Методы бешенства некропсии у больших и малых животных
Summary
Целью этого протокола является демонстрация безопасных методов некропсии у мелких и крупных животных для получения удовлетворительных образцов тканей для тестирования на бешенство.
Abstract
Лаборатория по борьбе с бешенством штата Нью-йорк (NYSDOH) ежегодно получает от 6000 до 9000 образцов и проводит тестирование на бешенство для всего штата, за исключением Нью-йорка. Лаборатория бешенства некропсии различных животных, начиная от летучих мышей до bovids. Большинство из этих образцов животных, демонстрирующих неврологические признаки, однако, менее 10% на самом деле положительный результат теста на бешенство; подразумевая травмы, поражения или других инфекционных агентов в качестве причины этих симптомов. Из-за риска аэрозольных недиагностированных инфекционных агентов, Лаборатория бешенства не использует электроинструменты или пилы. Для животных, чьи черепа непроницаемы ножницами, будут представлены три методы некропсии. Лаборатория внедрила эти методы для уменьшения потенциального воздействия инфекционных агентов, устранения ненужных манипуляций с образцом и сокращения времени обработки. Преимущества предпочтительной техники, противоположной другой, зависят от обученной индивидуальной обработки образца.
Introduction
Работа на полу некропсии в лаборатории бешенства по своей сути опасна. Временами, образцы прибывают со встроенными иголками дикобраза, посторонними предметами, включая стрелы/пули/гранулы или открытые костные осколки, которые могут проникать в защитную обертку для доставки. Неправильная упаковка может привести к утечке, подвергая опасности людей, которые распаковывают образцы. В дополнение к физическим травмам, специалисты по некропсии рискуют подвергаться воздействию неизвестных зоонозных инфекционных агентов из ЦНС и жидкостей организма образцов. Кроме того, эктопаразиты, переносимые образцом, могут передавать другие зоонозные заболевания, так как блохи и клещи обычно встречаются на представленных животных. В зависимости от географического положения и видов, связанных с болезнями подвергаются варьироваться. Арбовирусы, такие как вирус восточного конского энцефалита (EEEV) или вирус Западного Нила (WNV), клещевые заболевания, включая болезнь Лайма или туляремию, бактерии, вызывающие лихорадку или туберкулез, и инфекционные прионы называют небольшое количество возможных опасностей1 , 2 , 3.
Целью этих методов является демонстрация безопасных и эффективных методов некропсии с использованием инструментов, которые сводят к минимуму потенциал для аэрозолизации в отличие от электроинструментов или пил4,5. Как правило, некропсия мелких животных в лаборатории бешенства требует отрезать черепные мышцы и с помощью молотка и стамески, чтобы открыть каудальной царской части кальвария6. Удаление этой области кальвария подвергает задний мозг, в том числе весь мозжечок и черепного ствола мозга. Модифицированные методы некропсии могут быть выполнены на брюшной части черепа, избегая больших мышц черепа и более толстых областей черепа. Однако эти модифицированные методы некропсии возможны только тогда, когда образец без шейных позвонков.
Аналогичным образом, ткани мозга у крупных животных могут быть удалены путем разделения черепных мышц и открытия caudal царской части черепа7. Значительные усилия, необходимые для разоблачения мозжечка и ствола мозга, как черепа крупных животных, как правило, толще. Чтобы не проникать в череп, голова большого животного расположена таким образом, что вентро-каудаальная часть черепа обращена к технику. Используя модифицированные инструменты, мозжечок и ствол мозга удаляются через foramen magnum. Это похоже на метод приобретения образцов, рекомендованный Справочной лабораторией Европейского союза TSE для трансмиссивной спонгиформной энцефалопатии (TSE) исследований8. Черепные позвонки должны быть удалены заранее, чтобы обеспечить доступ к foramen magnum.
Применение этих методов полезно для надлежащим образом обученных техников в лабораториях по борьбе с бешенством. Как бешенство лаборатория получает образцы различных размеров, от несовершеннолетних летучих мышей для взрослых лошадей проекта9, техник имеет несколько методов на выбор на основе индивидуальных обстоятельств. Метод, продемонстрированный для большого животного, также подходит для ветеринаров, которые выполняют некропсии в полевых условиях, так как доставка всей большой головке животного для тестирования на бешенство является громоздким и дорогостоящим. Внедрение любого из этих методов повысит безопасность за счет уменьшения потенциала производства аэрозолей, сокращения обработки образца и экономии времени на обработку. Однако, поскольку поле не имеет тех же преимуществ, что и лабораторное оборудование для тестирования на бешенство, важно, чтобы любые изменения, внесенные в эти процедуры, были направлены на безопасность, особенно на использование средств индивидуальной защиты (СИЗ).
