Summary
Там накапливаются доказательства, что ишемического прекондиционирования (PC) - неповреждающих ишемического вызов мозга - дает защиту от переходных процессов в последующий уничтожающий ишемического инсульта. Мы установили двусторонние общей сонной артерии (BCCAO) в качестве предварительной стимул, чтобы вызвать раннее ишемическая толерантность (ИТ) в переходных очаговой ишемии головного мозга (индуцированные окклюзии средней мозговой артерии, MCAO) в C57Bl6 / J мышей.
Abstract
Там накапливаются доказательства, что ишемического прекондиционирования - неповреждающих ишемического вызов мозга - дает защиту от переходных процессов в последующий уничтожающий ишемического инсульта. Мы установили двусторонние общей сонной артерии в качестве предварительной стимул, чтобы вызвать раннее ишемическая толерантность к переходным очаговой ишемии головного мозга в C57Bl6 / J мышей. В этом видео мы покажем, методологию, используемую для данного исследования.
Introduction
Ишемический инсульт является заболеванием с высокой смертностью и огромным социально-экономическим бременем 1. Несмотря на интенсивные экспериментальные и клинические научные усилия в течение последних десятилетий, варианты лечения острого ишемического инсульта пациенты остаются очень ограниченными 2. В отличие от этого, увеличение доли пожилых людей в развитых странах резко увеличит заболеваемость и распространенность пациентов с ишемическим инсультом в ближайшие десятилетия 3. Таким образом, существует настоятельная необходимость в разработке новых стратегий лечения больных с ишемическим инсультом.
Один из подходов заключается, чтобы получить дальнейшее понимание механизмов эндогенной адаптации мозга, чтобы справиться с разрушительным стимул. Это полученного из головного мозга нейропротекции также известен как ишемического прекондиционирования (PC) или ишемический толерантности (ИТ) и описываются явления, в которых не причинен ущерб болевые раздражители применяются к мозгу, вызывает переходное сопротивлениепротив последующего ишемического повреждения 4 оскорбление. Это происходит в двух разных окнах время: рано, это, которое происходит в течение нескольких минут до нескольких часов после того, как ПК и ИТ задержкой, которая нуждается в латентности пару часов, происходят 4.
До сих пор исследования по нему в мозг сосредоточился на ИТ отложено. Гораздо меньше известно о механизмах раннего ИТ. Цель данного исследования заключается в установлении двусторонних общих сонных артерий (BCCAO), который является признанным стимулом, чтобы вызвать задержку ИТ, как адекватный раздражитель, чтобы вызвать ПК рано, это переходный очаговой ишемии головного мозга (индуцированные окклюзии средней мозговой артерии, MCAO) В C57Bl6 / J мышей.
Во время обоих хирургических процедур (BCCAO и MCAO), мониторинг мозговой кровоток (МК) по лазерной доплеровской флоуметрии (ЛДФ) проводили.
BCCAO проводили в наркоз и спонтанном дыхании мышей. Оба общих сонных артерий (ОСА), подвергают воздействиюи окклюзии в течение 60 секунд, затем 5 мин реперфузии. Это BCCAO / реперфузии последовательность повторяют дважды. После операции, мыши быстро оправился и не проявлял никаких признаков функциональной недостаточности. Для того, чтобы исключить, что BCCAO протокол, описанный выше, не приводит к задержке гибель клеток в мозге, мы провели ТДТ-опосредованной дУТФ-биотин Ник конце маркировки (TUNEL) окрашивание 72 часа после BCCAO (или фиктивных операций) в отдельную группу.
MCAO является широко известной модели для индукции очаговой ишемии головного мозга у грызунов 5-7. Хирургические процедуры проводили с использованием стандартных операционных процедур (СОП) 8. После выдержки левой CCA, кремний покрытых моноволокно было введено в дистальном CCA, не продвинулись через внутреннюю сонную артерию (ICA) в Круг Уиллис до передней мозговой артерии (ПМА) и, таким образом, происхождение средней мозговой артерии ( MCA) пережимают в течение определенного периода времени. В данном исследовании мыиспользовали 45 мин MCAO, что обычно приводит к ишемическим поражением на территории MCA участием полосатого и областей коры мозга.
