Abstract
Hjerteinfarkt er fortsatt den viktigste dødsårsaken i vestlige land, til tross for betydelig fremgang i stent utbyggingsområde i de siste tiårene. For avklaring av de underliggende mekanismene og utvikling av nye terapeutiske strategier, tilgjengeligheten av gyldige dyremodeller er obligatoriske. Siden vi trenger ny innsikt i pathomechanisms av hjerte- og karsykdommer i henhold til in vivo forhold til å bekjempe hjerteinfarkt, er gyldigheten av dyremodell et viktig aspekt. Imidlertid beskyttelse av dyr er meget relevant i denne sammenheng. Derfor etablerer vi en minimal invasiv og enkel modell av hjerteinfarkt hos mus, noe som sikrer en høy reproduserbarhet og overlevelse av dyr. Dermed denne modellen oppfyller kravene i 3R-prinsippet (Replacement, raffinement og Reduction) for dyreforsøk og forsikre den vitenskapelige informasjonen som er nødvendig for videre utvikling av terapeutiske strategier for cardiovascular sykdommer.
Introduction
Hjerteinfarkt er en av de viktigste årsakene til dødsfall i industrialiserte land. Til tross for unektelig fremdriften av diagnostiske og terapeutiske tilnærminger, hjerte- og karsykdommer er fortsatt den viktigste årsaken til dødelighet. Gitt forbedret levealder og livsrelatert risiko, er en kontinuerlig økning i forekomsten av hjerte- og karsykdommer forventes i fremtiden. Derfor er det et sterkt behov for å etablere og validere nye metoder for behandling av kardiovaskulær sykdom. Informasjonen fra studier på mennesker lider av sine begrensninger, disse studiene generelt er utilstrekkelige for å forklare og forstå mekanismene på molekylnivå, å være i stand til å tilby løsninger til disse store helseproblemer.
Videre har grunnleggende forskning vært begrenset på grunn av kompleksiteten og vanskeligheten for å gjengi mekanismer for kardiovaskulær sykdom i laboratoriet. Derfor, for å øke vår kunnskap om patofysiologien av cardiokarsykdommer, er det viktig å validere dyremodeller 1,2. Men for å identifisere alle kaskader av molekylære hendelser som er involvert i den helbredende etter hjerteinfarkt, analyse ved forskjellige tidspunkter er nødvendig, forårsaker et stort antall dyr eksperimenter.
Myokardinfarkt eksperimenter blir ofte utført ved hjelp av dyremodeller. Indusere hjerteinfarkt hos små dyr 3-11 er den mest hensiktsmessige og effektive modell anvendt for å undersøke cellulære og molekylære hendelser enn store dyremodeller. Videre, ingen andre arter presenterer tilgjengeligheten av transgene eller knockout stammer som mus 12. Disse musemodeller er svært nyttige i andre sykdommer, inkludert kardiovaskulære sykdommer (for eksempel aterosklerose, i stent restenosis) 13,14. I tillegg er den lave svangerskapet, og det høye antall progenies kvalifisere musemodeller som mest attraktive system for å studere molekylære mekanismer for myocardial INFArction 12.
Ikke desto mindre størrelsen på hjertet hos mus regner med høy presisjon av manipulasjon under mikrokirurgi. Undervisning slike kvalifiserte og dyktige kirurgi personell er en tidkrevende og arbeidskrevende prosess. Derfor har vi her presentere en detaljert mikro prosedyren, inkludert tips og triks for å lede medarbeidere selv med gjennomsnittlig kvalifikasjoner, for eksempel studenter eller teknikere for å utføre komplekse hjerteinfarkt modell hos mus.
I utgangspunktet er intubasjon utføres ved hjelp av en kort kanyle uten å bruke trakeotomi. Thorax snitt ligger i interkostale området, unngå skade ribber eller / og omkringliggende vev. Dette sub-trinnet er svært relevant for å sikre rask utvinning og helbredelse 15. Ligaturen er laget differensial for kronisk iskemi og iskemi / reperfusjon modeller, for en høy overlevelse samtidig opprettholde en betydelig infarkt størrelse. Vår erfaring viser that ved hjelp av silke sutur sikrer en høyere reproduserbarhet forhold til Cryo-skader 16.
Konklusjonen er at den metoden som er beskrevet her kan anvendes i både kronisk iskemi og iskemi / reperfusjon modeller i små dyr. Tips og triks som presenteres i denne prosedyren er ment for å muliggjøre personell med selv lav eller gjennomsnittlig kvalifisering for å bruke den i små dyremodeller.
