Summary

脊髄虚血再灌流のマウスモデルにおいて胸部大動脈閉塞によって再現可能対麻痺

Published: March 03, 2014
doi:

Summary

脊髄虚血 – 再灌流障害のメカニズムの理解の欠如は、高リスク大動脈操作次の麻痺を防止するために更なる補助剤を妨げてきた。このように、動物モデルの開発が不可欠である。この原稿は、マウスモデルにおける胸部大動脈閉塞後再現性の下肢麻痺を示しています。

Abstract

背景
下肢麻痺は、大動脈の介入を複雑にし続けています。根底にある病理の理解の欠如が発生したにこの傷害を減少させるための進歩を妨げてきた。現在のモデルは、胸部大動脈閉塞後再現性の下肢麻痺を示しています。

方法
成体雄性C57BL6マウスをイソフルランで麻酔した。 cervicosternal切開を通して大動脈を露出させた。胸部下行大動脈と左鎖骨下動脈を胸膜腔への進入せずに同定された。これらの動脈のスケルトン化を、4分(中等度虚血)または8分(長期の虚血)のための即時の閉鎖(偽)または閉塞が続いた。胸骨切開し、皮膚を閉じ、マウスを回復するための加温床に移した。回復後、機能分析は、48時間まで、12時間間隔で得た。

<p class= "jove_content"> 結果
偽手術を受けたマウスは、観察可能な後肢の赤字を示さなかった。 4分間の中等度の虚血を受けたマウスは、12時間で最小機能赤字は48時間で麻痺を完了するために、進行が続きました。長時間の虚血を受けたマウスは、術後の期間にどの位置においても観察可能な後肢の動きと直接麻痺を持っていた。全く観察術中や術後の死亡はなかった。

結論
即時または遅延は、マウスモデルにおいて達成することができるかどうかを再現可能な下肢麻痺。さらに、胸骨正中切開と慎重な解剖、高い生存率、および再現性を使用することによって達成することができる。

Introduction

下肢麻痺が胸腹部の介入を複雑にし続けています。脊髄虚血-再灌流傷害(SCIR)として知られている損傷は、高リスク患者1の最大20%において麻痺をもたらす。このような左心バイパス、腰椎cerbrospinal流体排水溝、低体温循環停止および肋間動脈再移植などの外科的補助剤は、この合併症2の発生率が減少しているが、あまりにも多くの患者が影響を受け続けています。

臨床的には、脊髄虚血および再灌流傷害は、介入3以下麻痺即時または遅延のいずれかと見られている。しかし、この損傷の我々の理解は、機械的な細部の欠如によって窒息されています。その結果、いくつかのオプションは、それが発生した後に傷害を減衰させるために用意されています。

我々はこのようにして、小さな動物、ネズミ、脊髄虚血のモデル、および再灌流傷害を参加しているより良い、その病因を特徴づける。これまでの研究の大半は、この傷害、すなわちラット4、ウサギ5、および豚6モデルを特徴づけるために、より大きな動物モデルを使用している。しかしながら、これらは、それらのコスト、複雑さ、可変の再現性、及び、最も重要なのは、遺伝子操作のための利用可能な技術の欠如によって制限される。これらの公開の動物モデルの中で最も信頼性の高いウサギ腹部大動脈のクロスクランプが含まれます。しかし、人間の前脊髄ニューロンは、ほとんどの場合、より近位枝7から自分の血管供給を導出する。これらのモデルにおける脊髄の変数血管解剖は臨床使用に彼らの結果を移行することが困難に追加されます。

この原稿は、臨床的に関連して使用するのが簡単である胸部大動脈閉塞後、即時または遅延対麻痺のためのモデルを提示します。ミニsternoto経由大動脈弓の露出私は、低侵襲であり、最小の罹患率および死亡率を有する高度に再現性のある結果を誘発することができる。課題や技術的なニュアンスなしていないこのモデルがあるが、これらを容易に実現することができる後肢麻痺のモデルを生成するために慎重な切開および組織処理によって克服することができる。

Protocol

1。術前準備と麻酔作業中は無菌テクニックを守ってください。すべての楽器をレイアウト。 それは適切な温度(36.5℃)に温めることができるように前に麻酔導入に温度調節ベッドをオンにします。レーザードップラー灌流モニターの電源をオンにし、それが誘導中に起動できるように。 誘導室でマウスを置きます。 慎重に誘導中にマウスの呼吸数を監視します?…

Representative Results

マウスは、偽手術を受けた(n = 3)または4(n = 3)で8分間の大動脈閉塞(n = 3)であった。術後マウスはバッソマウススコア( 図1)によって等級付けした。偽手術を受けたマウスは、術後の任意の時点で観察可能な機能欠損がありませんでした。適度な虚血(4分)にかけたマウスは、48時間で麻痺を完了するために、進行性の機能低下との12時間の時点で、通常の後肢機能の近?…

Discussion

脊髄虚血再灌流への二次対麻痺はあまり理解されていない病態9の複合体の結果である。これは最も一般的に胸腹部大動脈手術後に見られますが、このような大動脈解離、外傷、塞栓現象、血管炎、および全身性低血圧10など他の傷害の様々な対麻痺になることがあります。この損傷の更なる理解を得て、この損傷を排除する将来の標的を提供するために、動物モデルが必要と…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

私たちは、このプロジェクトの財務支援のための研究と教育のための胸部外科の財団に感謝したいと思います。

Materials

VMS Anesthesia Machine MDS Matrx
Isoflurane Vet One 13985-528-60 2.0% through nose cone 
Induction Chamber Vet Equip 941444
Heating Bed Vestavia Scientific
Laser Doppler Monitor Moor Instruments VMS-LDF1
5-0 Suture, Polyester Surgidac VD-551 Taper Needel
Microdissecting Clips Biomedical Research Insturments 14-1030, 14-1060
Surgical Instruments Fine Surgical Instruments Forceps, needle holder

References

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Citer Cet Article
Bell, M. T., Reece, T. B., Smith, P. D., Mares, J., Weyant, M. J., Cleveland Jr., J. C., Freeman, K. A., Fullerton, D. A., Puskas, F. Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion. J. Vis. Exp. (85), e50910, doi:10.3791/50910 (2014).

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