В нашем исследовании мы проанализировали временной профиль раннего использования ИТ BCCAO как PC стимул. Наши данные показали, что оптимальное время задержки между BCCAO и MCAO чтобы вызвать раннее Он находится в 30 мин.
В этом видео, мы дадим демонстрации как хирургические процедуры, то есть BCCAO и MCAO.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Все процедуры, описанные в этой статье, были проведены в соответствии с руководящими принципами и правилами Landesamt für Gesundheit унд Soziales, Берлин, Германия.
Предварительно хирургических процедур
1. Подготовка Лески
- Для приготовления внутрипросветного нитей 8-0 нейлоновые швы были использованы и разрезали на отрезки длиной 13 мм каждый.
- Для покрытия из мононитей, Xantopren M слизистой оболочки (Heraeus Kulzer GmbH, Hanau, Germany) был использован активированный добавлением капли активатор раствор (активатор, Universal плюс, Heraeus Kulzer GmbH, Hanau, Germany).
- Мононити медленно протягивается через силиконовые, пока он не был полностью покрыт с ним. Поступая таким образом, мононити будет равномерно покрыта силиконом. Не ждать слишком долго, потому активированный материал покрытия станет твердым и сухим быстро.
- Перед силиконовой начинает затвердевать, Рекомендуется содрать чрезмерное силиконовые от нити, потянув ее на листе бумаги. Поступая таким образом, силиконовый слой может быть поредели с толщиной приблизительно 200 мкм.
- Основание силиконовые покрытых мононити вонзился в пластилин для того, чтобы дать ему высохнуть в течение ночи.
Комментарий: В идеале, только стерилизовать или по крайней мере дезинфекции мононити должны быть использованы для обеспечения стерильности в операционном. На практике, стерилизации или дезинфекции ручной мононити очень трудно, потому что качество может ухудшиться мононити 9. Таким образом, было бы предпочтительнее использовать коммерчески доступные стерильные вместо мононити.
2. Подготовка Хирургические инструменты и животные
- Все хирургические инструменты были сохранены в 70% этиловом спирте. Кроме того, перед каждой новой хирургической процедуры, все хирургические инструменты были тщательно очищеный дезинфицировать 70% этилового спирта.
- Хирургической области был тщательно продезинфицировать 70% этилового спирта у всех животных до перерезки. Дезинфицированная сайтов было разрешено полностью высушить перед выполнением разрезов. Дополнительные вырезку мех не был выполнен, так как это может привести к microabrasions и последующего воспаления кожи 9.
Хирургические процедуры
3. Положение зонда и LDF LDF мониторинга
- Для индукции анестезии, мыши подвергались воздействию газообразной смеси, содержащей 30% кислорода, 70% N 2 O и 2,5% изофлуран использованием испарителя. Для поддержания анестезии, изофлуран концентрация была снижена до 1,5%. Мышей спонтанном дыхании через дыхательные маски всей хирургической процедуры.
- Ректального датчика температуры была вставлена и мышах были прикреплены к стереотаксической кадра подвергая теменной голову. Во время операции, мышам покоится натермостатом грелку, обеспечивая постоянную температуру ядра 37,0 ± 0,5 ° С. Сагиттальной срединный разрез (~ 1 см длиной) проводили подвергать теменной черепа.
- На левой стороне черепа тщательно рассекали и волоконно-оптический зонд, установленный непосредственно на череп 2 мм каудально и 5 мм латерально от темени с помощью программы мгновенного клея. Затем края раны были тщательно адаптированы, чтобы избежать гипотермии мозга, а также инфекции.
- Мышь повернулась, чтобы разоблачить брюшной стороне шеи. Волоконно-оптический зонд был подключен к устройству LDF (PeriFLUX System 5000, Perimed, Järfälla, Швеция) через соединительный Адаптер пробников (Master Probe 418-1, Perimed; Järfälla, Швеция).
Комментарий: При повороте мыши вокруг, волоконно-оптический зонд должен быть согнут с осторожностью, чтобы избежать, что она обрывается из черепа.
- Устройство LDF было подключить к ноутбуку COMкомпьютер. Непрерывная запись ЛДФ значения был инициирован использованием PeriSoft для Windows (версия 2.50, Järfälla, Швеция). На рисунке 1 показано среднее конечно CBF получены от десяти записей LDF во BCCAO и реперфузии.
