Abstract
심장 마비는 심장이 휴식 또는 스트레스 동안 세포 산소 요구에 상응하는 속도로 혈액을 펌프에 실패하는 증후군이다. 그것은 노력에 특히 체액 저류, 호흡 곤란, 피로, 특징입니다. 심장 마비는 성장 공중 보건 문제, 입원의 주요 원인 및 사망의 주요 원인이다. 허혈성 심장 질환이 심장 기능 상실의 주요 원인이다.
심실 리모델링 좌심실의 구조, 크기 및 형태의 변화를 의미한다. 좌심실이 구조적 리모델링 (예, 전신 동맥 고혈압 또는 대동맥판 협착증), 또는 볼륨과 부하 압력 과부하에 의해 부상 (예를 들면, 심근 경색)에 의해 유도된다. 심실 벽 리모델링 응력에 영향을 받기 때문에, 이는 심장 기능에 심부전의 발전에 지대한 영향을 미친다. 왼쪽 전방 descendin의 영구 결찰 모델마우스에서 g 관상 동맥은 심실 리모델링과 심장 기능 심근 경색을 조사하는 데 사용됩니다. 이 모델은 관상 좌전 하행의 과도 결찰 모델의 비교 목적 및 병태 생리 학적 관련성의 관점에서 근본적으로 다르다. 허혈 / 재관류 손상의 후자의 모델에서 초기 경색의 정도는 재관류 심근 회수에 영향을 미치는 인자에 의해 조절 될 수있다. 대조적으로, 관상 좌전 하행 영구적 결찰 후 24 시간에서 경색 부분은 고정되어있다. 이 모델에서 심장 기능은 1) 경색 확장, 경색 치유 및 흉터 형성의 과정에 의해 영향을 받는다; 2) 좌심실 팽창, 심장 비대, 심실 리모델링의 수반 개발.
관상 동맥, 침습적 혈역학 MEA의 기술 좌전 하행의 영구 결찰의 모델 외에마우스의 숏 상세하게 제시된다.
Protocol
참고 :이 절에 설명 된 모든 실험 절차는 기관 동물 관리 및 Katholieke Universiteit Leuven의 연구 자문위원회에 의해 승인되었다 (프로젝트 : 2,013분의 154-B 드 기 스트).
왼쪽 앞쪽에 내림차순 관상 동맥 1. 영구 결찰
- / kg의 펜 토바 비탈 나트륨 70 mg의 40 ㎎ / kg의 복강 내 투여에 의한 마우스를 마취. 더 이상 회사 발가락 핀치 반응 할 때 마우스가 마취의 적절한 비행기에 도달하지 확인합니다. 항상 적절한 마취 어떤 수술이나 간섭하기 전에이 방법을 확인합니다. 마취 동안 각막의 건조를 방지하기 위해 안과 연고를 윤활 사용합니다. 절차 (부 프레 노르 핀 0.05 ㎎ / kg SQ)이 시작되기 전에 수술 전 통증 2-4 시간을 제공합니다.
- 생존 수술 중 일치하는 무균 기술을 적용합니다. 최대로 가능한 범위 미생물 사기에 억제하는 절차를 구현오염물 중요한 감염이나 화농이 발생하지 않도록. 이러한 절차는이 사이트의 수술 부위 소독을 통해 멸균 악기와 멸균 자료의 사용, 외과 영역의 소독 및 모피 / 머리의 제거를 포함한다.
- 자기 제조 무디게 20 게이지 바늘을 가진 마우스를 삽관.
- 머리의 과신전으로 누운 위치에 마우스를 놓습니다.
- 목 부위에 빛을 초점을 맞 춥니 다. 무딘 pincet와 혀를 들어 올립니다. 후두의 입구는 명확하게 볼 수 있습니다.
- 직접 비전 아래 기관에 후두를 통해 무딘 바늘을 전달합니다. 인공 호흡기에 마우스를 연결하여 올바른 삽관을 평가 (μL에 박출량 : 3 × 체중 (g) + (155), 주파수 : 분당 120 타).