Protocol
MERK: Eksperimenter presenteres i denne artikkelen er utført i henhold til den tyske lav og til de europeiske retningslinjene dyr omsorg. Dyrene er avlet i Animal innretningen av Institutt for Laboratory Animal Science, Universiy sykehus Aachen, Tyskland, under oppsyn av professor Dr. R. Tolba og Dr. A. Teubner (dyrevelferd offiser).
1. Animal Care
- Hold mus i et spesialisert care unit, sikre riktig tilgang til mat og spesialiserte veterinærkontroll og behandling. Dersom dyrene flyttes eller kjøpt fra utsiden, kan forsikre en ukes overnatting før under prosedyren.
2. Intubasjon
- Bedøve 8-10 uker gamle hann C57BL / 6 mus av villtype, 25-27 g ved hjelp av intraperitoneal injeksjon av 100 mg / kg ketamin og 10 mg / kg xylazin. Overvåke nivået av anestesi ved tå klype reflekser. Plasser dyrlege salve på øynene for å hindre tørrhet under prosedyren.
- Sikre vedlikehold av sterile forhold for å unngå infeksjoner under operasjonen ved hjelp av sterile materialer og instrumenter.
- Plasser bedøvet mus i en liggende stilling på en oppvarmet kirurgi bord. Fjern hår fra både ventral nakken og venstre halvdel av brystkassen med en liten barberhøvel og desinfiser med 70% alkohol før snittet.
- Utføre en liten median snitt på 0,5 cm ved hjelp av kirurgi saks i midten av halsen. Under huden, går gjennom de to fett organer med sterile buet pinsett og visualisere luftrøret henhold stereo gjennom transparence av kledningen muskel.
- Innføre muntlig intubering kanylen inn i luftrøret etter visningen ved hjelp av stereo (figur 1A). Skille metallkanyle through gjennomsiktig vev. Og kontroller, posisjon og plassering under driften til enhver tid (figur 1B).
- Koble kanylen til den lille dyret ventilator og justere ventilasjons innstillinger i henhold produserer retningslinjer (tidevolum mellom 100-150 ul og en pusterytme mellom 100-150 per min).
3. hjerteinfarkt Induksjon
- Utfør en hud snitt mindre enn 0,5 cm i midten av en linje mellom xyphoid og venstre axila. Bruk pinsett for å skille muskelen laget fra de underliggende ribbeina.
- Utfør et lite snitt mellom ribbeina ved å bruke en liten saks til brysthulen er åpnet 17. For kronisk infarkt, utføre snitt i 5 th interkostalrommet (figur 1C) og / eller for iskemi / reperfusjon modell, i 4. interkostalrom (figur 1D): for en enklere tilnærming nummer fra under 2 th og 3 th
- Plasser haker inn i innsnittet for å åpne brystkassen og å visualisere hjertet.
- Fjern forsiktig posen for å forhindre overdreven fibrotiske prosesser.
- Visual venstre synkende coronary artery (LAD) som en dypt plassert lys rød fartøy. Hvis LAD ikke kan visualiseres, vurdere noen referansepunkter for å øke reproduserbarhet.
- For kronisk infarkt modell, plasserer ligatur i midten av ventral side av hjertet (mellom atriet og apex), som har som referanse venen som vist i figur 1C. Binde begge grener av arterien bruker 0/7 silke sutur for å få en transmural fremre og bakre infarkt. Den grå farge indikerer plasseringen av ligaturen og kan gjentas hvis nødvendig (figur 1C).
- For iskemi / reperfusjon modellen, plasser ligatur under atriet, over hoveddelen av LAD (figur 1D). Den LIGperaturen er plassert over en silikonrøret for å beskytte integriteten av fartøyet. Den grå farge indikerer infarktområdet og skal vises på hele hjertet (Figur 1D). Plassere time sting på ribbeina under iskemi perioden og fukte bruke en kompress for å unngå vev tørking. Etter iskemi, fjerne silikonrøret og kutt sutur med liten saks til å visualisere reperfusjon.
- Ved siden av bedøvelse og smertestillende midler som brukes i begynnelsen av prosedyren (trinn 2.1 og 2.2), bruker 0,5% isofluran under operasjonen for å sikre riktig komforten av dyret, eller følge retningslinjene i institusjonen din dyrepleie.
4. Sutur og gjenoppretting
- Fjerne gjenværende luft fra thorax ved å fylle med varmt isotonisk saltløsning.
