Yetişkin Zebra balığı Biyokimyasal Analiz için Kan Alma
Summary
Bu kağıt Zebra balığı dorsal aortadan kan toplanması için bir teknik sunuyor. Ayrıca bu tür kolesterol ve trigliserid düzeylerini belirlemek için testler gibi biyokimyasal analizlerde kullanılmak üzere serum elde etmek için yönergeler sağlar.
Abstract
Zebrafish çok insan hastalığı çalışmaları için bir hayvan modeli olarak kullanılmıştır. Bu moleküler olaylar ve tedavi edici stratejilerin çalışmaları yanı sıra bazı patolojiler 1 fizyolojik mekanizmaların değerlendirilmesi için güçlü bir preklinik bir platform olarak hizmet verebilir.
Araştırmacılar zebrabalıkları sistemlerinin araştırılması izin vermek için gerekli temel teknikleri 3 eksik olduğu sonucuna yol açabilir organ ve sistemleri 2, yetişkin zebrabalıkları fizyolojisi ile ilgili nispeten az sayıda yayın vardır. Zebra balığı hematolojik biyokimyasal değerler ilk önce 1999 yılında Jagadeeswaran ve arkadaşları tarafından tanımlanan bir kan toplama tekniği istihdam Murtha ve arkadaşları 4 tarafından 2003 yılında bildirilmiştir. Kısaca, kan uzunluğu, yaklaşık 0.3 cm dorsal aorta 5 bölgede, yanal bir kesi mikropipet ucu ile toplanmıştır. Söz dakikalık boyutlar, bu yüzdenBir çok yetenekli uygulayıcısı gerektiren yüksek hassasiyetli bir tekniktir. Aynı teknik aynı yıl 6 başka yayın aynı grup kullanılmıştır. 2010 yılında, Eames ve arkadaşları Zebra balığı 7 tam kan glikoz düzeyleri değerlendirildi. Onlar makasla decapitations performans ve daha sonra göğüs eklem içine bir heparinize microcapillary toplama tüpü takılarak kan erişim kazandı. Onlar iş Kilpatrick ve ark göre uygun bir depolama sıcaklığı ile çözüldü hemoliz zorluklar söz. 8. Laboratuvarımızda Jagadeeswaran tekniğini kullanmaya çalışırken, biz toplama başlamış olabilir önce kaybolmuş kan önemli miktarda izin vermeme gibi kesin doğru yerde kesi yapmak için zor olduğunu bulundu.
Son zamanlarda, Gupta ve ark. 9 yetişkin zebrabalıkları organları, Kinkle ark incelemek anlattı. 10 intraperiton nasıl gerçekleştirileceği açıklananeal enjeksiyonları ve Pugach ve ark. 11 retroorbital enjeksiyonları nasıl gerçekleştirileceği açıklanmıştır. Ancak, daha fazla iş daha tam zebrabalıkları araştırma için temel teknikler araştırmaya ihtiyaç vardır.
Zebra balığı sayısının küçük bir deneysel model olarak kullanan araştırmacılar için büyük güçlükler. Ayrıca ölçek küçüklüğü, bu verilen, basit teknikleri araştırmacılar zebrabalıkları modelin avantajlarını keşfetmek sağlamak amacıyla geliştirilmiş olması önemlidir.
Protocol
Discussion
Bu kağıt zebrabalıkları deneylerde daha fazla kan ve serum analiz sağlayan basit bir teknik sunuyor. Bu teknik, kan parametre veri gerektiren gelecekte zebrabalıkları hematolojik çalışmalara katkıda bulunma potansiyeline sahiptir. Ayrıca, bir deneysel model olarak zebrafish daha fazla uygulamalar için izin vermek gerekir.
Bu teknik, özel bir beceri ya da kesin bir tekniğin uygulanmasını gerektirmez. Dahası, bu sayede, biyolojik malzemenin gerekli miktarda elde etmek için d…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
FIPE / HCPA – Fundo de Incentivo bir Pesquisa e Eventos
Pelerin – Coordenação de Aperfeiçoamento de pessoal de Nivel Üstün
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Low retention tips | Applied Biosystems | 022493020 | |
| Eppendorf Centrifuge 5415D | Eppendorf | Discontinued |
References
- Schneider, A. C. R., dos Santo, J. L., Porawski, M., Schaefer, P. G., Maurer, R. L., Matte, U., da Silveira, T. R. Implementação de um novo modelo de experimentação animal Zebrafish. Rev. HCPA. 29, 100-103 (2009).
- Briggs, J. P. The zebrafish: a new model organism for integrative physiology. Am. J. Physiol. Regulatory Integrative Comp. Physiol. 282, 3-9 (2002).
- Menke, A. L., Sptsbergen, J. M., Wolterbeek, A. P. M., Woutersen, R. A. Normal anatomy and histology of adult Zebrafish. Toxicologic Pathology. 000, 1-16 (2011).
- Murtha, J. M., Qi, W., Keller, E. T. Hematologic and serum biochemical values for Zebrafish. Comp. Med. 53, 37-41 (2003).
- Jagadeeswaran, P., Sheehan, J. P., Craig, F. E., Troyer, D. Identification and characterization of zebrafish thrombocytes. Br. J. Haematol. 107, 731-738 (1999).
- Jagadeeswaran, P., Sheehan, J. P. Analysis of blood coagulation in the zebrafish. Blood Cells Mol. Dis. 25, 239-249 (1999).
- Eames, S. C., Philipson, L. H., Prince, V. E., Kinkel, M. D. Blood sugar measurement in zebrafish reveals dynamics of glucose homeostasis. Zebrafish. 7, 205-213 (2010).
- Kilpatrick, E. S., Rumley, A. G., Rumley, C. N. The effect of haemolysis on blood glucose meter measurement. Diabet. Med. 12, 341-343 (1995).
- Gupta, T., Mullins, M. C. Dissection of Organs from the Adult Zebrafish. J. Vis. Exp. (37), e1717 (2010).
- Kinkel, M. D., Eames, S. C., Philipson, L. H., Prince, V. E. Intraperitoneal Injection into Adult Zebrafish. J. Vis. Exp. (42), e2126 (2010).
- Pugach, E. K., Li, P., White, R., Zon, L. Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish. J. Vis. Exp. (34), e1645 (2009).