4. Двусторонние общей сонной артерии
- Поддержание наркоза, как описано в разделе 3.1. Мышь помещали на спине. Хвост животного и лапы прикреплена к грелку с помощью клейкой ленты. Сагиттальной срединный разрез вентральной (~ 1 см длины) была выполнена.
- Оба слюнных желез были тщательно отделить и мобилизовали для визуализации основных КСТР.
- Оба ОСО были тщательно отделены от соответствующих блуждающие нервы и сопровождающих вен без ущерба для этих структур. Манипуляции блуждающего нервов может привести к временной или постоянной дисфункции парасимпатической нервной системы, которая имеет потенциал для возникновения значительной сердечной обрhythmia или даже необратимые остановки сердца. Поэтому, крайне важно, чтобы избежать любых манипуляций блуждающего нервов. Свободные 5-0 шелковых шва петля была сделана около каждого ОСО.
- Труб малого кремния (диаметр 2 мм) был вставлен между ССА и шелковыми швами по бокам. Этот трубопровод был использован в качестве Шинирование CCA для того, чтобы избежать повреждения стенок артерий, когда швы были ужесточены (рис. 4).
- Оба КСТР закупоривали в течение одной минуты, затянув шелковыми швами. Только мыши, в котором сигнал LDF был уменьшен до <10% от исходного сигнала, были включены в исследование. После возобновления как КСТР пять минут периода реперфузии была инициирована. По LDF полной реперфузии была обеспечена. Животные с неполной реперфузии (т.е. <90% восстановления CBF по сравнению с исходным CBF), были исключены. Последовательность одной минуты BCCAO и пять минут реперфузии повторяли дважды на общую BCCAO duratiна 3 мин. 1 приведены средние НБВ Конечно, полученных из десяти записи LDF во время BCCAO и реперфузии. Во время процедуры, рекомендуется держать шею наматываться увлажненными, получавшей физиологический раствор.
- После последнего реперфузии, все трубки и швов, а также волоконно-оптического зонда прикреплен к черепу были удалены, раны зашивали и лидокаин мазь (Xylocain 2%; AstraZeneca GmbH, Wedel, Германия) многократно применяются к ранам, сколько необходимо для обезболивающим управления.
- Мыши были переданы в предварительно нагретую (30 ° C) восстановление коробку (MediHEAT. PecoServives ООО Бро, Камбрия, Великобритания), пока они не восстановили полное сознание. Затем мышей возвращали в их клетки животного.
5. Окклюзии средней мозговой артерии
- Мыши были вновь под наркозом, ректального датчика температуры была вставлена и мышей были помещены на грелку, чтобы разоблачить брюшной стороне шеи. После этого они сопрежде чем фиксируется как описано в разделе BCCAO.
- Постоянное лигатуры с помощью длинной 7-0 шелковых шва было сделано вокруг левого проксимального ОАС и нити осторожно вытащил каудально помощью комаров зажим (рис. 4).
- Другой постоянный лигатуры было сделано вокруг левой наружной сонной артерии (ЕСА), и нить была разобрана к правой стороне животного (рис. 4).
- Соединительная ткань, окружающая левой ВСА было тщательно мобилизованы и подъязычный нерв осторожно поднял, чтобы получить хороший обзор дистальной ход ICA. Левая изгибов ВСА влево в то время как крылонебную артерию (PPA) следует ходе проксимальных ICA вправо (рис. 4).
Комментарий: Существует еще одна артерия, которые будут определены которая поворачивает направо в каудальном направлении. Это затылочная артерия, которая берет свое начало переменно либо из бифуркации CCA или PRoximal часть ECA (рис. 4).
- Свободную петлю шва было сделано около проксимальных ICA помощью 5-0 шелковой нитью.
- С помощью небольшой микрососудистые зажим, ICA была временно окклюзии дистальнее 5-0 свободную петлю шва (рис. 4).
- Небольшой разрез был сделан в дистальной части ОСО непосредственно перед использованием бифуркации ОСО микрососудистые ножницами (рис. 4).
- В выбранной силиконовым покрытием мононити был введен в ОСО через небольшой разрез и толкнул в ICA, пока он не остановился на капиллярном зажим (рис. 4).
