Summary

1-anastomose Bypass gástrico (OAGB) em ratos

Published: November 10, 2018
doi:

Summary

Este protocolo é para o desempenho de uma anastomose bypass gástrico (OAGB) em ratos. O operador executa uma bolsa gástrica longa e tubular-grampeado, seguida por anastomose costurado à mão. Para este modelo, o operador reproduz a mesma relação entre biliopancreatic e membro comum em seres humanos; Portanto, o membro biliopancreatic mede 35 cm.

Abstract

O objetivo do presente protocolo é a elaboração de um modelo pré-clínicos de cirurgia bariátrica e, mais especificamente, OAGB em ratos obesos. Com base neste modelo pré-clínico, estudos longitudinais podem ser realizados para fornecer uma melhor compreensão dos mecanismos subjacentes os resultados vistos após a cirurgia bariátrica em seres humanos. Para este efeito, ratos são operados através de uma laparotomia sob anestesia geral com isoflurano. Primeiro, o cirurgião cria uma bolsa gástrica longa e tubular: após a curva maior e dissecação de hérnia, nonglandular estômago é grampeado e removido. Em seguida, o restante do estômago também é grampeado a fim de criar um tubo gástrico e excluir o antro do estômago. Depois disso, o cirurgião realiza um único fim-a-lado gastrojejunostomy 35 cm do ângulo duodenojejunal. Este comprimento de membro foi escolhido a fim de reproduzir a mesma proporção entre o membro biliopancreatic (BPL) e o comprimento comum de membro (CL) como em cirurgia bariátrica humana. A operação termina por encerramento aponeurótico e cutâneo. A gestão no pós-operatório precoce consiste em hidratação subcutânea, uma injeção intramuscular de antibiótica profilática, uma parietal injeção de xilocaína, a administração de analgésicos e uma progressiva reintrodução da dieta.

Introduction

Obesidade mórbida é um problema de saúde principais no mundo ocidental, com o aumento da prevalência de1. Cirurgia bariátrica continua a ser a terapia eficaz somente a longo prazo para obesidade mórbida2, com claros benefícios na obesidade comorbidades3. Roux-en-Y gastric bypass (RYGB) permanece o padrão ouro como é um dos procedimentos mais antigos e um da maioria realizadas em todo o mundo com o maior seguimento4. OAGB é um procedimento mais recente, descrita pela primeira vez em 2001 por Rutledge5. Ele tem sido descrito como uma alternativa eficaz para RYGB6 e tem algumas vantagens. Dados iniciais indicam uma eficácia semelhante para RYGB no que diz respeito a perda de peso e a resolução das comorbidades relacionadas à obesidade6,7. Além disso, os riscos de estenose ou vazamento de anastomose jejunojejunal no RYGB é evitado, e o risco de uma hérnia interna pode ser inferior com RYGB8.

Os mecanismos fisiológicos subjacentes a perda de peso após cirurgia bariátrica permanecem controversos e podem ser difíceis de estudar em seres humanos9. Modelos animais são úteis para entender como a bariátrica cirurgias podem afetar o metabolismo da glicose, alterações neuroendócrinas ou mecanismos de saciedade. Faltam dados comparativos entre os procedimentos e efeitos a longo prazo estas cirurgias precisam ser melhor compreendidos10. Não é possível padronizar totalmente atendimento clínico pré e pós-operatório, e acompanhamento satisfatório pode ser difícil de conseguir: alguns estudos relatório perda-para-seguem-se as taxas tão alto quanto 30% para o primeiro ano11.

O conceito de bypass gástrico é uma combinação de um procedimento restritivo, devido à criação de uma bolsa gástrica e um grau moderado de má absorção, resultante a exclusão do duodeno e o jejuno proximal da trânsito gastrointestinal. Atualmente, o comprimento do membro em cirurgia bariátrica ainda é uma questão de debate12,13. Os dados disponíveis mostram que uma alta variabilidade de procedimentos e nenhum consenso foi alcançada ainda o comprimento do membro ideal para OAGB14,15. No entanto, muitos autores têm relatado um comprimento de 200 cm BPL como o padrão para OAGB16,17,18. O comprimento do intestino é cerca de 700 cm19.

Foram desenvolvidos vários modelos de roedores de RYGB no mundo20, com grandes variações em termos de tamanho de bolsa, comprimento dos membros e a preservação do nervo vagal. Mas muito poucos autores relataram um modelo de OAGB experimental; por esta razão, theresearch equipe desenvolveu um modelo de OAGB em colaboração com cirurgiões bariátricos. A lógica por trás do desenvolvimento do modelo foi para imitar o bypass gástrico, praticado em seres humanos. O modelo incorpora a construção de uma bolsa gástrica com a exclusão do antro e do corpo do estômago. Por isso, o cirurgião faz uma ablação do estômago nonglandular usando um dispositivo de grampeamento. Comparado ao protocolo anterior20, a equipe decidida adicionar uma antibioterapia profiláctica per-operatório, a fim de diminuir a morbidade ligados a anastomose gastrointestinal, como é a rotina em cirurgia humana21.

