Klinisk undersøgelse protokol til påvisning atypisk og klassisk scrapie hos får

Summary

Der fremlægges en kort protokol for klinisk undersøgelse for at hjælpe med påvisning af klassisk og atypisk scrapie hos får og geder.

Abstract

Diagnosen scrapie, en overførbar spongiform encephalopati (TSE) hos får og geder, er i øjeblikket baseret på påvisning af sygdomsrelateret prionprotein ved post mortem-test. Medmindre en tilfældig prøve af fåre- eller gedebestanden overvåges aktivt for scrapie, afhænger identifikationen af scrapietilfælde af indberetning af kliniske mistænkte, som er afhængig af den enkeltes kendskab til sygdommen og evnen til at genkende kliniske tegn forbundet med scrapie. Scrapie kan ikke overvejes i differentialdiagnosticering af neurologiske sygdomme hos små drøvtyggere, især i lande med lav scrapie prævalens, eller ikke anerkendt, hvis det præsenterer som nonpruritic form som atypisk scrapie. For at hjælpe med at identificere kliniske mistænkte fremlægges en kort undersøgelsesprotokol til vurdering af visningen af specifikke kliniske tegn forbundet med pruritiske og ikkepruritiske former for TSE hos får, som også kan anvendes på geder. Dette omfatter vurdering af adfærd, syn (ved test af trusselsrespons), pruritus (ved at teste reaktionen på ridser) og bevægelse (med og uden bind for øjnene). Dette kan føre til en mere detaljeret neurologisk undersøgelse af indberettende dyr som scrapiemistænkte. Det kan også anvendes i eksperimentelle TSE-undersøgelser af får eller geder til at evaluere sygdomsprogression eller til at identificere klinisk slutpunkt.

Introduction

Scrapie er en overførbar spongiform encephalopati (TSE) af får og geder, som tilhører gruppen af protein misfolding lidelser, som bovin spongiform encephalopati (BSE) hos kvæg, kronisk spild sygdom hos hjorte, og Creutzfeldt-Jakobs sygdom hos mennesker. Diagnosen stilles post mortem ved at opdage den unormale form af prionproteinet, som er proteinaseresistent, normalt i hjernen. To store naturligt forekommende scrapieformer kan skelnes, som er epidemiologisk, patologisk og biokemisk forskellige: klassisk scrapie og atypisk scrapie. Derudover kan en neurologisk sygdom med klassiske scrapielignende kliniske tegn fremkaldes hos får og geder ved eksperimentel infektion med BSE-agenten^6,10-11. Faktisk er naturligt forekommende BSE blevet diagnosticeret hos^{geder 3,17}. Bekæmpelse af klassisk scrapie (og BSE hos får, hvis det forekom naturligt) er opnået ved avl for genetisk resistens rettet mod prionproteingenet, men dette er vanskeligere for atypisk scrapie, som menes at være en sporadisk sygdom og er blevet diagnosticeret i lande, der anses for at være fri for klassisk scrapie, f.eks.

Scrapie er en neurologisk sygdom hos voksne får og geder, hvilket resulterer i ændringer i adfærd, fornemmelse og bevægelse, men sygdommen er langsomt progressiv, og kliniske tegn genkendes ofte ikke, fordi dyrepasseren eller dyrlægen muligvis ikke er bekendt med de kliniske tegn, eller scrapie betragtes slet ikke i differentialdiagnosticeringen af neurologiske sygdomme hos små drøvtyggere.

Den foreslåede undersøgelsesprotokol havde til formål at støtte den kliniske diagnose af scrapie med to formål for øje: Den bør være betydeligt kort at tillade scanning af mange dyr inden for en kort periode, men specifik nok til at muliggøre påvisning af scrapie-ramte dyr, hvilket opnås ved at vurdere tilstedeværelsen af kliniske tegn, der ofte forekommer hos scrapie-ramte dyr. Denne protokol er en lille ændring fra den, der anvendes til overvågning af geder for tegn på klassisk scrapie¹¹ og omfatter bind for øjnene af dyret, hvilket kan forværre kliniske tegn, der normalt ikke er forbundet med scrapie⁹.