- Lukk thorax med tre suturer 0/6 (som vist i figur 2A og 2B). Plasser de mediale suturene i en vinkel på 90 °, for å sikre såealed lukking av ribbene, som vist i figur 2 (figur 2A, B).
- Lukke muskelen laget med to sting (Figur 2C) og huden med 3-4 sting 0/6 (figur 2D). Utfør disse sting separat for å få et riktig vindu for videre ekkokardiografisk måling.
- Koble fra intubasjon kanylen fra respiratoren og la spontan pust. For senere identifikasjon, merke musen med det lokale systemet (spør dyrevelferd offiser fra din institusjon).
- Lå nede muse på venstre side under den røde lampen før den våkner. Ikke la et dyr uten tilsyn før den har gjenvunnet nok bevissthet. Ikke la et dyr som har gjennomgått kirurgi for å være i selskap med andre dyr før fullt restituert.
- Håndtere smerte behandling med buprenophine 0,1 mg / kg kroppsvekt, subkutant for de neste tre dagene, etter retningslinjene i institusjonen din dyrepleie.
5. Analyse av hjerteinfarkt
- Regelmessig overvåke hjertefunksjonen ved hjelp av ekkokardiografi (figur 3A): ejeksjonsfraksjon, fractional forkorte, minuttvolum og hjerte dimensjoner.
- Bedøve dyrene ved hjelp av intraperitoneal injeksjon av 100 mg / kg ketamin og 10 mg / kg xylazin. Bekreft riktig anesthetization før operasjonen av mangel på reflekser.
- Åpne brysthulen og avgiftsdirektoratet hjertet, plassere den i sterile PBS løsning vaske grundig de resterende blod.
- Hvis nødvendig, samle blod direkte fra hjertet ved å unngå skade på infracted regioner, eller etter fjerning av hjertet, fra brysthulen.
- Etter vask, stopper hjertet i Dias i mettet KCl løsning (steril filtrert 3M KCl i PBS). For histologisk analyse fikse hjertet i 10% formalin og fortsett med trinn 5.7.
- Hvis det er nødvendig, å måle levedyktigheten av bilenkere celler ved Evans-Blue / triphenyl tetrazoliumklorid (TTC) flekker. Etter ombygging av ligaturen på det første sted, perfuse hjertet med 200 pl 1% Evans blå løsning ved hjelp av en aortiske kanylen og fryse hjertet i en liten plastpose ved -20 ° C, uten vasking.
- Etter 2 timer, utfører 5 glir sideveis ved hjelp av en skarp skalpell og inkuber dem i 10-15 min i TTC-oppløsning ved 37 ° C, som beskrevet av stilles. Fix lysbildene i 10 minutter i 10% formalin og sette dem mellom mikroskopiske lysbilder for videre analyse.
- Embed hjertet vev i parafin, ved å plassere hjertet på spissen, for å utføre tverrgående seksjonering. Utføre serieseksjonen av 5 um. Samle de første 20 seksjoner og kast neste 300 mikrometer. Fortsett seksjonen protokollen til mitral ventil nivå er nådd (figur 3A, B). Seriesnitt, er 400 um fra hverandre langs hele hjertet samlet og kan være farget feller kvalitativ og kvantitativ analyse.
- Mål infarkt størrelse ved hjelp Gomori sin ett-trinns flekker 6-8.
- Analyser angiogenese, kollagen innhold eller betennelsesceller rekruttering i serie delen bruker vanlig immunhistokjemi flekker.
Representative Results
Den myokardinfarkt fremgangsmåte oppstår i 25-30 min, og viser en dødelighet på 10%. Etter operasjonen, mus gjenopprette fra anestesi innen neste 15 min. Ingen fysisk svekkelse ble observert i det opererte mus. Det er imidlertid en høyere risiko for hjerte ruptur en uke etter post-kronisk hjerteinfarkt, hvis reparasjon prosessene er forstyrret under inflammasjonsfasen. Siden hjerte er i stand til å endre seg vesentlig dimensjoner under pumping, er det viktig for alle de innsamlede hjerter som skal stoppes i samme posisjon, for eksempel i Dias. Dette kan oppnås ved å perfusert hjertet med en mettet KCl-oppløsning. Økt ekstracellulære K + -konsentrasjon blokkerer de ioniske pumper, reduserer membranhvilepotensialet av hjerteceller, noe som resulterer i et diastolisk arrest av hjerteaktivitet.