- 또한, 먼저 신중하게기도를 노출하여 기관 내 삽관의 시각화를 향상시킬 수 있습니다.
- 5mm 중반 넥 절개를하고 철회다만기도 상기 근조직.
- 기관의 직접 시각화를위한 수술 실체 현미경을 사용하여 삽관을 수행합니다. 혀를 들어 올려 기관에 자체 준비 무딘 20 게이지 바늘을 입력합니다. 인공 호흡기에 마우스를 연결하여 올바른 삽관을 확인 (μL에 박출량 : 3 × 체중 (g) + (155), 주파수 : 분당 120 타).
- 머리의 과신전으로 누운 위치에 마우스를 놓습니다.
- 앙와위에서 마우스를 유지하고 테이프로 마우스를 고정합니다. 저체온증을 방지하기 위해 가열 패드에 수술을 수행한다.
- 면도와 베타 딘으로 피부를 소독. 왼쪽 뒷다리가 수술 중 좌심실에 더 잘보기를 얻기 위해 오른쪽 뒷다리 교차주의한다.
- 흉골까지 작은 가로 피부 절개를하고 기본 피부와 근육을 분리합니다.
- m를 옆으로 빼냅니다. pectoralis 미성년자와 m. 5-0 실크 봉합사와 주요 pectoralis.
- 내가 확인무딘 pincet을 삽입하여 세 번째 늑간에서 ncision.
- 흉골에 도달 할 때까지 내측하는 측면에서 늑간 근육 아래에 pincet 이동합니다. 피부 내부에서 pincet을 눌러 흉부 벽에 구멍을. 주의 깊게 단지 작은 가위로 pincet 위의 늑간 근육을 절단하여 개흉술을 완료합니다. 폐의 천공을 방지하기 위해이 기술을 사용합니다.
- 폐를 보호하기 위해 공동에 0.9 % NaCl을 침지 스폰지를 넣어. 심장의 좌측의 노출을 얻을 늑간에 상처 스프레더 (가슴 권취)를 소개한다. 현재로서는, 좌심방, 좌심실, 관상 동맥 좌전 하행은 실체 현미경 아래에서 볼 수 있습니다.
- 좌심방의 끝에서 1mm에 대한 하나의 6-0 prolene의 합자로 관상 동맥 좌전 하행의 결찰을 수행합니다. 이것은 제 분기에서 대각선 말단이다.
참고 : 또는 7-0 (00.05 mm 직경) 8-0 또는 스레드 (0.04 mm 직경)이 사용될 수있다. 바늘은 C-1 13mm 3/8 원 테이퍼 포인트 바늘입니다. 관상 동맥 좌전 하행의 성공적인 결찰은 영향을받는 지역에 옅은 나타나는 심근의 결과로, 즉시 변색을 유도한다. - 상처 스프레더 (가슴 트랙터)를 제거합니다.
- 늑간 공간 주위에 세 6-0 티 - Cron의 봉합을 놓습니다. 봉합을 체결하기 전에, 흉강에서 스폰지를 제거하고 인공 호흡기의 유출을 차단하여 폐를 다시 확장합니다. 이렇게함으로써, 폐 벽측 흉막과 다시.
- 그 후, 단단히 봉합을 당겨 가슴을 눌러서 재 팽창을 반복합니다. (가슴에 압력을인가 할 때 기포가 보이지되어야 함)의 생리 식염수를 이용하여 소량의 흉부의 성공적인 폐쇄를 확인한다.
- 폐의 정상적인 확장을 확인하는 늑간 근육을 통해 봐. 두 pectoralis 근육의 위치를 조정 역할기흉의 예방을위한 여분의 장벽.
- 5-0 실크 봉합사로 피부를 닫습니다.
