Un modèle à thorax fermé pour induire la Constriction de l’aorte transversale chez les souris
Summary
Nous présentons ici un protocole de constriction transversal aortique (TAC) par une thoracotomie latérale. Cette technique est une intervention chirurgicale thoracique minimalement invasive, fermé visant à simuler une surcharge de pression et l’insuffisance cardiaque chez les souris en utilisant des paramètres standard de laboratoire de TAC.
Abstract
Recherche sur l’hypertrophie cardiaque et insuffisance cardiaque repose souvent sur des modèles de souris de surcharge de pression induites par le TAC. La procédure standard consiste à effectuer une thoracotomie partielle afin de visualiser le grand arc aortique. Cependant, le traumatisme chirurgical, due à la thoracotomie à thorax ouvert modèles remplace la physiologie respiratoire car les côtes sont disséqués et laissés seules après la fermeture de la poitrine. Pour éviter cela, nous avons établi une approche de coffre mini-invasive, fermée par thoracotomie latérale. Ci-après nous approchons la crosse aortique par l’intermédiaire de l’espace intercostal 2nd sans entrer dans les cavités thoracique, laissant la souris avec un traumatisme moins pour récupérer à partir. Nous effectuons cette opération en utilisant les paramètres de laboratoire standard pour les procédures de thorax ouvert TAC avec des taux de survie égale. En dehors de maintien des patterns de respiration physiologique due à l’approche de thorax fermé, les souris semblent profiter en montrant une restauration rapide, comme la technique moins invasive apparaît pour faciliter un processus de guérison rapide et pour réduire la réponse immunitaire après un traumatisme.
Introduction
Modèles de souris sont souvent utilisés pour simuler des maladies humaines1. Rétrécissement aortique transversal (TAC) est utilisé pour induire une surcharge de pression et l’hypertrophie ventriculaire gauche2. Le modèle de TAC thorax ouvert chez la souris a été validé par Rockman et al. 3 et l’intervention chirurgicale est décrite en détail par Delisle et al. 4. baguage de l’aorte transverse est plus favorable en comparaison de la constriction de l’aorte abdominale, car une grande partie de la circulation peut compenser les effets négatifs de cette dernière procédure2.
Le cerclage de l’aorte transversale mène à une augmentation de la pression artérielle dans l’aorte ascendante et l’artère brachiocéphalique mais laisse suffisamment perfusion des organes par l’intermédiaire des vaisseaux distaux (c.-à-d. l’artère carotide commune gauche, la sous-clavière gauche artère et l’aorte descendante). Cela conduit à une augmentation de la postcharge cardiaque et un stress de la paroi cardiaque élevé. La tension pariétale diminue par la suite en raison de l’ épaississement de fibre5. La variation hémodynamique cardiaque chronique entraîne Erreurs d’adaptation et une dilatation du ventricule gauche. De cette façon le TAC crée un modèle reproductible de l’hypertrophie cardiaque aboutissant à une insuffisance cardiaque.
La procédure normalisée pour TAC tel que décrit par DeAlmeide et al. 4 approches de la crosse aortique par une thoracotomie supérieure partielle par dissection des côtes ou du sternum et entrant dans le médiastin ainsi que la cavité pleurale. Cela permet une bonne vue de l’aorte et ses branches latérales. Malheureusement, les côtes découpées ne peut pas être remis en place, qui leur laisse flotter librement et altérant ainsi la dynamique de la respiration.
Nous avons, a donc établi une approche mini-invasive à thorax fermé la crosse aortique en utilisant une approche chirurgicale latérale via l’espace intercostal 2nd . Le plus grand avantage de ce modèle est la capacité d’exécuter des TAC sans même couper à travers les côtes. Le traumatisme chirurgical se limite à l’incision de la peau et la dissection des muscles intercostaux. Cette procédure réduit le traumatisme lui-même et contribue à maintenir la stabilité de la poitrine adéquate.
Ici, nous décrivons une procédure détaillée étape par étape pour effectuer la chirurgie TAC chez les souris sans effectuer le total ou la thoracotomie supérieure. Haute fréquence Doppler a été utilisée pour assurer le succès de la TAC comme décrit précédemment, 6,7.
Protocol
Representative Results
Discussion
L’apparition rapide de l’hypertension en raison de la TAC diffère cliniquement pertinente hypertrophie causée par une sténose aortique ou hypertension. Néanmoins, l’utilisation des petits modèles animaux pour induire une insuffisance cardiaque présente de nombreux avantages et est, par conséquent, choisie par de nombreux enquêteurs11. Ce coffre fermé-modèle améliore les modèles déjà existants de la technique chirurgicale pour induire la constriction de l’aorte transversale en…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Nous remercions Stilla Frede et Susanne Schulz pour leur assistance technique. Cette étude a reçu aucun financement.
Materials
| Pressure-volume catheter | Millar Instruments, USA | SPR-839 | |
| Mouse ventilator | Harvard Apparatus GmbH, Germany | Minivent – TYPE 845 | |
| Mouse ventilator | Harvard Apparatus GmbH, Germany | Y-connection with intubation cannula OD 1.2mm 73-2844 | |
| Vaporizer | Dräger Medical AG&CO.KG, Germany | 19.3 Isofluran-Vaporizer (a newer version is available under catalog number D-877-2010) | |
| Microscope | Leica Microsystems, Germany | MZ 7.5 | |
| Light source | Schott AG, Germany | KL 1500 LCD | |
| 6-0 Prolene | Ethicon, USA | Polypropylene suture BV-1 9.3 mm 3/8c | suture for surgery |
| Seraflex | Serag Wiessner, Germany | USP 5/0 schwarz; IC108000 | suture for constriction |
| Homoeothermic Controlled Operating Tables | Harvard Apparatus GmbH, Germany | Typ 872/3 HT with tripod stand and homoeothermic controller Type 874; 73-4233 | |
| Flexible Rectal Probe | Harvard Apparatus GmbH, Germany | 1.6 mm OD; 55-7021 | |
| Doppler Signal Visualisation Instrument | Indus Instruments, USA | Doppler Signal Processing Workstation (DSWP) with 20MHz Pulsed Doppler Module | |
| Doppler Probe | Indus Instruments, USA | 20MHz Tubing-mounted Probe |
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