Protocol

1. Vurdering af kropsholdning

1. Vurder dyrets kropsholdning, mens det er uforstyrret.
2. Dyr, der er berørt af TSE, kan stå med bredt baserede lemmer, kan forekomme krumme eller stå med en lav hovedvogn.

2. Vurdering af adfærd

1. Undersøg dyrets adfærd, når det efterlades alene, når det kontaktes, og når det håndteres.
2. TSE-ramte dyr kan udvise ændret dannelse ved at stå adskilt fra andre får eller ikke umiddelbart efter andre får.
3. Når dyret nærmer sig, kan det løbe væk og kollapser, eller det kollapser til gulvet, når det håndteres. Kompulsiv med eller mod uret, der kredser, kan ses hos får med atypisk scrapie.

3. Test af trusselsrespons

1. Hold dyrets hoved til test af trusselsresponset: Flyt hånden eller flere fingre flere gange mod hvert øje af dyret for at fremkalde en blinkrespons, men pas på ikke at røre ved ansigtshår eller skabe luftturbulens, der kan få dyret til at blinke.
2. Trusselsresponsen kan være fraværende hos scrapie-ramte dyr, især hos får med atypisk scrapie. Selv om testning af trusselsrespons er den eneste kranienervetest, der anvendes som en del af protokollen, kan visuel inspektion af ansigtet under denne procedure afsløre andre tegn på neurologiske underskud, der normalt ikke ses i scrapie, f.eks. ansigtslammelse. Hvis dyret ikke blinker som reaktion på truslen, anbefales det at teste palpebralrefleksen ved at røre øjenlågene for at sikre, at dyrets manglende evne til at blinke ikke skyldes ansigtslammelse.

4. Test af scratch-respons

1. Sørg for, at dyret er roligt under denne procedure, fordi testen ikke kan fortolkes i et kæmpende dyr.
2. Ridser områder af ryggen på bryst-, lændehvirvelsøjlen og sakrale områder, pauser mellem hver skrabe episode.
3. Hvis dyret reagerer med rytmiske hoved- eller kropsbevægelser eller bevæger sig eller slikker læberne ved ridser i et bestemt område, skal du gentage ridseprøven for at bekræfte reproducerbarheden af ridseresponset.
4. En repeterbar reaktion fremkaldes normalt hos dyr, der er pruritiske, som normalt omfatter får med klassisk scrapie eller geder med den pruritiske form for scrapie, men der er generelt ingen reaktion hos får med atypisk scrapie, medmindre andre pruritiske hudlidelser eller ektoparasitter er til stede.

5. Kontrol for uld tab og hudlæsioner

1. Undersøg huden.
2. Pruritus på grund af scrapie normalt forårsager hårtab, som kan være på meningsmåling, ryg, gump, side af brystet eller maven på grund af overdreven gnidning eller ridser, hvor den underliggende hud synes normal.
3. Hudafskrabninger kan forekomme senere, hvis dyret har mulighed for at gnide på skarpe genstande. Bite sår kan forekomme, især på lemmerne, på grund af overdreven nibbling af lemmerne.

6. Scoring Body Condition

1. Vurder dyrets kropstilstand ved palpering af ryg- og tværgående processer i lændehvirvlerne.
2. Scrapie kan forårsage et gradvist tab af kroppens tilstand, hvor lændehvirvlernes tværgående processer let kan mærkes individuelt, og enderne af processerne ser skarpe ud.

7. Bind for øjnene dyret

1. Dæk dyrets øjne med en hætte, som kan laves ved hjælp af enhver nonsee-through taske, hvor det ene hjørne er afskåret for at tillade vejrtrækning af dyret.
2. Udsætning af dyret, hvis der ikke er nogen sikkerhedsproblemer, og der ikke er risiko for skade på grund af et dyr i panik ellers holde fast i fårene og studere dyrs bevægelser, mens du stadig har kontrol over dyret.
3. Bind for øjnene kan forværre tegn på et vestibulært system eller cerebellar dysfunktion, som kan skjules af dyrets evne til at kompensere gennem sit syn. Tab af balance, lydighedsnægtelse eller cirkling kan fremkaldes, især hos ellers klinisk unremarkable får med atypisk scrapie.