- 인공 호흡기에서 마우스를 분리하고 가열 패드에 복구 할 수 있습니다. 이 흉골 드러 누움을 유지하기 위해 충분한 의식을 회복 할 때까지 무인 동물을 방치하지 마십시오. 완전히 회복 될 때까지 다른 동물의 회사에 수술을 한 동물을 반환하지 않습니다.
- 지속적으로 수술 후 통증 (수술 후 최소 48 시간 동안 프레 노르 핀 0.05 ㎎ / kg SQ BID)를 제공합니다.
마우스 2. 생체 침략 혈역학 적 측정
- 전 절차 신호 드리프트를 최소화하기 위해 적어도 30 분 동안 37 ℃에서 멸균 수 1.0 프랑스어 밀라 압력 카테터 잠수함. 전자적 2000 Hz에서 0 mmHg에서 100 mmHg의 압력에서 센서 및 기록 데이터를 보정.
- 1.4 g / kg 우레탄의 복강 내 투여에 의해 마취를 수행합니다. 그 확인더 이상 회사 발가락 핀치 반응 할 때 마우스를 마취의 적절한 비행기에 도달하지 않습니다.
- 앙와위에서 마취 마우스를 놓습니다. 테이프로 팔다리를 고정합니다. 가열 패드와 체온을 유지하고 직장 프로브를 모니터링 할 수 있습니다. 넥 영역을 면도 갑상선을 노출 넥 영역 정중선 절개.
- 구부러진 바늘 목을 고정합니다.
- 타액선을 옆으로 당겨 우측 총 경동맥을 노출. 흰색 스레드 유사한 미주 신경은, 동맥을 따라 놓여있다. 조심스럽게 곡선 집게를 사용하여 미주 신경에서 경동맥을 분리합니다.
- 다른 조직에서 분리 오른쪽 경동맥에서 곡선 집게를 전달합니다. 동맥 주위의 결합 조직을 제거합니다.
- 오른쪽 경동맥에서 두 6-0 실크 와이어를 전달합니다. 가까운 머리쪽으로 배치되는 상단 선에 꽉 매듭을 확인하고 KOCHER (원위부 폐색 결찰)로 고정한다. PROXI 전달말 와이어를 두 번 왼쪽에서 오른쪽으로 2 kochers (근위 비 폐쇄성 와이어) 고정하십시오.
- 멸균 0.9 % NaCl을 놓아 습기 경동맥을 유지합니다. 면봉으로 물기를 닦아냅니다.
- 원위부 결찰 및 근위부 비 폐쇄성 와이어 사이에 26 게이지 바늘로 오른쪽 경동맥의 절개를합니다.
- 동맥에 압력 센서를 소개한다. 더 혈액 손실이 없는지 확인합니다. 부드럽게 전방 1.0 프랑스어 밀라 압력 카테터를 밀어 카테터 쇄골 아래 스루 와이어 신중하게 통과 할 수있는 방식으로 근위 비 폐쇄성 와이어를 조정한다.
- 근위 비 폐쇄성 와이어의 조정시 혈액 손실을 최소화합니다. 매우 깨지기 때문에 진행하는 동안 너무 많은 압력 센서를 압축하지 마십시오. 근위 와이어 동맥을 폐색되지해야하기 때문에, 혈관 혈액으로 가득 유지되어야합니다.
- 압력 신호를 기록하기 시작한다. 동맥압 신호 fluctuat70 mmHg에서 100의 수축기 압력 - - 120 mmHg로 (60)의 이완기 혈압 사이의 건강한 마우스에 말이지.
- 무명 동맥을 통해 좌심실에 대동맥을 통해 카테터를 직접. 120 mmHg로 - 심실 압력 0 mmHg에서 100 사이의 변동. 카테터는 좌심실 내부 안정화 할 수 있습니다. 실험 조건에 따라 60 분, 30 분의 신호를 기록한다.
- 실험 종료 후, 30 분 동안 1 % Alconox 사의 카테터 담근다. 밀리 Q 물 카테터를 씻으십시오. 발포체 블록에 저장 카테터.