- Microclamp была тщательно очищена от ICA, а леска была продвинулись в глубь ICA, пока он не остановился (рис. 4). Комментарий: На данный момент, переверните щипцами в левую руку так, что вы не держите его, как перо. Это помогает захватить нити пинцетом легче.Зажим-сосудистой аппликатора должна быть проведена в правой руке. Это может быть необходимо почти зафиксируйте все 5-0 шва вокруг ICA, чтобы предотвратить кровотечение из разреза стороны.
- Точное местоположение мононити наконечник был идентифицирован, чтобы проверить, если она была выдвинута в ICA, а не в PPA. Если мононити наконечник был введен в проксимальных PPA, нить осторожно отстранился как раз перед ICA / PPA бифуркации. Была сделана попытка продвижения мононити в ICA снова, в то время осторожно потянув за проксимальных ICA немного на правую сторону. Поступая таким образом, естественный ход дистальной ICA была смоделирована облегчая доступ к ICA.
- После того, как леска была выдвинута в ICA почти полностью, свободные 5-0 шва петлю вокруг проксимальных ICA затянулось, чтобы держать нить на месте. Впоследствии, все шелковые нити были укорочены, кожную рану зашивают.
- Потери жидкости во время операции был replenбедных и обнищавших слоев путем инъекции 1,0 мл физиологического раствора внутрибрюшинно раствор Затем мышь была переведена в предварительно нагретой восстановление коробки, пока не восстановили полное сознание.
- По реперфузионное, мыши были повторно анестезировали и мононити была удалена после тщательного ослабления 5-0 шелковой нити вокруг проксимальных ICA. После этого 5-0 шва затянулся еще раз внимательно, чтобы предотвратить кровотечение.
- После подтверждения полный гемостаз, шее рану зашивали.
- Лидокаин мазь повторно применять местно на кожу по мере необходимости для облегчения боли и мышь была переведена в предварительно нагретую (30 ° C) извлечение коробки, пока не восстановили полное сознание.
- В качестве первой подсказки для успешного прохождения процедуры MCAO, часовой облет животных наблюдалось. Тяжесть функционального дефицита количественно, используя счет Бедерсон модифицированы для мышей 10. По этому поводу модифицированных Бедерсон, неврологические оценки мыповторно оцениваются следующим образом: 0 (нормальная двигательная функция), 1 (сгибание туловища и контралатеральной передней конечности, когда мышь была снята за хвост), 2 (полет по кругу на противоположной стороне, когда мышь была проведена за хвост на плоской поверхности, но нормальные позы в состоянии покоя), 3 (опираясь на противоположной стороне в состоянии покоя), и 4 (Нет спонтанную двигательную активность или мертвый).
6. BCCAO Шам хирургии
Для BCCAO процедуры обман, мышей анестезировали в течение реального процедура ПК BCCAO, слюноотделение железы были мобилизованы и ОСО были подвержены. Очень важно, что прямые манипуляции с сонных артерий или блуждающего нервов избегать во время процедуры обман. Манипуляции с CCA может повредить его эндотелиальный слой, что может привести к выбросу вазоактивных веществ из эндотелия или вызывать локальный тромбоз внутри просвета артерии. Как следствие, тромбоэмболических событий может произойти после операции обман. Это будет основным вмешивающимся йэлектронной процедуре. С другой стороны, манипуляции с блуждающие нервы может привести к временной или постоянной дисфункции парасимпатической нервной системы, что может повлечь за собой возникновение значительных сердечной аритмии или даже необратимые остановки сердца. Поэтому, крайне важно, чтобы избежать любых манипуляций блуждающий нервы во время BCCAO.
