Tiemann & Co. | 10-1942 | |
Extra Fine Graefe Forceps | Equipment | Fine Science Tools | 11152-10 | |
Olsen-Hegar Needle Holder | Equipment | Fine Science Tools | 12002-12 | |
Student Halsted-Mosquito Hemostat | Equipment | Fine Science Tools | 91308-12 | |
Rochester Pean Forcep | Equipment | Biomedical Research Instruments | 31-1640 | |
Student Surgical Scissors | Equipment | Fine Science Tools | 91402-12 | |
Dumont Forceps | Equipment | Fine Science Tools | 11251-35 | |
Micro Dissecting Scissors | Equipment | George Tiemann & Co. | 160-210 | |
Strabismus Scissors | Equipment | Fine Science Tools | 14075-11 | |
Hartman Hemostat | Equipment | Fine Science Tools | 13003-10 | |
Tissue Scissors | Equipment | George Tiemann & Co. | 160-150 | |
Retractor | Equipment | Custom Made |
References
- Tabata, Y., Chang, T. M. Intermittent vascular access for extracorporeal circulation in conscious rats: a new technique. Artif. Organs. 6, 213-215 (1982).
- Chester, J. F., Weitzman, S. A., Malt, R. A. Implantable device for drug delivery and blood sampling in the rat. J. Appl. Physiol. 59, 1665-1666 (1985).
- Koeslag, D., Humphreys, A. S., Russell, J. C. A technique for long-term venous cannulation in rats. J. Appl. Physiol. 57, 1594-1596 (1984).
- Hall, R. I., Ross, L. H., Bozovic, M., Grant, J. P. A simple method of obtaining repeated venous blood samples from the conscious rat. J. Surg. Res. 36, 92-95 (1984).
- Burt, M. E., Arbeit, J., Brennan, M. F. Chronic arterial and venous access in the unrestrained rat. Am. J. Physiol. 238, H599-H603 (1980).
- Cocchetto, D. M., Bjornsson, T. D. Methods for vascular access and collection of body fluids from the laboratory rat. J. Pharm. Sci. 72, 465-492 (1983).
- Rigalli, A., E, D. L. V. Experimental surgical models in the laboratory rat. , CRC Press. New York. (2009).
- Waynforth, H. B. F.P.A. Experimental and surgical tehcnique in the rat. , Elsevier Academic Press. Burlington. (2007).
- Yoburn, B. C., Morales, R., Inturrisi, C. E. Chronic vascular catheterization in the rat: comparison of three techniques. Physiol. Behav. 33, 89-94 (1984).
- Staub, J. F., Coutris, G. A technique for multiple, high-rate blood samplings via an external cannula in rats. J. Appl. Physiol. 46, 197-199 (1979).
- Steffens, A. B. A method for frequent sampling of blood and continuous infusion of fluids in the rat without disturbing the animal. Physiol. Behav. 4, 833-836 (1969).
- Thrivikraman, K. V., Huot, R. L., Plotsky, P. M. Jugular vein catheterization for repeated blood sampling in the unrestrained conscious rat. Brain. Res. Brain. Res. Protoc. 10, 84-94 (2002).
- Vahl, T. P. Comparative analysis of ACTH and corticosterone sampling methods in rats. Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 289, E823-E828 (2005).
- Buhler, H. U., da Prada, M., Haefely, W., Picotti, G. B. Plasma adrenaline, noradrenaline and dopamine in man and different animal species. J. Physiol. 276, 311-320 (1978).
- Fagin, K. D., Shinsako, J., Dallman, M. F. Effects of housing and chronic cannulation on plasma ACTH and corticosterone in the rat. Am. J. Physiol. 245, E515-E520 (1983).
- Ling, S., Jamali, F. Effect of cannulation surgery and restraint stress on the plasma corticosterone concentration in the rat: application of an improved corticosterone HPLC assay. J. Pharm. Pharm. Sci. 6, 246-251 (2003).
- Fink, G. D., Bryan, W. J., Mann, M., Osborn, J., Werber, A. Continuous blood pressure measurement in rats with aortic baroreceptor deafferentation. Am. J. Physiol. 241, H268-H272 (1981).
- Van Vliet, B. N., Chafe, L. L., Antic, V., Schnyder-Candrian, S., Montani, J. P. Direct and indirect methods used to study arterial blood pressure. J. Pharmacol. Toxicol Methods. 44, 361-373 (2000).
- Wang, J., Tempini, A., Schnyder, B., Montani, J. P. Regulation of blood pressure during long-term ouabain infusion in Long-Evans rats. Am. J. Hypertens. 12, 423-426 (1999).
- Bunag, R. D. Facts and fallacies about measuring blood pressure in rats. Clin. Exp. Hypertens. A. 5, 1659-1681 (1983).