- 추가 분석을 위해 레코딩 소프트웨어에서 데이터를 검색합니다.
- 데이터 분석을 위해, 압력 신호가 안정 시간 간격을 고려한다. 관심있는 기록 된 데이터의 최소 10 연속 심장주기를 선택합니다.
- 심박수, 최대 좌심실 수축기 압, 최소 이완기 왼쪽 ventr를 분석 LabChart 소프트웨어 버전 8.0을 사용하여 유사한icular 압력 isovolumetric 좌심실 수축 (DP / DT 최대), isovolumetric 좌심실 이완 (DP / DT 분), 이완 기말 좌심실 압력 피크 레이트의 최고 속도 및 isovolumetric 좌심실의 시정 압력 가을 (타우) 7.
참고 : 이완 기말 압력이 즉시 isovolumetric 수축에 의해 유도 된 압력 서지 전에 시간 시점에서의 압력에 해당합니다. 타우 계산은 단지 수 감쇠 곡선에 좌심실 압력 피팅에 기반 P (t)로 표현이 수식에서, P 0 즉 -t / 타우 + B에 = P (t)는 시간에 좌심실 압력은 DP / DT의 최대 음의 값을 후 t에 도달했습니다. 파라미터 B는 단순 접근법에서 0으로 가정 될 수있는 이론적 점근선에 대응한다. 향상된 isovolumetric 휴식은 타우의 작은 값을 초래한다.
- He, J., et al. Risk factors for congestive heart failure in US men and women: NHANES I epidemiologic follow-up study. Arch Intern Med. 161, 996-1002 (2001).
- Anversa, P., Sonnenblick, E. H.
- Erlebacher, J. A., Weiss, J. L., Weisfeldt, M. L., Bulkley, B. H. Early dilation of the infarcted segment in acute transmural myocardial infarction: role of infarct expansion in acute left ventricular enlargement. J Am Coll Cardiol. 4, 201-208 (1984).
- Shimizu, I., et al. Excessive cardiac insulin signaling exacerbates systolic dysfunction induced by pressure overload in rodents. J Clin Invest. 120, 1506-1514 (2010).
- Tirziu, D., et al. Myocardial hypertrophy in the absence of external stimuli is induced by angiogenesis in mice. J Clin Invest. 117, 3188-3197 (2007).
- Theilmeier, G., et al. High-density lipoproteins and their constituent, sphingosine-1-phosphate, directly protect the heart against ischemia/reperfusion injury in vivo via the S1P3 lysophospholipid receptor. Circulation. 114, 1403-1409 (2006).
- Weiss, J. L., Frederiksen, J. W., Weisfeldt, M. L. Hemodynamic determinants of the time-course of fall in canine left ventricular pressure. J Clin Invest. 58, 751-760 (1976).
- Bohl, S., et al. Refined approach for quantification of in vivo ischemia-reperfusion injury in the mouse heart. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 297, 2054-2058 (2009).
- Van Craeyveld, E., Jacobs, F., Gordts, S. C., De Geest, B. Low-density lipoprotein receptor gene transfer in hypercholesterolemic mice improves cardiac function after myocardial infarction. Gene Ther. 19, 860-871 (2012).
- Gordts, S. C., et al. Beneficial effects of selective HDL-raising gene transfer on survival, cardiac remodelling and cardiac function after myocardial infarction in mice. Gene Ther. 20, 1053-1061 (2013).
- Junqueira, L. C., Bignolas, G., Brentani, R. R. Picrosirius staining plus polarization microscopy, a specific method for collagen detection in tissue sections. Histochem J. 11, 447-455 (1979).
- Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. Small animal models of heart failure: development of novel therapies, past and present. Circ Heart Fail. 2, 138-144 (2009).
- Zolotareva, A. G., Kogan, M. E. Production of experimental occlusive myocardial infarction in mice. Cor Vasa. 20, 308-314 (1978).