После хирургических процедур
7. Измерения объема инфаркта
Для оценки размеров инфаркта, мыши выжили в течение 72 ч после МСАО. Затем животные были глубоко под наркозом, мозг удаляют, быстро замораживают в метилбутан, срезы и окрашивали гематоксилином (с использованием протокола по Папаниколау) для измерения объема инфаркта. Срезы головного мозга, были собраны в 600 мкм интервалы и объем инфаркта были определены с использованием анализатора изображени (MCID основной 7,0 Rev.2.0, GE Healthcare Ниагара Inc) с поправкой на отек в соответствии с методом Lin и др.. 7,11
8. Критерии включения
Мы включены только животных, которые были LDF измеренных CBF снижение более чем на 90% в течение каждого из трех серий BCCAO. В идеале, LDF мониторинга должны выполняться в обоих полушарий головного мозга во время BCCAO. Для практичности, мы провели мониторинг LDF только в левом полушарии, которое будет подвергаться MCAO позже. Этот подход был описан до 6,12. Реперфузии после каждого эпизода BCCAO был, должно быть полным (то есть возвращение к исходным значениям). В целях сокращения времени продолжительности мыши содержались под наркозом, мы не контролировали CBF MCAO во время операции. В пилотном исследовании с отдельной группой животных однако, мы провели мониторинг по CBF LDF MCAO во время операции. В этой группе мышей мы последовательно измеренных снижение церебрального кровотока на 90% по сравнению с исходным до CCA окклюзии. Кроме того, после удаления из мононитей CBF восстановились до> 90% от соответствующейисходных после ОСО окклюзии. Эти LDF критериев, установленных в литературе и в результате последовательной объема инфаркта 7. Мы включены только животных, которые имели показатель Бедерсон по крайней мере из 1 после выхода из наркоза после MCAO. Кроме того, только животных, которые выжили в течение 72 ч после MCAO и который проявлял никаких признаков внутричерепного кровоизлияния не были включены в исследование.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Наши BCCAO протокола привели к немедленной и глубокие (> 90%) сокращение CBF, когда оба были ОСО окклюзии (рис. 1). Возобновление КСТР привела к полной реперфузии как контролируется LDF (рис. 1). После ПК, животные не проявлял никаких признаков функциональной инвалидности. Кроме того, не было никакой смертности. TUNEL окрашивание выполнено 72 часа после BCCAO в отдельной группе животных не показали никаких признаков задержки гибель клеток в мозге после BCCAO (данные не показаны).
При анализе временной профиль оптимальное время задержки между BCCAO и MCAO для раннего IT (рис. 2), мы обнаружили значительное снижение объем инфаркта (снижение на 65%, N = 10) по сравнению с Sham группа (N = 10) когда BCCAO проводили за 30 мин до МСАО. Кроме того, объемы инфаркта, когда были снижены BCCAO проводили 2 ч и 24 ч. до MCAO (N = 10). 24 HR представляет собой второе (задержкой) временное окно его 6. >
Таким образом, можно сделать вывод, что оптимальный временного окна для раннего IT использованием BCCAO как ПК стимул 30 мин до введения переходных очаговой ишемии головного мозга (МСАО).
Рисунок 1. Курс средних значений CBF измеряется LDF во BCCAO и реперфузии (N = 10).
Рисунок 2. Временной профиль объемы инфаркта в разные временные задержки MCAO после BCCAO N = 10/group, графики показывать средние ± стандартное отклонение, * р <0,05 от Sham, ** р <0,01 от обмана (односторонний ANOVA с posthoc Бонферрони тест).
3 "SRC =" / files/ftp_upload/4387/4387fig3.jpg "FO: Content-ширина =" 6 дюймов "FO: SRC =" / files/ftp_upload/4387/4387fig3highres.jpg "/>
Рисунок 3. Представитель окрашенных гематоксилином срезах мозга, полученных из BCCAO-предобусловленный (А) и ложно-оперированных животных (B), которые были подвергнуты 45 мин MCAO 30 мин после BCCAO / обман. Мозг удал ли и обрабатывали 72 часа после МСАО.
Рисунок 4. Схема анатомия сосудов левой сонной артерии, в том числе процедур, выполняемых для BCCAO и MCAO.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
В нашем исследовании мы показали, что три последовательности BCCAO, каждая из которых длится в течение одной минуты и последующей реперфузии в течение пяти минут, являются адекватным ишемического стимула PC, чтобы вызвать раннее ИТ.
Кроме того, мы показали, что предварительная протоколом, используемым является безопасным и незначительные инвазивные процедуры, не отметить, послеоперационных осложнений, никаких признаков апоптоза в мозге и не смертность. Несколько различных предварительной протоколы были описаны ранее 6-7,12. Другие использовали 6 мин BCCAO качестве предварительной стимул 13-14. Однако, в связи с тем, что одна минута BCCAO три раза в результате защитное действие в начале временного окна ИТ без заметного ишемического повреждения мозга, мы решили использовать этот протокол.
