식물 감염 테스트: 스프레이 식물 병원 체 Magnaporthe Grisea 와 상처-중재 접종
Summary
여기, 우리 식물 병원 체와 식물 독성 테스트 프로토콜을 제시 Magnaporthe grisea. 이 보고서 균 분리의 pathotypes의 대규모 검열을 하 고 분자 번 식 하는 동안 식물의 저항 메커니즘을 이해 하기 위한 훌륭한 시작 지점으로 제공.
Abstract
식물 병원 성 곰 팡이 의해 잠재적인 위협 으로부터 방어 하는 강력한 시스템을가지고 있습니다. 그러나 농업으로 중요 한 식물에 대 한, 현재 조치 같은 병원 체에 대처 하기 위해 너무 보수적인 증명 그리고, 따라서, 충분 하지 효과적인, 그리고 그들은 수 있습니다 잠재적으로 포즈 환경 위험. 따라서, 그것은 매우 내성 germplasm의 식별, 격리 및 저항 유전자의 특성 및 분자 사육을 통해 자연스럽 게 제어 식물 질병을 호스트 저항 요소를 식별 하는 데 필요한 저항 하는 재배 품 정. 이와 관련, 번 식 하 고 식물 저항 유전자를 개발, 신속, 정확 하 고 대규모 접종 메서드를 설정할 필요가 있다. 쌀 버섯 모양 병원 체 Magnaporthe grisea 원인 심각한 질병 증상을 폭발 하 고 손실을 항복. 최근에, M. grisea 식물 곰 팡이 병원 체 상호 작용의 메커니즘을 공부에 대 한 모델 생물으로 떠오르고 있다. 따라서, 우리 보고 M. grisea위해 특정 식물 독성 시험 방법의 개발. 이 메서드는 conidial 현 탁 액을 분무 접종 및 균 사체 큐브 또는 conidial 서 스 펜 션의 방울 부상 접종에 대 한 제공합니다. 분리 된 쌀 잎 부상 접종 방법의 주요 단계는 호스트 침투 저항으로 인 한 간섭 방지 식물 잎에 상처를 만드는 것입니다. 이 M. grisea 격리의 pathotypes의, 정확, 신속 하 고 대규모 심사에 기여 스프레이/부상 프로토콜. 이 통합 하 고 체계적인 식물 감염 방법 식물 병리학에서 문제의 광범위 한 관점을 확보에 대 한 훌륭한 출발점 될 것입니다.
Introduction
쌀 폭발, M. grisea를 기인한 쌀 품종 전세계1,2에 대 한 가장 심각한 질병 중 하나입니다. 프로세스는 M. grisea 감염 호스트 식물 conidia 생산 및 표면 부착, conidia 발 아 및 appressorium 형성, 침투 못 감염 hypha 차별화의 형성을 포함 하 고 질병 확산 3. 이러한 모든 단계는 많은 다른 식물 병원 성 곰 팡이에서 일반적이 고, 실제로, 모든 단일 단계 봉쇄 호스트 식물의 감염을 방지. 때문에 그것의 경제 중요성 및 유전 추적성, M. grisea 식물 곰 팡이 병원 체 상호 작용1,4의 메커니즘을 공부에 대 한 모델 생물으로 떠오르고 있다. 따라서, 기본 균 pathogenicity 및 심사 및 디자인 소설 후보 대상 유전자의 식별 분자 메커니즘을 명료 하 도움이 될 것입니다 이러한 발달 단계 M. grisea 에 분자 기초 공부 살 균 제5.
최근 보고서 M. grisea 감염에 관한 사전 침투 단계, 특히에서 conidiation, appressorium 형성, 침투 못 및 전염 성 성장3, 의 분자 메커니즘에 초점을 맞춘합니다 6. 따라서, M. grisea 감염 테스트 상세한 프로토콜을 개발 하는 것이 필수적입니다. 여기, 우리 conidial 서 스 펜 션와 M. grisea의 사체 플러그와 상처의 접종 감염 스프레이 중재 분석을 활용 한 감염 테스트에 대 한 자세한 방법 제시. 이 보고서는 프로토콜, conidiation 솔루션의 준비와 바로 플러그 중재 접종 M. grisea와 식물의 종자, 문화에 중점을 둡니다. 다음이 단계는 아래의 세부 사항 그리고 방법의 전체 워크플로 보여주는 회로도 보기에 설명 하 고 전형적인 병 변은 각각 그림 1 과 2에 표시 됩니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
식물 질병 저항 유전자 곰 팡이 병원 균1,12를 포함 하 여, 병원 균에 의해 감염 방지에 필수적인 역할을 재생 합니다. 쌀 폭발 병원 체 인구 구조의 특성을 이해 하 고 식물 저항 유전자4를 식별 하는 모델로 사용 되었습니다. 따라서, 그것은 질병 저항 유전자를 지속적으로 재배 될 수 있는 질병 저항 식물을 식별 하는 농업 식물의 주요 …
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 작품은 베이징 농업 대학 (YQ201603)의 특별 한 과학 연구 프로젝트와 베이징 교육 위원회 (KM201610020005)의 과학 프로젝트에 의해 지원 되었다.
Materials
| Agar | AOBOX Biotechnology（China） | 01-023 | |
| Filter paper | GE Healthcare brand(Sweden) | 10311387 | |
| 50-mL tube | CORNING(Amercia) | 430290 | |
| Centrifuge | Eppendorf(Amercia) | 5804R | |
| Tween-20 | Coolaber（China） | CT11551-100ml | |
| Culture dish | Thermofisher(Amercia) | 150326 | |
| 0.5-5 mL pipette | Eppendorf | 4920000105 | |
| 100-1000uL pipette | Eppendorf | 4920000083 | |
| Vacuum pump | Leybold | D25B | |
| Dissection needle | FST | 26000-35 | |
| Incubator | MEMMERT | PYX313 | |
| Inoculation ring | Greiner Bio One | 731175 |
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