- Michael, L. H., et al. Myocardial ischemia and reperfusion: a murine model. Am J Physiol. 269, 2147-2154 (1995).
- Salto-Tellez, M., et al. Myocardial infarction in the C57BL/6J mouse: a quantifiable and highly reproducible experimental model. Cardiovasc Pathol. 13, 91-97 (2004).
- Fernandez, B., et al. The coronary arteries of the C57BL/6 mouse strains: implications for comparison with mutant models. J Anat. 212, 12-18 (2008).
- Kumar, D., et al. Distinct mouse coronary anatomy and myocardial infarction consequent to ligation. Coron Artery Dis. 16, 41-44 (2005).
- Clauss, S. B., Walker, D. L., Kirby, M. L., Schimel, D., Lo, C. W. Patterning of coronary arteries in wildtype and connexin43 knockout mice. Dev Dyn. 235, 2786-2794 (2006).
- Icardo, J. M., Colvee, E. Origin and course of the coronary arteries in normal mice and in iv/iv mice. J Anat. 199, 473-482 (2001).
- Yoldas, A., Ozmen, E., Ozdemir, V. Macroscopic description of the coronary arteries in Swiss albino mice (Mus musculus). J S Afr Vet Assoc. 81, 247-252 (2010).
- James, T. N., Burch, G. E. Blood supply of the human interventricular septum. Circulation. 17, 391-396 (1958).
- Gao, X. M., Xu, Q., Kiriazis, H., Dart, A. M., Du, X. J. Mouse model of post-infarct ventricular rupture: time course, strain- and gender-dependency, tensile strength, and histopathology. Cardiovasc Res. 65, 469-477 (2005).
- Muthuramu, I., Jacobs, F., Singh, N., Gordts, S. C., De Geest, B. Selective homocysteine lowering gene transfer improves infarct healing, attenuates remodelling, and enhances diastolic function after myocardial infarction in mice. PLoS One. 8, 63710 (2013).
- Eaton, L. W., Weiss, J. L., Bulkley, B. H., Garrison, J. B., Weisfeldt, M. L. Regional cardiac dilatation after acute myocardial infarction: recognition by two-dimensional echocardiography. N Engl J Med. 300, 57-62 (1979).
- Erlebacher, J. A., et al. Late effects of acute infarct dilation on heart size: a two dimensional echocardiographic study. Am J Cardiol. 49, 1120-1126 (1982).
- Schuster, E. H., Bulkley, B. H. Expansion of transmural myocardial infarction: a pathophysiologic factor in cardiac rupture. Circulation. 60, 1532-1538 (1979).
- Jugdutt, B. I., Michorowski, B. L. Role of infarct expansion in rupture of the ventricular septum after acute myocardial infarction: a two-dimensional echocardiographic study. Clin Cardiol. 10, 641-652 (1987).
- Pacher, P., Nagayama, T., Mukhopadhyay, P., Batkai, S., Kass, D. A. Measurement of cardiac function using pressure-volume conductance catheter technique in mice and rats. Nat Protoc. 3, 1422-1434 (2008).