8. Vurdering af dyrets bevægelse

1. Undersøg dyrets gang- og muskelbevægelser, når det bevæger sig frit.
2. Lydighedsnægtelse kan være karakteriseret ved bredt baserede bevægelser af bagbenene, hoppe med begge bagben eller svinge overdrevent i bagkvarteret, hvilket kan resultere i snublen eller kortvarigt sidde ned.
3. Tilstedeværelsen af en hovedrystelse er ofte subtil, når dyret er uforstyrret, men kan blive mere mærkbart under eller efter afslutningen af den kliniske undersøgelse.

9. Fortolkning

1. Overvej betydningen af resultaterne med hensyn til scrapie.
2. Selv om tilstedeværelsen af individuelle tegn, såsom en repeterbar reaktion på ridser, rysten, unormal adfærd, kredser, kollapse episoder, ataksi, eller en fraværende trussel svar, kan have forskellige årsager, den kombinerede forekomst af to eller flere af disse tegn er meget tyder på scrapie hos får eller geder.

Representative Results

Klinisk sunde får. Poll Dorset wether fra en scrapie-fri flok intracerebrally podet med kvæg hjerne af newzealandsk oprindelse og undersøgt på 49 måneder efter podning. Dette får har en normal kropsholdning, opfører sig normalt, udviser en normal trusselsrespons (Figur 1), reagerer ikke på ridsetesten, har en intakt fleece og en meget god kropstilstand. Det er klinisk ubemærket, når bind for øjnene og viser ingen tegn på en bevægelsesforstyrrelse.

Atypiske scrapie får præsenterer med den ikke-pruritiske form af TSE hos får. Cheviot wether fra en scrapie-fri flok intracerebrally podet med hjernen homogenisere fra en atypisk scrapie felt tilfælde af samme prion protein genotype (AHQ / AHQ) og undersøgt på 36 måneder efter podning. Dette får har også en normal kropsholdning, men opfører sig anderledes end de andre får i pennen og cirkler i urets retning. Det blinker ikke, når trusselsresponset testes. Ridser fremkalder ikke noget svar, og ingen fleeceændringer er synlige, men kroppens tilstand er kun retfærdig. Den cirkler med uret, når den har bind for øjnene (figur 2) og mister balancen. Gangarten er ataxic, og en fin hoved rysten er synlig.

Atypiske BSE-får, der præsenterer den pruritiske form af TSE hos får, hvilket klinisk svarer til den kliniske præsentation af klassisk scrapie-ramte får. Af denne grund er en klassisk scrapie sag ikke inkluderet. Poll Dorset wether fra en scrapie-fri flok intracerebrally podet med kvæg atypiske (L-type) BSE hjerne homogenisere og undersøgt på 50 måneder efter podning. Dette får står lidt hunched, har tendens til at holde bagbenene bredt baserede og falder på gulvet, når de fanges. Trusselsreaktionen er svag. Ridser af forskellige områder af ryggen fremkalder hoved- eller læbebevægelser (Figur 3), og der er uldtab med mindre hudtraumer på meningsmålingen. Kroppens tilstand er god. Når bind for øjnene, er det tilbageholdende med at flytte og hviler bagenden på forhindringen for at opretholde balancen. Fårene er ataxic og viser forben hypermetria.

Figur 1. Test af trusselsrespons. Truende gestus mod dyrets øje fremkalder en blinkrespons. Klik her for at se større billede.

Figur 2. Bind for øjnene. Med uret kredser fremkaldt ved bind for øjnene fårene med en hætte. Klik her for at se større billede.

Figur 3. Test af ridseresponset. Skrabe af ryggen fremkalder læbe slikke med sideward bevægelser af hovedet Klik her for at se større billede.

