Мышиной модели субарахноидального кровоизлияния
Summary
Стандартная модель мыши из субарахноидального кровоизлияния по внутрипросветной Круга Уиллиса перфорации описывается. Судно перфорация и субарахноидальное кровотечение контролируются мониторинга внутричерепного давления. Кроме того различные жизненные параметры регистрируется и контролируется для поддержания физиологических условиях.
Abstract
В этом видео-публикации представлен стандартизированный модель мыши субарахноидального кровоизлияния (САК). Кровотечение индуцируется эндоваскулярной Круга Уиллиса перфорации (ХВО) и доказано внутричерепного давления (ВЧД) мониторинга. Таким образом равномерное распределение крови в субарахноидальных пространств, окружающих артериальное кровообращение и мозжечка трещин достигается. Физиологии животных поддерживается интубации, искусственной вентиляции легких, и непрерывного оперативного мониторинга различных физиологических и сердечно-сосудистых параметров: температуры тела, системного артериального давления, частоты сердечных сокращений, и насыщения гемоглобина. Тем самым церебральное перфузионное давление может быть плотно контролируется в результате чего меньше переменного объема из сосудов кровью. Это позволяет лучше стандартизации эндоваскулярной перфорации накаливания у мышей и делает вся модель высоковоспроизводимым. Таким образом, легко доступны для фармакологических и патофизиологических исследований в дикого типа и генетическийлы изменены мышей.
Introduction
САК является инсульт подтип с наименьшим полезного результата для пациентов: 40% пациентов умирают в течение месяца после кровотечения 1 и выжившие редко имеют клинически благоприятный исход.
Подавляющее большинство спонтанных SAHS (80%) обусловлены разрывом внутричерепных аневризм, которые в основном расположены вдоль передней и задней соединительной артерии, основной артерии и средней мозговой артерии (MCA) 2.
Такие аневризмы трудно смоделировать на животных, и поэтому животные модели САК либо выполняется путем инъекции крови в субарахноидальное пространство / желудочки мозга или эндоваскулярного перфорации субарахноидального судна.
Аутологичная инъекции крови в цистерны не легко выполнить и воспроизводимым как объем крови можно управлять напрямую 3. К сожалению, некоторые аспекты патофизиологии САК, напримертравмы сосуда, не могут быть смоделированы с помощью этой процедуры. Другой технический подход для индукции САК является открытие интрацистернального вены 4.
Тем не менее, внутрипросветный НВП в филиале MCA-видимому, является процедура, которая моделирует патофизиологии у человека наиболее тесно 5. Этот метод был разработан и впервые описана у крыс Бедерсон и его коллегами и в то же время по Veelken и его коллеги 6,7. Позже внутрипросветный модель перфорация была адаптирована к мышей 8,9. Нить вставляется в наружной сонной артерии (ЭКА) и вышла в основания черепа через внутренней сонной артерии (ВСА). В точки ответвления MCA нить прокалывает сосуд и вызывает кровотечение в субарахноидальное пространство в основании черепа. Кровь затем распределяет в оставшееся субарахноидальное пространство вдоль трещин и кровеносных сосудов. Кровотечение останавливают тромба в месте перфорации, но rebleedings, белыйICH часто вредно у пациентов 10, может произойти. Соответственно, эндоваскулярные модель нить стал широко используется модель SAH в течение последних нескольких лет. Наиболее часто упоминаемый недостаток модели накаливания перфорации является то, что кровотечение том не может быть непосредственным контролем и поэтому может быть переменной. Эта изменчивость может значительно сократится на жестком контроле физиологии животных и постгемморагической ПМС.
Мыши имеют большое преимущество, что большое количество генетически модифицированных штаммов которые доступны. Однако из-за их малого размера хирургические процедуры имеют тенденцию быть более сложным, чем в более крупных видов, например, крыс и кроликов. Поэтому уменьшение масштаба методов, разработанных для крыс до мышей часто не приводит к желаемым результатам, например, как мыши имеют очень ограниченный вес тела и объем крови неинвазивные методы для кровяного давления и газового анализа крови, а также для насыщения гемоглобина и мониторинга сердечного ритмадолжны применяться, когда это возможно. Соответственно, цель текущей публикации является описание перфорации модель нити для САК у мышей и чтобы показать, как эта модель может быть выполнена в стандартном и высоко воспроизводимым образом.
Protocol
Representative Results
Discussion
Варианты лечения после САК не хватает, а в основном неэффективными. Поэтому патофизиология постгемморагической повреждения головного мозга необходимо также понимать, с тем чтобы определить новые терапевтические цели и развития новых терапевтических подходов. Стандартизован и хорош…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Настоящее исследование финансируется исследовательский фонд Solorz-Zak.