Den infarkt kan ses i ultralyd-analyse (figur 3A, nedre panel). Sammenlignet medden normale hjertemuskelen, vises iskemiske regioner tynn og hypokinetisk (figur 3A, øvre panel). Avhengig av modell brukt, vil infarkt størrelse varierer. Den kroniske modell infarkt induserer sirkulær, transmuralt infarkt i spissen (figur 3B), samtidig som ischemi / reperfusjon induserer et tynt, mellomvegg og over hele hjertet (Figur 3C). Det finnes mange metoder for å fastslå infarkt størrelse. Hvis målet er å analysere den direkte virkning på hjerte levedyktighet blir en Evans-Blue / TTC flekker 18 indikert som skal utføres i minst 2 timer etter reperfusjon, for å være i stand til å se noen endringer i hjertemuskelen. Seksjoner kan analyseres umiddelbart (Figur 3B, midtre panelet) etter farging eller kan holdes mellom glassplater i formalin i 2-3 dager (Figur 3C, midt panel). Det blå området representerer den sunne hjertemuskelen, ikke påvirket av iskemi. Den røde området representerer den levedyktig hjertemuskelen inne the iskemisk område (risiko myokard), og det hvite området representerer dødt vev. Vanligvis er den infarkt størrelsen uttrykt som prosent i forhold til risikoområdet.
Den modne arr resulterende etter ombygging prosesser kan lett måles ved immunohistolgy hjelp Gomori sin ett-trinns farging. Blå-farget infarcted og rød-farget sunne ventrikulære områder (Figur 3B og C, høyre paneler) bestemmes i den første delen fra hvert nivå før mitralklaffen. For å unngå variasjoner på grunn av binding av LAD ved forskjellige nivåer, er infarkt fra alle delen behandlet og uttrykt som en prosent av det totale volum av venstre ventrikkel. Kan oppnås en infarktvolum på 15-20% i kronisk infarkt modell og fra 10 til 15% etter ischemi / reperfusjon modell. Videre vil den kroniske infarkt modellen indusere en forsterket dilatasjon, ikke observert i ischemisk / reperfusjon modellen (figur 3B og C høt panel).
Konvensjonelle fargingsprosedyrer kan anvendes, for eksempel: CD31-farging som brukes til å avsløre angiogenese (rød, figur 4A) eller glatt muskulatur actin-farging for å bestemme myofibroblasts (grønn, figur 4B). Dobbelt fluorescens farging kan også brukes til å identifisere forskjellige målmolekyler i infarkt området, siden fraværet av kardiomyocytter gir ingen auto-immunfluorescens (figur 4C).
Figur 1: Medial innsnitt og innsetting av intubasjon s kanylen (A). Den stereomicroscopic visualisering av metallet kanylen gjennom transparens av vevet (B). Tracheal ringer (blå piler) og kanylen (svart pil) er påpekt. Interkostalrom snittet for kronisk infarkt model og en ligatur av LAD (C). Ligaturen er plassert på midten av hjertet (mellom atriet og apex, sort i nedre panel), idet det som referanse enden av venen (skjematisk i blått, nedre panel). Begge grener av arterien skal bindes (rødt i nedre panel). Den grå fargen indikerer infarktområdet og det vises i den nedre halvdel av hjertet (høyre nedre panel). Ligaturen for iskemi / reperfusjon modellen er laget under atriet, innbinding hoveddelen av LAD (rødt i nedre panel) over en silikonrøret (høyre side) (D). Den grå fargen indikerer infracted området, som er til stede på hele hjertet (høyre nedre panel). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 2: (A) og iskemi / reperfusjon modell (svart, venstre panel). In vivo avbildning av ribbeina sutur (C, venstre panel ), muskel sutur (C, midtre panelet) og huden sutur (C, høyre panel). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 3: ekkokardiografi bilder. Bilder av normal (A, øvre panel) og infarktområder (A, nedre panel), er kjøpt i den lange aksen (langsgående, venstre panel) eller i den korte aksen (tverrgående, høyre panel) .. Infarkt indusert av kronisk ligatur(B) og etter en time iskemi etterfulgt av reperfusjon (C). Evans Blå / TTC Farging tillater identifisering av perfusert (blå) / ikke-perfusert områder samt levedyktig (rød) / dead (hvit) hjertemuskelen (B, C, mellompaneler). Gomori sin ett-trinns farging gjør identifisering av infarktområder (blå), og skiller dem fra de normale områder (rød) (B, C, høyre panel). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 4: Ulike stainings kan utføres i infracted område, for eksempel CD31 å beskrevet neo-angiogenese (A, røde, enkle piler), eller glatt muskulatur aktin for myofibroblasts (B, grønn, enkle piler), så vel som dobbelt farging (C, CD31-rød / glatt muskel aktin-grønn), motfarget med DAPI for kjerner (blå). Myofibroblasts kan skilles lett fra glatte muskelceller fra små eller store arterier, som alltid er ledsaget av en endothelial lag (C, piler). Doble pilene peker erytrocytter autofluorescence. Skala barer 50 mikrometer.