Для достижения одинаковых результатов, продолжительность анестезии и хирургического вмешательства, а также другие переменные, такие как животное веса мозга температурыво время операции, послеоперационный пополнения жидкости, послеоперационные боли, а также пред-и послеоперационный клетке обогащения должны быть стандартизированы 15. Особое внимание необходимо поддержание нормотермической условиях мышей в течение полного периода анестезии, потому что переохлаждение сама по себе имеет эффект предварительной обработки и, следовательно, влияет на эффект BCCAO 16. В сознании и свободно движущихся грызунов, внутренней температуры примерно от 0,5 до 1 градуса Цельсия выше, чем соответствующие температуры мозга 17. Отдыхая температуры мозга у бодрствующих и свободно движущейся грызунов примерно 36,5 градус по Цельсию 18. Так как мы не измеряли температуру мозга в наших экспериментах, мы скорректировали температур мышей "ядро до 37,0 ± 0,5 градуса Цельсия до достижения температуры мозга, которые напоминают выше температуры отдыха мозга.
Теоретически, использование ингаляционных анестетиков этосамо может быть дополнительным вмешивающимся поскольку было показано, что изофлуран сам по себе может вызывать IT. Тем не менее, изофлурана анестезии становится актуальным стимулом PC только при введении повторно в течение нескольких часов, который был не так в процедуре, описанной в настоящем исследовании 19-21. Кроме того, мы также проанализировали Животных с ложной операцией управления для потенциального смешанное воздействие изофлуран анестезии.
Размеру и форме моноволокно использоваться для индукции MCAO играет важную роль. Равномерно силиконовые нити покрыты улучшения успеха MCAO и уменьшить частоту осложнений, таких как субарахноидального кровоизлияния и поэтому должны быть предпочтительнее по сравнению с нагреть затупленной нитей 22. Другим важным моментом является то нити длиной. Оптимальные длины нити между 9-11 мм сообщается 15. В связи с тем, что наши разрезы были сделаны проксимальнее бифуркации CCA мы использовали мононити длинаGTH 13 мм и толщиной около 200 мкм.
Взятые вместе, тип и качество покрытия мононити и ее длина имеют решающее значение для обеспечения достаточного окклюзии МСА и избежать значительных переток через передней соединительной артерии. Существенные переток с правой стороны круга результатов Уиллис в нежелательных снижение объема инфаркта и тем самым увеличивает вариабельность результатов 23. Дополнительные процедурные стандартизации с целью дальнейшего снижения исходам включать LDF основе CBF мониторинга в течение MCAO и реперфузии и использование коммерчески доступных промышленных сделаны, стандартизированные мононитей. При использовании коммерчески доступных мононитей также их стерильность может быть обеспечена.
Кроме того, животные, у которых нет> 90% CBF снижение в течение BCCAO или MCAO, или которые не имеют> 90% реперфузии после повторного открытия артерий шоусть быть исключены из исследования. Такой подход будет способствовать дальнейшему снижению изменчивости объемы инфаркта, которое происходит главным образом в результате общих вариантов мозгового кровообращения в залог.
Таким образом, BCCAO является признанным и легко применимы модель для изучения последствий его в начале и задержки времени Windows. Изучение явления это помогает получить более глубокое понимание механизмов, лежащих эндогенной защиты в мозге. В перспективе это может способствовать развитию альтернативных возможностей лечения пациентов с острым ишемическим инсультом.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Нам нечего раскрывать.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Binocular surgical microscope | Zeiss | Stemi 2000 C | |
| Light source for microscope | Zeiss | SteREO CL 1500 ECO | |
| Heating pad with rectal probe | FST | 21061-10 | |
| Stereotactic frame | David Kopf | Model 930 | |
| Scissors | FST | 91460-11 | |
| Dumont forceps #5 | FST | 11251-10 | |
| Dumont forceps #7 | FST | 11271-30 | |
| Mircovascular clamp | FST | 00398-02 | |
| Clamp applicator | FST | 00072-14 | |
| Springscissors | FST | 15372-62 | |
| Needle holder | FST | 12010-14 | |
| Needles | Feuerstein, Suprama | BER 562-20 | |
| 5-0 silk suture | Feuerstein, Suprama | ||
| 7-0 silk suture | Feuerstein,Suprama | ||
| 8-0 silk suture | Feuerstein, Suprama |
References
- Roger, V. L., et al. Heart disease and stroke statistics--2011 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 123, e18-e209 (2011).