- Vanden Bergh, A., Flameng, W., Herijgers, P. Parameters of ventricular contractility in mice: influence of load and sensitivity to changes in inotropic state. Pflugers Arch. 455, 987-994 (2008).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
심근 경색의 정도는 에반스 블루 / 2,3,5- 트리 페닐 클로라이드 (TTC)을 두 번 염색에 의해 평가 될 수있다. TTC는 NADH (8)의 존재의 다양한 탈수소 효소의 활성에 의한 조직 생활에 깊은 붉은 1,3,5- triphenylformazan로 변환됩니다 산화 환원 표시입니다. (1) 24 시간 이후에 심장의 대표 섹션을 보여줍니다 관상 동맥 좌전 하행의 결찰. 블루 염색 분야는 비 허혈성 / 일반 지역을 나타냅니다. 위험 심근 영역은 관상 동맥 좌전 하행의 결찰에서 원심 침대 관류 내에서 심근 조직으로 정의된다. 부정적인 스테인드 지역 (엷은 적색) 경색 영역을 나타내는 반면, 딥 레드 염색 분야는 허혈성하지만 가능한 지역 (위험 비 경색 영역) 영역을 나타냅니다. 이 모델에서, 위험 비 경색 영역은 일의 영구적 인 성격을 반영하는이 이미지에서 무시할 수 없습니다 볼 수 있습니다관상 동맥 좌전 하행의 전자 결찰. 총 좌심실 벽 영역의 60 % 9,10 - 경색 영역은 일반적으로 50 사이이다. 경색 영역의 진화에 두 개의 구성 요소가 식별되어야한다 : 1) 경색의 3 차원 형상)은 경색 전량 얇고 더 확장 심근 경색 선도 경색 팽창의 결과로 변화하며이있다 상처 수축과 흉터 형성 치유 과정을 반영하는, 감소 할 수있다.
심근 경색은 확장 길이 및 두께 경색 10 시간 코스를 평가함으로써 정량화 할 수있다. 그림 2에 표시됩니다 대표는 시리우스 레드 관상 동맥 좌전 하행의 영구 결찰 후 28 일에 심장의 단면을 스테인드. 이미지가 실질적으로 뻗어있다 경색을 보여줍니다. 단면에,이 확장 absolu의 증가에 대응테 경색 길이 경색 두께의 감소.
입체 형상 및 경색의 볼륨 고려 사항 외에도, 경색 파라미터 해석에 관한 또 다른주의가 고려되어야한다. 가능한 심근 조직 비후도 겪을 것이기 때문에, 그것은 총 좌심실 벽 영역에 비해 경색 부분의 비율은 시간의 함수로서 감소 할 것이 명백하다. 경색 영역의 길이 변화의 평가는 따라서 절대 매개 변수와 관련 매개 변수의 차이에 명확한 통찰력을 필요로한다.
동맥 및 심실 압력 레지스터는도 3에 도시된다. 카테터, 심박수, 최대 수축기 좌심실 압력 최소화 이완기 좌심실 압력 isovolumetric 좌심실 수축 (DP / DT 최대)의 피크 레이트, 단부 안정 해지면 -diastolic 좌심실의 압력, 그리고 tisovolumetric 좌심실 이완 (DP / DT 분)의 그는 최고 속도가 결정된다. isovolumetric 좌심실 압력 하강 (타우)의 시정 와이즈 등. (7)의 방법을 이용하여 정량화된다.
그림 위험과 심근 경색의 크기로 영역 1. 평가 심근 경색 후 일일. 왼쪽에서 이미지는 바로 마음의베이스에 심장 정점에서 이동합니다. 24 시간 관상 좌전 하행의 영구적 결찰 후에, 에반스 블루 염료의 용액을 관류 심근의 체적을 계량하는 대동맥 루스로 주입 하였다. 마음을 CDCl3 이후의 주입에 의해 이완기에 (100 μL, 0.1 N) 체포, 초과 파란색 염료를 씻어 생리 식염수로 플러시를, 5 % 낮은 겔화 온도 아가로 오스에 포함되었다. AFterwards 500 μm의 두께 단면은 HM 650 V 진동 마이크로톰을 사용하여 제조하고, 슬라이스 한 후 37 ° C에서 30 분 동안 등장 성 인산염 완충액 (pH 7.4)를 함유하는 1.5 % 2,3,5- 트리 페닐 테트라 졸륨 클로라이드로 배양 하였다. 