Protocol
Representative Results
Discussion
Specimens, представленные для некропсии бешенства часто имеют историю клинических признаков, совместимых с неврологическим заболеванием. Наличие клинических заболеваний может быть связано с различными нарушениями, в том числе зоонозными заболеваниями, повышая риск для сотрудников лабор…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Мы признательны Центру Уодсвортского департамента здравоохранения штата Нью-йорк за поддержку этого проекта. Мы также хотели бы отметить поддержку Эми Уиллси и Фрэнк Айсделл Департамента здравоохранения Уодсворт центр, и LL ранчо, Altamont, NY.
Materials
| Chemistry spoon | Any | ||
| Curved, sharp-blunt mayo scissors | Sklar | 14-2055 | Sklar Operating Scissors 5-1/2 Inch Premium OR Grade Stainless Steel Finger Ring Handle Curved Sharp/Blunt |
| Large sharp restaurant-quality carving knife | Dexter | P94848 | 8" Scalloped Utility Knife, white handle |
| Locking tumor-tenacula | Diamond Scientific and Surgicals | N/A | Czerny Tenaculum Forcep |
| Modified stiletto knife (6.5 inch long blade carving knife ground to 0.5 inch wide) | Dexter | P94848 | Modified 8" Scalloped Utility Knife, white handle |
| Orthopedic mallet-hammer | Mortech | N/A | Postmortem hammer with hook |
| Sharp councilman orthopedic bone chisel | Shandon | 60-5 | Councilman's Chisel Blade: 2 in x 2.25 in standard 7 in |
| Sharpened tablespoon or other long handled spoon | Any | ||
| Smooth-tipped tissue dressing forceps without teeth | Shandon | 63-03 | Shandon Broad Point Dressing Thumb Forceps |
| Powder-free non-latex gloves | Any | ||
| Safety glasses, goggles, or faceshield | Any | ||
| Surgery or N-95 mask | Any | ||
| Kraft paper, butcher paper, absorbent pad, etc | Any |
References
- Centers for Disease Control and Prevention (CDC). West Nile virus activity – United States, 2009. MMWR Morbidity and Mortality Weekly Report. 59 (25), 769-772 (2010).
- McDaniel, C. J., Cardwell, D. M., Moeller, R. B., Gray, G. C. Humans and cattle: A review of bovine zoonoses. Vector Borne and Zoonotic Diseases. 14 (1), 1-19 (2014).
- Zoonotic diseases. Merck Veterinary Manual Available from: https://www.merckvetmanual.com/public-health/zoonoses/zoonotic-diseases (2019)
- Wenner, L., Pauli, U., Summermatter, K., Gantenbein, H., Vidondo, B., Posthaus, H. Aerosol generation during bone-sawing procedures in veterinary autopsies. Veterinary Pathology. 54 (3), 425-436 (2017).
- Green, F. H. Y., Yoshida, K. Characteristics of aerosols generated during autopsy procedures and their potential role as carriers of infectious agents. Applied Occupational and Environmental Hygiene. 5 (12), 853-858 (1990).
- Barrat, J., Meslin, F. X., Kaplan, M. M., Koprowski, H. Simple technique for the collection and shipment of brain specimens for rabies diagnosis. Laboratory techniques in Rabies 4th Edition. , 425-427 (1996).
- Ness, S. L., Bain, F. T. How to perform an equine field necropsy. American Association of Equine Practitioners. 55, 313-316 (2009).
- . Sample requirements for TSE testing and confirmation – EURL guidance Available from: https://science.vla.gov.uk/tse-lab-net/documents/tse-oie-rl-samp.pdf (2019)
- . Rabies reports Available from: https://www.wadsworth.org/programs/id/rabies/reports (2019)
- . Protocol for postmortem diagnosis of rabies in animals by direct fluorescent antibody testing: A minimum standard for rabies diagnosis in the United States Available from: https://www.cdc.gov/rabies/pdf/rabiesdfaspv2.pdf (2019)
- Miller, L. D., Davis, A. J., Jenny, A. L., Fekadu, M., Whitfield, S. G. Surveillance for lesions of bovine spongiform encephalopathy in U.S. cattle. Developments in Biological Standardizations. 80, 119-121 (1993).
- Andrews, C., Gerdin, J., Patterson, J., Buckles, E. L., Fitzgerald, S. D. Eastern equine encephalitis in puppies in Michigan and New York states. Journal of Veterinary Diagnostic Investigation. 30 (4), 633-636 (2018).
- Appler, K., Brunt, S., Jarvis, J. A., Davis, A. D. Clarifying indeterminate results on the rabies direct fluorescent antibody test using real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction. Public Health Reports. 134 (1), 57-62 (2019).
- Rupprecht, C. E., Fooks, A. R., Abela-Ridder, B. Chapter 7. Brain removal. Laboratory techniques in Rabies 5th Edition. , 67-72 (2018).