O comprimento do membro de rato usado neste modelo foi escolhido para reproduzir a proporção entre o BPL e CL em humanos. Medições preliminares mostraram o comprimento total de intestino em ratos para ser entre 90 e 120 cm22. Consequentemente, o comprimento da BPL escolhido para OAGB foi 35 cm. Além disso, este modelo é possível sem fazer qualquer ligadura vascular, evitando a isquemia bolsa gástrica.

Protocol

Uso de todos os animais em conformidade com as directrizes da Comunidade Europeia e foi aprovado pelo Comitê de ética local (Comitê d’éthique en expérimentation animale N ° 121) e o Ministério do ensino superior e pesquisa (Ref #02285.03). 1. os animais e dietas Ratos Use ratos Wistar machos, pesando 260-320 g, começado uma dieta hiperlipídica (HFD) em 7 semanas de idade. Dieta Induzi uma obesidad…

Representative Results

Este protocolo é reprodutível e imita OAGB como praticado em humanos. A segurança do presente protocolo é suportada com dados publicados23,24 , com baixa mortalidade entre 12% e 25%. Diferentes cirurgiões na equipe de pesquisa, com uma taxa de mortalidade semelhantes têm praticado este protocolo. Não obstante, cirurgia do roedor de aprendizagem é complexa, e o us…

Discussion

Este protocolo tem a vantagem de imitando OAGB praticada rotineiramente em seres humanos. Sua segurança e reprodutibilidade em ratos foram demonstrados em resultados clínicos e metabólicos.

A anastomose neste protocolo coloca uma dificuldade técnica e é o principal passo crítico. Por isso, é necessário usar ferramentas microcirúrgicos específicas, como uma porta-agulha-microcirurgia ou lupas. Para poder realizar uma anastomose hermético sem qualquer estenose, é necessário realizar…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Os autores gostaria de agradecer Jean Pierre Marmuse por sua constante ajuda e apoio; Eglantine Voitellier, Jean-Baptiste Yan e Houneyda El Jindi para configurar os modelos e as ilustrações; Anne-Charlotte Jarry e Andreia Goncalves por sua ajuda com os vídeos; Sara J. Zaat para a edição do texto em inglês. Matthieu A. Siebert e Lara Ribeiro-Parenti foram destinatários dos patrocínios da Fondation pour la Recherche médicale (FRM) e a Association française de chirurgie (AFC).

Materials

High-Fat Diet, 45 % fat  Genestil, Royaucourt, France C 1090-45 http://www.genestil.com/
Metzenbaum Scissors World Precision instrument, Sarasota, US 501739 https://www.wpi-europe.com
Dumont Tweezers World Precision instrument, Sarasota, US 14098 https://www.wpi-europe.com
Iris Forceps World Precision instrument, Sarasota, US 15915 https://www.wpi-europe.com
Iris Scissors 10cm World Precision instrument, Sarasota, US 14218 https://www.wpi-europe.com
Needle Holder World Precision instrument, Sarasota, US 14110 https://www.wpi-europe.com
Alm Self Retaining Retractor World Precision instrument, Sarasota, US 14240 https://www.wpi-europe.com
Baby Mixter Hemostatic Forceps,  Right Angle World Precision instrument, Sarasota, US 501240 https://www.wpi-europe.com
Non woven sterile swabs LCH Medical Products, Paris, France SN40-0755 www.lch-medical.com
Galilean Binocular Loupe 2.5x World Precision instrument, Sarasota, US 504056 https://www.wpi-europe.com
Digestive thread: Isotactic polypropylene, monofil Prolene 7-0  Ethicon, Issy les  Moulineaux, France EH7813E www.ethicon.com
Parietal thread : Coated Braided Polyester Ti-Cron 2-0 Covidien, Mannsfield, MA, USA 3003-52 www.covidien.com
Cutaneous thread : Polyglactin, VICRYL RAPIDE 4-0  Ethicon, Issy les  Moulineaux, France VR3100 www.ethicon.com
ETS-Flex 35- mm staple gun Ethicon, Issy les  Moulineaux, France ATS45 www.ethicon.com
Proximate Reloadable Staplers Ethicon, Issy les  Moulineaux, France XR30V www.ethicon.com
TA-DST 30mm-3.5mm Ethicon, Issy les  Moulineaux, France TX30B www.ethicon.com
Alcoholic 5% Betadine MEDA Pharma, Merignac, France 41085 www.medapharma.fr
LIDOCAINE AGUETTANT 20 mg/ml LABORATOIRE AGUETTANT, Lyon, France 3400940000000.0 https://www.aguettant.fr
Penicillin G 5MUI Panpharma, Luitre, France 3.40E+12 https://www.panpharma.eu/fr
Bionolyte G5 ; Sodium chloride 0.4%, glucose 5%, potassium chloride 0.2%) Baxter, Maurepas, France
Liquid diet Genestil, Royaucourt, France C-0200T http://www.genestil.com/
Isoflurane 100% Centravet, Plancoet, France ISO007 http://cooperative.centravet.net

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Citer Cet Article
Siebert, M. A., Chevallier, J., D’Aurelle de Paladines, D., Pottier, Y., Msika, S., Le Gall, M., Bado, A., Ribeiro-Parenti, L. One-anastomosis Gastric Bypass (OAGB) in Rats. J. Vis. Exp. (141), e58776, doi:10.3791/58776 (2018).

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