이미지는 스테레오 Lumar 12 절 현미경을 사용 하였다. 경색 조직, 위험에 붉은 얼룩이 비 경색 영역 및 블루 스테인드 비 허혈성 건강한 심실 벽 영역의 부정적인 오염 된 곳은 이미지 J 소프트웨어를 사용하여 정량화 하였다. 스케일 바는 0.5 mm를 나타냅니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 2. 대표 시리우스 레드 관상 동맥 좌전 하행의 결찰 후 28 일에 심장의 단면을 스테인드. IMAG을왼쪽에서 ES는 바로 마음의베이스에 심장 정점에서 이동합니다. Junqueira 등. (11)의 표준 프로토콜은 시리우스 레드 염색을 위해 적용되었다. 이 조직 화학적 방법은 섬유 성 경색 조직 어두운 빨간색과 건강한 조직 오렌지 얼룩. 스케일 바 1mm를 나타냅니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
정상 마우스의 카테터 삽입 후의도 3 동맥 (A)와 좌심실 (B) 압력 레지스터. 동맥 신호 및 심실 신호 사이의 분명한 차이점은 후자 신호 이완기 약 0mm에 Hg로 떨어진다는 것이다. LVP : 좌심실의 압력.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
심근 구조 및 기능의 변화는 만성 심부전에 좌심실 기능 장애의 개발, 진행은 여러 뮤린 모델 (12)에 조사 될 수있다. 심장 리모델링 및 기능 장애는 심근 손상에 의해 유발 또는 압력에 의해 대동맥 수축을 횡단하는 보조 과부하, 또는 팽창 심근 병증 (12)의 유전 적 모델에서 조사 할 수있다 할 수있다. 물론, 쥐 모델의 가장 뚜렷한 장점은 형질 전환 및 세포 형 특정 및 유도 유전자 변형 모델을 포함하여 녹아웃 균주의 큰 숫자의 가용성이다. 이러한 모델에서 심장 리모델링 평가 크게 압력 볼륨 루프 분석 용 초 고분해능 2D- 및 3D-심장 초음파, 마이크로 자기 공명 영상, micromanometry를 사용 혈역학 평가, micromanometer 컨덕턴스 기술 같은 기술의 개발에 의해 촉진되었다. 이 보고서에서, 우리는 모드에 초점을 맞추고있다심근 손상의 엘 좌심실 micromanometry에 의해 관상 동맥 및 좌심실 기능의 평가 좌전 하행의 영구 결찰에 의해 유도.
심근 경색의 첫 번째 쥐 모델은 Zolotareva 등 알 (13)에 의해 1978 년에 설명했다. 영구 폐쇄의이 모델은 분명히 최초의 마이클 등 알 (14)에 의해 설명 된 관상 동맥 좌전 하행의 과도 폐색의 쥐 모델에서 식별되어야한다. 이 후자의 모델은 영구 결찰이 심근 경색 심장 리모델링의 병태 생리를 연구하기 위해 적용되는 반면, 허혈 - 재관류 손상과 심근 회수를 조사하는 데 사용됩니다.
마우스의 심장 동맥 트리 인간에 비해 15-17 다르다. 마우스의 중격 관상 동맥 기원 15-17에서 변수입니다. 그것은 우 관상 AR의 지점으로 고전 발생18, 19를 떨뿐만 아니라, 또는 예외적으로 왼쪽 관상 동맥 16 발 살바 (17)의 오른쪽 동에 별도의 질구에서 발생할 수 있습니다. 관상 동맥 나무의 해부학은 약간 다른 균주 (20) 사이에 다를 수 있습니다. 그러나, 전 외측, 후방 및 조직 학적으로 증명하고 15, 17을 심 초음파 검사로 심장의 혀끝의 영역을 포함하는 재생 가능한 대형 경색의 왼쪽 귓바퀴 결과 바로 아래에 나온다으로 관상 동맥 좌전 하행의 결찰. 중요하게는, 격막이 별개 중격 관상 동맥의 존재를 반영 경색, 없앤다. 마우스와 대조적으로, 인간의 격벽의 혈액 공급은 주로 관상 동맥 (21) 좌전 하행의 지점에 의해 제공된다. 해부학의 차이와 마우스의 격막의 결과 스페어 링은 심장의 리모델링에 영향을 미칠 것입니다.
