과일 파리를 처리하는 간단한 수제 도구 -초파리 멜라노가스터
Summary
여기에 설명 된 여러 수 제 도구의 사용 전송, 진정, 성인 Drosophila를죽일, 뿐만 아니라 유리 문화 유리 유리 병을 청소 하 고 계란을 수집. 이러한 도구는 쉽게 만들 수 있으며 Drosophila를 처리하는 데 매우 효율적입니다.
Abstract
과일 파리, 드로 소필라 멜라 노 가스터,널리 생물학적 연구 및 생물학 교육 모두에서 사용된다. 성인 파리를 취급하는 것은 일반적이지만 성인 파리가 비행하기 때문에 실제로는 어렵습니다. 여기에서 설명한 것은 Drosophila의처리에 있는 어려운 문제점을 해결하기 위하여 몇몇 간단하고 비용 효과적인 공구를 만드는 방법입니다. 폼 스토퍼의 구멍이 만들어지고 피펫 팁이나 깔때기가 구멍에 삽입됩니다. 파리는 피펫 팁/깔때기 조립체로 한 방향으로만 이동하여 성인 Drosophila를 바이알로 또는 바이알로 이송하는 것을 효율적으로 제어할 수 있습니다. 기존 프로토콜은 분쇄 된 얼음에서 냉각하고 차갑고 단단한 얼음 팩 표면으로 옮겨 서늘한 마취 파리를 위해 수정되었습니다. 아이스팩은 입체 현미경으로 검사할 때 응축된 물에서 움직이지 않는 파리를 유지하는 의료용 거즈 조각으로 덮여 있습니다. 파리는 마침내 마이크로 웨이브에 의해 계산 및 분류 또는 폐기안락사된다. 병 모양의 케이지는 계란을 수집하기 위한 개발되었으며, 노동력 을 절약하는 장치와 유리 배양 바이알 을 청소하기위한 프로토콜이 동반되었습니다.
Introduction
과일 파리, Drosophila melanogaster는, 널리 주제1,2의넓은 범위를 연구하는 생물학 연구 및 생물학 교육에 사용되는 모델 유기체이다. Drosophila를 취급하는 기본적인 문제는 모든 성인 (일부 돌연변이 3,4제외)이 비행 할 수 있으므로 바이알에서 바이알로 의 성인을 옮기고 파리의 고정을 처리하기가 더 쉽습니다.
종래, 연구원은 두 개의 유리병을 입에서 입으로 잡고, 파리를 두드리거나 파리가 다른 바이알로 날아오르도록 허용한 다음 두바이알을 분리하고 다시 연결하여 한 바이알에서 다른 바이알로 이동합니다 4. 분명히, 이것은 동일한 직경의 두 개의 바이알의 개구부를 필요로하며, 전송 된 파리의 양을 제어하기가 어렵습니다. 한편, 이것은 일을 끝내기 위하여 빠른 손이 필요하고, 길 잃은 파리를 탈출하는 것은 실험실 또는 교실에 대한 문제가 귀착될 수 있습니다. 엑스트라 버진 파리 또는 수컷 파리를 이미 준비된 십자가에 추가하는 것은 Drosophila 실험에서 또 다른 일상적인 작업입니다. 종래, 파리는 여분의 파리를 추가하기 전에 크로스 바이알에 고정되어야한다.
성인 초파리는 일상적으로 에테르, CO 2, 또는냉각 5에의해 마취된다. 에테르 및CO2 노출에 비해, 냉각은 성인 Drosophila를 고정시키기위한 가장 비용 효율적인 에이전트이며 파리와 연구자 (특히 젊은 학생)6,7모두에게 가장 유해합니다. 그러나 차가운 표면이나 챔버에 지속적으로 응축되는 물은 파리를 적시다. 젖은 파리의 표현형을 결정하는 것은 어렵고 조작8,9중에 쉽게 손상 될 수 있습니다. 이것은 냉각 방법이 더 널리 받아들여지는 것을 막았습니다.
플라이 트랜스퍼를 위한 도구 및 플라이 냉각 을 위한 방법은 앞서10에기술되어 있다. 본 명세서에서, 변형된 냉각 마취 기법은 드로소필라 실험에 대해 안전하고 신뢰할 수 있으며 실현 가능하다고 보고된다. 또한 이 논문에서는 1) 계산, 분류 또는 폐기를 위한 성인을 죽이는 방법, 2) 유리 배양 바이알 을 청소하기 위한 노동 절약 장치 및 프로토콜, 3) 계란 을 수집하기위한 간단한 케이지입니다. 여기에 설명된 간편하게 설계되고 비용 효율적인 도구는 플라이 핸들링의 어려운 문제를 해결하는 데 사용할 수 있으며, 이러한 방법을 테스트했으며 숙련된 연구원과 초보 연구원을 위해 견고하고 신뢰할 수 있으며 다루기 쉬운 것으로 입증되었습니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
Drosophila 양육 및 실험에 관련 된 기본 활동을 처리 하기 위한 몇 가지 수 제 도구는이 종이에 설명 되어 있습니다. 이러한 도구는 간단하지만 오히려 효과적입니다. 사실상, 모든 실험실은 이러한 도구를 쉽게 만들 수 있으며, 연구 또는 교육 실험실은 아마도 로컬로 사용할 수없는 기성 대안을 찾을 필요가 없습니다.
플라이 전송은 Drosophila 실험에서 가장 일반적?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
없음
Materials
| a pair of pliers | |||
| cordless drill driver | max speed: 500 rpm | ||
| electric soldering iron | |||
| file | |||
| funnel | diameter of disk<60mm | ||
| ice box | |||
| insect pins | |||
| infrared thermometer | HCIYET HT-830 | ||
| long cuff rubber gloves | |||
| mechanical pencils | |||
| medical gauze | |||
| microcentrifuge tube | 100 ul | ||
| microwave oven | |||
| Parafilm | |||
| peri dish | internal diameter 60 mm | ||
| pipette tips | 1 ml | ||
| plastic film | |||
| plastic peri dish | Φ36 mm used to cover the empty vial | ||
| point tweezers | |||
| protective work gloves | |||
| re-freezable hard icepacks | 26.5×14.5×2.5 cm or larger | ||
| rubber air blower | |||
| snap cutter | |||
| soft drink bottle | 500 ml, internal diameter c.a. 65 mm | ||
| sponge stopper | |||
| stainless steel sponges | |||
| tube brush | |||
| vial | Φ34 mm × 90 mm |
References
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