Discussion
Under prosedyren, er det noen kritiske punkter bemerkes: intubering, åpningen brysthulen og LAD-ligatur. Den første kritiske trinnet er intubasjon av dyret før experiements. Mange grupper er ved hjelp av en vertikal støtte for fiksering av mus, og en lyskilde for å sette kanylen direkte inn i luftrøret. Denne metoden har usikkerhet om riktig innføring av kanylen inn i luftrøret, og er mest utsatt for svikt av nybegynnere. Å lage et lite innsnitt, kan posisjonen av kanylen kontrolleres under hele manøveren, og dermed redusere den standard hastighet. Videre er tracheotomy gått, og dermed redusere komplikasjoner og å redusere tiden for operasjonen.
Det neste trinnet er kritisk åpning av brysthulen. Median sternotomi representerer en høy risiko manøver forsinke utvinningen av dyrene. Den laterale venstre snitt innebærer kutting av 2-3 ribber 15
Ligaturen i seg selv representerer den mest kritiske trinnet. Den venstre, nedadstigende koronararterie er vanskelig å bli visualisert, og ofte må være bundet uten visning. Derfor er noen anatomiske referansepunkter påpekt for å hjelpe kirurgen å utføre korrekt ligering. For kronisk infarkt modellen blir ligatur plasseres i midten av den ventrale side av hjertet, mellom atriet og toppen, ovenfor avslutningen av den store fremre vene (figur 2B). Effektiviteten kan controlled ved å visualisere utseendet til den grå farge i de berørte områdene. Dersom infarktområdet vises anterior og inkluderer ikke den bakre vegg, kan en ny sutur være plassert til venstre for den første suturen. Hoved roten av LAD er alltid synlig under atriet 18, og derfor ikke presentere alvorlige problemer i å oppdage denne delen. Imidlertid presenterer atriet den store risikoen for blødninger og må håndteres forsiktig.
Fremgangsmåten er begrenset ved tilstedeværelsen av passende utstyr. En ventilator og passende anestesi system for små dyr er kostbare og krever forbindelse til gass og ventilasjonssystem i rommet. Videre er det nødvendig i den første uken en nøye overvåking av dyrene etter at prosedyren for å detektere mulige kliniske. For å undersøke hjertefunksjon under forsøket, er høyoppløselig ultralyd, komplekse Langendorf perfusjon-system, eller små intraventrikulære kateter målinger nødvendig, invOlving høye kostnader og økt kompetanse.
Med tanke på hjerteinfarkt, er det ingen alternative metoder tilgjengelig for å reprodusere kompleksiteten av hendelsene i vitro. Avhengig severdighet, ex vivo perfusjon av en isolert hjerte i Langendorff system gir informasjon om kontraktilitet, hjertefunksjon og myokardviabilitet som svar på ulike stimuli eller narkotika. Men utelukker det alle forstyrrelser av blodkomponenter og immunsystem, og det er ikke indisert for lang-studier av ombygging og helbredelse etter hjerteinfarkt.