결과에 명시된 바와 같이S 부, 마우스에서 관상 좌전 하행 결찰 좌심실 9,10의 50 % 내지 60 %를 포함하는 큰 심근 경색을 유도한다. 마우스에서 심근 경색 후 첫 2 주 심실 파열의 발생은 22, 23 빈번한이다. 심근 경색이 합병증 변형 의존과 여성의 쥐 (22)에 비해 남성 쥐에서 훨씬 더 자주 발생합니다. 또한, 심실 파열 normocholesterolemia 9의 조건에서보다 콜레스테롤 혈증 쥐에서 더 자주 발생합니다. 마우스에서 심실 파열의 발생이 오른쪽 측면에 배치해야합니다. 우선, 이러한 합병증은 경색 팽창 표현이다. 경색 세그먼트의 불균형이 얇아 팽창뿐만 아니라 심근 파열을 유도뿐만 아니라 심장 리모델링 및 울혈 성 심부전 24-27에 대한 트리거입니다. 따라서 심근 파열 주파수는경색 확장의 정도 및 따라서 생존 마우스의 심장 리모델링과 심장 기능 장애의 개발의 정도의 지표.
심실 파열에 관한 두 번째 중요한 고려 사항은 기능 또는 구조 데이터가 중재 연구 (10)에서 두 그룹을 비교하면 계정에 생존 바이어스를 취할 필요성이 바로 여기에있는 것이다. 이 심실 파열에 굴복 할 가장 두드러 경색 확장을 그 쥐를 가정하는 것이 합리적이다. 두 군간의 생존율의 차이 인 경우, 하나의 마우스는 기능적 또는 구조적 분석에서 제외 죽었다 알고 있어야한다. 따라서, 바이어스는 특정 시간 시점에서 생존 한 쥐의 비교에 도입된다.
상술 한 바와 같이, 많은 다른 기술은 심근 경색 후의 심 리모델링을 평가 가능하다. 그러나 첨단 복합 기술의 가용성여러 연구자에 대한 제한 될 수 있습니다. 경동맥을 통해 도입 micromanometer 압력 센서를 이용하여 혈역학 평가는 비교적 간단하고 다른 기술보다 훨씬 덜 비싸다. 그러나, 좌심실 micromanometry의 해석에 본질적인 한계가 있음을 강조한다. 대조적으로, 좌심실 압력 - 부피 관계의 분석 (예, 컨덕턴스 micromanometry를 사용)을 28 그대로 심장 기능을 평가하는 가장 엄격하고 포괄적 인 접근을 구성한다. 심장 기능을 측정하는 압력 볼륨 방법의 고유 한 이점은 독립적으로 로딩 조건 및 심박수 (29)의 좌심실의보다 구체적인 성능 측정을 가능하게한다는 것이다.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Buprenorphine (Buprenex) | Bedford Laboratories | ||
| Sodium Pentobarbital (Nembutal) | Ceva | ||
| Betadine | VWR internationals | 200065-400 | |
| 5 - 0 silk suture | Ethicon, Johnson & Johnson Medical | K890H | |
| 6 - 0 prolene suture | Ethicon, Johnson & Johnson Medical | F1832 | |
| 6 - 0 Ti- Cron suture | Ethicon, Johnson & Johnson Medical | F1823 | |
| Urethane | Sigma | 94300 | |
| Alconox | Alconox Inc. | ||
| Ventilator, MiniVent Model 845 | Hugo Sachs | 73-0043 | |
| Chest retractor or Thorax retractor | Kent Scientific corporation | INS600240 | ALM Self-retaining, serrated, 7 cm long, 4 x 4 "L" shaped prongs, 3 mm x 3 mm |
| 1.0 French Millar pressure catheter | Millar Instruments | SPR - 1000/NR | |
| Powerlab | ADInstruments Pty Ltd. | ||
| LabChart® software | ADInstruments Pty Ltd. | ||
| Rectal probe | ADInstruments Pty Ltd. |