- Khaja, A. M., Grotta, J. C. Established treatments for acute ischaemic stroke. Lancet. 369, 319-330 (2007).
- Foerch, C., Sitzer, M., Steinmetz, H., Neumann-Haefelin, T. Future demographic trends decrease the proportion of ischemic stroke patients receiving thrombolytic therapy: a call to set-up therapeutic studies in the very old. Stroke. 40, 1900-1902 (2009).
- Gidday, J. M. Cerebral preconditioning and ischaemic tolerance. Nat. Rev. Neurosci. 7, 437-448 (2006).
- Atochin, D. N., Clark, J., Demchenko, I. T., Moskowitz, M. A., Huang, P. L. Rapid cerebral ischemic preconditioning in mice deficient in endothelial and neuronal nitric oxide synthases. Stroke. 34, 1299-1303 (2003).
- Cho, S., et al. Obligatory role of inducible nitric oxide synthase in ischemic preconditioning. J. Cereb. Blood. Flow Metab. 25, 493-501 (2005).
- Kunz, A., et al. Neurovascular protection by ischemic tolerance: role of nitric oxide and reactive oxygen species. J. Neurosci. 27, 7083-7093 (2007).
- Dirnagl, U., et al. Standard operating procedures (SOP) in experimental stroke research: SOP for middle cerebral artery occlusion in the mouse. Nature Precedings. , (2010).
- Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. Modeling stroke in mice - middle cerebral artery occlusion with the filament model. J. Vis. Exp. (47), e2423 (2011).
- Bederson, J. B., et al. Rat middle cerebral artery occlusion: evaluation of the model and development of a neurologic examination. Stroke. 17, 472-476 (1986).
- Lin, T. N., He, Y. Y., Wu, G., Khan, M., Hsu, C. Y. Effect of brain edema on infarct volume in a focal cerebral ischemia model in rats. Stroke. 24, 117-121 (1993).
- Kawano, T., et al. iNOS-derived NO and nox2-derived superoxide confer tolerance to excitotoxic brain injury through peroxynitrite. J. Cereb. Blood Flow Metab. 27, 1453-1462 (2007).
- Qi, S., et al. Sublethal cerebral ischemia inhibits caspase-3 activation induced by subsequent prolonged ischemia in the C57Black/Crj6 strain mouse. Neurosci. Lett. 315, 133-136 (2001).
- Wu, C., et al. A forebrain ischemic preconditioning model established in C57Black/Crj6 mice. J. Neurosci. Methods. 107, 101-106 (2001).
- Liu, S., Zhen, G., Meloni, B. P., Campbell, K., Winn, H. R. Rodent Stroke Model Guidelines for Preclinical Stroke Trials (1st Edition). J. Exp. Stroke Transl. Med. 2, 2-27 (2009).
- Nishio, S., et al.
- DeBow, S., Colbourne, F. Brain temperature measurement and regulation in awake and freely moving rodents. Methods. 30, 167-171 (2003).
- Colbourne, F., Sutherland, G. R., Auer, R. N. An automated system for regulating brain temperature in awake and freely moving rodents. J. Neurosci. Methods. 67, 185-190 (1996).
- Kapinya, K. J., Prass, K., Dirnagl, U. Isoflurane induced prolonged protection against cerebral ischemia in mice: a redox sensitive mechanism? Neuroreport. 13, 1431-1435 (2002).
- Li, L., Zuo, Z. Isoflurane preconditioning improves short-term and long-term neurological outcome after focal brain ischemia in adult rats. Neuroscience. 164, 497-506 (2009).
- Xiong, L., et al. Preconditioning with isoflurane produces dose-dependent neuroprotection via activation of adenosine triphosphate-regulated potassium channels after focal cerebral ischemia in rats. Anesth. Analg. 96, 233-237 (2003).
- Spratt, N. J., et al. Modification of the method of thread manufacture improves stroke induction rate and reduces mortality after thread-occlusion of the middle cerebral artery in young or aged rats. J. Neurosci. Methods. 155, 285-290 (2006).
- Zarow, G. J., Karibe, H., States, B. A., Graham, S. H., Weinstein, P. R. Endovascular suture occlusion of the middle cerebral artery in rats: effect of suture insertion distance on cerebral blood flow, infarct distribution and infarct volume. Neurol. Res. 19, 409-416 (1997).