Etter å ha utført den hjerteinfarkt prosedyren, kan alle andre funksjonsanalyse skal gjennomføres, som intraventrikulære trykkmålinger, ultralyd (små dyr ultralydsystemer) eller isolert hjerte Langendorff-perfusjon. Videre kan alle biologiske og molekylære analyser utføres for å identifisere celler, proteiner, mRNA, microRNAs, genes eller andre biomarkører, som kan brukes som terapeutiske mål å utvikle nye strategier for behandling av hjerteinfarkt.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Stereomicroscope | Olympus | SZ/X9 | |
| Mouse ventilator | Harvard Apparatus | 730043 | Model Minient 845 |
| Dual Anesthesia System (Tabletop Version) | Harvard Apparatus | Selfcontained isofluranebased anesthesia unit for use on lab tables, with a compact 8" x 11" footprint. | |
| Intubation cannula | Harvard Apparatus | 732737 | |
| Forceps | FST, Germany | 9119700 | standard tip curved 0.17 mm x 0.1 mm |
| Scissors | FST, Germany | 9146011 | straight |
| Vannas scissor | Aesculap, Germany | OC 498 R | |
| Retractors | FST, Germany | 1820010 | 2.5mm wide |
| Retractors | FST, Germany | 1820011 | 5 mm wide |
| Wire handles | FST, Germany | 1820005 | 10 cm |
| Wire handles | FST, Germany | 1820006 | 14 cm |
| Ketamine 10% | CEVA, Germany | ||
| Xylazine 2% | Medistar, Germany | ||
| Bepanthene eye and nose cream | Bayer, Germany | ||
| Silicon tube | IFK Isofluor, Germany | custommade product | diameter 500 µm |
| section thickness 100 µm | |||
| polytetrafluorethylene catheter | |||
| PROLENE Suture 6/0 | ETHICON | 8707H | polypropylene monofilament suture, unresorbable, needle CC1, 13 mm, 3/8 Circle |
| 7/0 Silk | Seraflex | IC 1005171Z | |
| Ultrasound | Vevo, Canada | 770 Vevo |
References
- Liehn, E. A., Postea, O., Curaj, A., Marx, N. Repair after myocardial infarction, between fantasy and reality: the role of chemokines. J Am Coll Cardiol. 58 (23), 2357-2362 (2011).
- Liehn, E. A., Radu, E., Schuh, A. Chemokine contribution in stem cell engraftment into the infarcted myocardium. Curr Stem Cell Res Ther. 8 (4), 278-283 (2013).
- Alexander, S., et al. Repetitive transplantation of different cell types sequentially improves heart function after infarction. J Cell Mol Med. 16 (7), 1640-1647 (2012).
- Liehn, E. A., et al. Compartmentalized protective and detrimental effects of endogenous macrophage migration-inhibitory factor mediated by CXCR2 in a mouse model of myocardial ischemia/reperfusion. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 33 (9), 2180-2186 (2013).
- Liehn, E. A., et al. Ccr1 deficiency reduces inflammatory remodelling and preserves left ventricular function after myocardial infarction. J Cell Mol Med. 12 (2), 496-506 (2008).
- Liehn, E. A., et al. A new monocyte chemotactic protein-1/chemokine CC motif ligand-2 competitor limiting neointima formation and myocardial ischemia/reperfusion injury in mice. J Am Coll Cardiol. 56 (22), 1847-1857 (2010).
- Liehn, E. A., et al. Double-edged role of the CXCL12/CXCR4 axis in experimental myocardial infarction. J Am Coll Cardiol. 58 (23), 2415-2423 (2011).
- Oral, H., et al. CXC chemokine KC fails to induce neutrophil infiltration and neoangiogenesis in a mouse model of myocardial infarction. J Mol Cell Cardiol. 60, 1-7 (2013).
- Projahn, D., et al. Controlled intramyocardial release of engineered chemokines by biodegradable hydrogels as a treatment approach of myocardial infarction. J Cell Mol Med. 18 (5), 790-800 (2014).
- Schuh, A., et al. Novel insights into the mechanism of cell-based therapy after chronic myocardial infarction. Discoveries. 1 (2), e9 (2014).
- Schuh, A., et al. Effect of SDF-1 alpha on Endogenous Mobilized and Transplanted Stem Cells in Regeneration after Myocardial Infarction. Curr Pharm Des. 20 (12), 1964-1970 (2013).
- Zaragoza, C., et al.
- Kanzler, I., Liehn, E. A., Koenen, R. R., Weber, C. Anti-inflammatory therapeutic approaches to reduce acute atherosclerotic complications. Curr Pharm Biotechnol. 13 (1), 37-45 (2012).
- Liehn, E. A., Zernecke, A., Postea, O., Weber, C.
- Kolk, M. V. V., et al. LAD-Ligation: A Murine Model of Myocardial Infarction. J. Vis. Exp. (32), 1438 (2009).
- Ryu, J. H., et al. Implantation of bone marrow mononuclear cells using injectable fibrin matrix enhances neovascularization in infarcted myocardium. Biomaterials. 26 (3), 319-326 (2005).
- Frobert, A., Valentin, J., Cook, S., Lopes-Vicente, J., Giraud, M. N. Cell-based Therapy for Heart Failure in Rat: Double Thoracotomy for Myocardial Infarction and Epicardial Implantation of Cells and Biomatrix. J. Vis. Exp. (91), e51390 (2014).
- Xu, Z., Alloush, J., Beck, E., Weisleder, N. A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery. J. Vis. Exp. (86), e51329 (2014).