Discussion

Scrapie er en sygdom, der er opført på listen af Verdenssundhedsorganisationen for Dyresundhed (OIE), som i mangel af en hurtig og pålidelig ante mortem-test er afhængig af landmændenes eller dyrlægernes evne til at genkende de kliniske tegn, der er forbundet med denne sygdom. De fleste scrapietilfælde, især atypiske scrapietilfælde, findes imidlertid i øjeblikket ved målrettet TSE-overvågning, dvs. Avlsfår for resistens over for klassisk scrapie, hvilket reducerede antallet af klassiske scrapietilfælde, reducerede sandsynligvis også folks bevidsthed om sygdommen, så den sjældnere overvejes i differentialdiagnosticeringen af neurologiske lidelser hos får. Atypisk scrapie har også en lav prævalens med ca. fem tilfælde på slagterier og otte tilfælde i selvdøde dyr pr. 10.000, der er testet i Europa⁴. Derudover betragtes pruritus, der normalt er tydelig som alopeci med eller uden excoriation, ofte som et karakteristisk tegn på scrapie¹³. Således må en neurologisk sygdom uden samtidig pruritus som observeret i atypisk scrapie¹² eller den ikke-pruritiske form for caprine scrapie¹¹ ikke rejse mistanke om scrapie.

Formålet med denne undersøgelsesprotokol var at identificere kliniske tegn på TSE hos får ved at evaluere specifikke kliniske tegn i forbindelse med forskellige typer scrapie (atypisk og klassisk scrapie, sidstnævnte repræsenteret ved et atypisk BSE-podet får, som præsenteredes med klassiske scrapielignende tegn). I klassisk scrapie varierede procentdelen af tilfælde, der viste en positiv ridserespons ("nibblerefleks"), fra 50-77 i over 100 undersøgte får^5,8. Bevægelsesforstyrrelser kan observeres i op til 81% af klassiske scrapie tilfælde baseret på forskellige undersøgelser¹⁸. Lydighedsnægtelse er også et vigtigt tegn i forskellige naturligt forekommende tilfælde af atypisk scrapie, ofte ledsaget af adfærdsmæssige ændringer¹, men yderligere tegn rapporteret i både naturligt og eksperimentelt inficeret atypisk scrapie får kredsede og synshandicap^12,15,16, hvilket er grunden til bind for øjnene og test af trusselsrespons er inkluderet i undersøgelsesprotokollen. Scoring af kroppens tilstand, for eksempel ved hjælp af et 6 point scoringssystem¹⁴, gør det muligt at evaluere afmagring, som kan observeres hos scrapie-ramte får⁵. Selv om der tidligere er foreslået kliniske kriterier for støtte til påvisning af scrapie hos får², vedrørte disse kun påvisning af klassisk scrapie og tog hensyn til den kliniske historie, som muligvis ikke er tilgængelig, hvis dyr præsenteres på et slagteri.

Den nuværende protokol tillader screening af mange dyr for tegn på scrapie inden for en kort periode. Desuden kan undersøgelsesprotokollen anvendes på eksperimentelle undersøgelser af scrapie hos får og geder for at overvåge klinisk debut, progression og slutpunkt. Den erstatter imidlertid ikke en mere detaljeret fysisk og neurologisk undersøgelse med passende registrering af den kliniske casehistorie, eventuelt efterfulgt af accessoriske diagnostiske tests (undersøgelse af blod og cerebrospinalvæske; mere avancerede billeddannelsesteknikker, hvis det er relevant), hvilket kan være nødvendigt senere for at udelukke forskellige andre forhold hos små drøvtyggere, der er til stede med lignende tegn. , såsom metaboliske eller inflammatoriske neurologiske sygdomme, hjerne bylder, eller tumorer.

Selv om en klinisk undersøgelse generelt er mindre følsom ved påvisning af TSE-ramte dyr end post mortem-test baseret på påvisning af prionprotein^2,11, navnlig i en tidlig fase af inkubationsperioden, er dette i øjeblikket den eneste påvisningsmetode hos levende dyr og mest relevant for de lande, der ikke har et målrettet overvågningssystem til at identificere TSE-ramte små drøvtyggere.