Materials
| Equipment | |||
| operation microscope | Leica | KL2500 | |
| isoflurane vaporizer | Harvard Instruments | Continuous Flow Vaporizer | |
| respirator | Hugo Sachs | Minivent 845 | |
| microcapnograph | Hugo Sachs | Type 340 | |
| temperature controller | FHC | DC Temperature Controller | |
| dental drill | Paggen | Labset- N | |
| ICP monitor | Codman | ICP monitor | |
| blood pressure monitor | AD Instruments | Bridge Amp FE221 | |
| syringe pump | World Precision Instruments | SP101IZ | |
| pulsoximeter | Kent Scientific | MouseSTAT | |
| LDF | Perimed | Periflux 5000 | |
| analog data monitor | AD Instruments | Power Lab 16/35 | |
| Material | |||
| cement for ICP probe fixation | Speiko | Carboxylate cement | |
| glue for LDF probe fixation | Bob Smith Industries | Cyanoacrylate glue (Maxi Cure and Insta Set) | |
| venous catheter | Johnson & Johnson | Jelco winged i.v. catheter; REF 4076 | modified intubation tube |
| tubing for femoral catheter | Smiths Medical | Fine Bore Polythene Tubing; ID 0.28 mm OD 0.61 mm; REF 800/100/100 | cut to 30 cm length |
| filament for vessel perforation | Ethicon | Prolene 5-0 | cut to 12 mm length |
| surgical equipment | Fine Scientific Instruments | forceps medical #5, vessel scissors 8 cm, microclip 4 mm jaw |
References
- Cahill, J., Zhang, J. H. Subarachnoid hemorrhage: is it time for a new direction. Stroke. 40, 86-87 (2009).
- van Gijn, J., Kerr, R. S., Rinkel, G. J. Subarachnoid haemorrhage. Lancet. 369, 306-318 (2007).
- Lin, C. L., et al. A murine model of subarachnoid hemorrhage-induced cerebral vasospasm. J. Neurosci. Methods. 123, 89-97 (2003).
- Altay, T., et al. A novel method for subarachnoid hemorrhage to induce vasospasm in mice. J. Neurosci. Methods. 183, 136-140 (2009).
- Feiler, S., Friedrich, B., Scholler, K., Thal, S. C., Plesnila, N. Standardized induction of subarachnoid hemorrhage in mice by intracranial pressure monitoring. J. Neurosci. Methods. 190, 164-170 (2010).
- Bederson, J. B., Germano, I. M., Guarino, L. Cortical blood flow and cerebral perfusion pressure in a new noncraniotomy model of subarachnoid hemorrhage in the rat. Stroke. 26, 1086-1091 (1995).
- Veelken, J. A., Laing, R. J., Jakubowski, J. The Sheffield model of subarachnoid hemorrhage in rats. Stroke. 26, 1279-1283 (1995).
- Kamii, H., et al. Amelioration of vasospasm after subarachnoid hemorrhage in transgenic mice overexpressing CuZn-superoxide dismutase. Stroke. 30, 867-871 (1999).
- Parra, A., et al. Mouse model of subarachnoid hemorrhage associated cerebral vasospasm: methodological analysis. Neurol. Res. 24, 510-516 (2002).
- Broderick, J. P., Brott, T. G., Duldner, J. E., Tomsick, T., Leach, A. Initial and recurrent bleeding are the major causes of death following subarachnoid hemorrhage. Stroke. 25, 1342-1347 (1994).
- Thal, S. C., Plesnila, N. Non-invasive intraoperative monitoring of blood pressure and arterial pCO2 during surgical anesthesia in mice. J. Neurosci. Methods. 159, 261-267 (2007).
- Hockel, K., Trabold, R., Scholler, K., Torok, E., Plesnila, N. Impact of anesthesia on pathophysiology and mortality following subarachnoid hemorrhage in rats. Exp. Transl. Stroke Med. 4, 5 (2012).
- Wang, Z., Schuler, B., Vogel, O., Arras, M., Vogel, J. What is the optimal anesthetic protocol for measurements of cerebral autoregulation in spontaneously breathing mice?. Exp. Brain Res. 207, 249-258 (2010).
- Schwartz, A. Y., Masago, A., Sehba, F. A., Bederson, J. B. Experimental models of subarachnoid hemorrhage in the rat: a refinement of the endovascular filament model. J. Neurosci. Methods. 96, 161-167 (2000).
- Feiler, S., Plesnila, N., Thal, S. C., Zausinger, S., Scholler, K. Contribution of matrix metalloproteinase-9 to cerebral edema and functional outcome following experimental subarachnoid hemorrhage. Cerebrovasc. Dis. 32, 289-295 (2011).
