टर्म न्यूनेटल चूहों में स्टेम सेल का इंट्राचेल इंस्टिलेशन
Summary
वर्णित नवजात चूहों शब्द में इंट्राचेल इंजेक्शन के माध्यम से मेसेंचिमल स्ट्रोमल कोशिकाओं (एमएससी) के इंट्राचेल प्रत्यारोपण के लिए एक प्रोटोकॉल है। यह तकनीक स्टेम कोशिकाओं और दवाओं को नवजात चूहे के फेफड़ों में पहुंचाने के लिए चिकित्सकीय रूप से व्यवहार्य विकल्प है ताकि उनकी प्रभावकारिता का मूल्यांकन किया जा सके ।
Abstract
ऑक्सीजन की उच्च सांद्रता के संपर्क में आने से सूजन और तीव्र फेफड़ों की चोट होती है, जो मानव ब्रोंकोपुल्मोनरी डिस्प्लेसिया (बीपीडी) के समान है। समय से पहले शिशुओं में, बीपीडी सर्फेक्टेंट थेरेपी, इष्टतम वेंटिलेशन रणनीतियों, और गैर-निवास सकारात्मक दबाव वेंटिलेशन के शुरुआती उपयोग के बावजूद एक बड़ी जटिलता है। क्योंकि फेफड़े की सूजन बीपीडी के रोगजनन में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाती है, कोर्टिकोस्टेरॉयड का उपयोग इसे रोकने के लिए एक संभावित उपचार है। फिर भी, लंबे समय तक प्रतिकूल प्रभावों के कारण अपरिपक्व शिशुओं के लिए प्रणालीगत कोर्टिकोस्टेरॉयड उपचार की सिफारिश नहीं की जाती है। प्रीक्लिनिकल अध्ययन और मानव चरण I नैदानिक परीक्षणों ने दिखा दिया कि हाइपरऑक्सिया-प्रेरित फेफड़ों की चोटों और अपरिपक्व शिशुओं में मेसेंचिमल स्ट्रोमल कोशिकाओं (एमएससी) का उपयोग सुरक्षित और व्यवहार्य है। नवजात हाइपरऑक्सिक फेफड़ों की चोट से बचाने के लिए इंट्राशेकल और नसों में एमएससी प्रत्यारोपण दिखाया गया है । इसलिए, स्टेम सेल और संयुक्त सर्फेक्टेंट और ग्लूकोकॉर्टिकोइड उपचार का इंट्राचेल प्रशासन श्वसन विकारों के साथ नवजात शिशुओं के इलाज के लिए एक नई रणनीति के रूप में उभरा है। जन्म के समय चूहे के फेफड़ों की विकासात्मक अवस्था गर्भ के 26−28 सप्ताह में मानव फेफड़ों में उसके बराबर है। इसलिए, नवजात चूहों को अपनी प्रभावकारिता का मूल्यांकन करने के लिए श्वसन संकट वाले शिशुओं को अपरिपक्व करने के लिए इंट्राचेल प्रशासन का अध्ययन करने के लिए उपयुक्त हैं। यह इंट्राचेल इन्स्टिलेशन तकनीक फेफड़ों में स्टेम सेल और दवाओं की डिलीवरी के लिए एक चिकित्सकीय व्यवहार्य विकल्प है।
Introduction
नवजात शिशुओं को सांस की परेशानी के इलाज के लिए अक्सर पूरक ऑक्सीजन की आवश्यकता होती है1. हालांकि, शिशुओं में हाइपरऑक्सिया थेरेपी का प्रतिकूल दीर्घकालिक प्रभाव पड़ता है। ऑक्सीजन की उच्च सांद्रता के संपर्क में आने से सूजन और तीव्र फेफड़ों की चोट होती है, जो मानव ब्रोंकोपल्मोनरी डिस्प्लेसिया (बीपीडी)2के समान है। बीपीडी हाइपरऑक्सिया उपचार की एक बड़ी जटिलता है जो शुरुआती सर्फेक्टेंट थेरेपी, इष्टतम वेंटिलेशन प्रक्रियाओं और समय से पहले शिशुओं में गैर-निवास सकारात्मक दबाव वेंटिलेशन के बढ़ते उपयोग के बावजूद हो सकती है। जबकि बीपीडी3के लिए कई उपचार रणनीतियों की सूचना दी गई है, कोई ज्ञात चिकित्सा इस जटिलता को कम नहीं कर सकती है।
कोर्टिकोस्टेरॉयड का उपयोग बीपीडी को रोकने के लिए एक संभावित उपचार है, क्योंकि फेफड़े की सूजन इसके रोगजनन में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाती है। हालांकि, लंबे समय तक प्रतिकूल प्रभाव4,5के कारण अपरिपक्व शिशुओं के लिए प्रणालीगत कोर्टिकोस्टेरॉयड थेरेपी की सिफारिश नहीं की जाती है।
मेसेंचिमल स्ट्रोमल कोशिकाओं (एमएससी) में बहुलम विशेषताएं होती हैं और हड्डी, उपास्थि, एडीपोज ऊतक, मांसपेशी और टेंडन6सहित विभिन्न कोशिका प्रकारों में अंतर कर सकती हैं। एमएससी में इम्यूनोमोडुलेटरी, एंटी-भड़काऊ और पुनर्योजी प्रभाव7होते हैं, और पशु अध्ययन8, 9,9में हाइपरऑक्सिया-प्रेरित फेफड़ों की चोट में एमएससी के चिकित्सीय लाभों और उनके गुप्त घटकों को दिखाते हैं। नवजात हाइपरऑक्सिक फेफड़ों की चोट से बचाने के लिए इंट्राशेकल और नसों में एमएससी प्रत्यारोपण दिखाया गया है । इसलिए, स्टेम सेल और संयुक्त सर्फेक्टेंट और कोर्टिकोस्टेरॉयड थेरेपी के इंट्राचेल प्रशासन श्वसन विकारों के साथ नवजात शिशुओं के इलाज के लिए एक संभावित उपचार रणनीति हो सकती है । प्रीक्लिनिकल अध्ययनों में नवजात चूहों में स्टेम सेल और एडेनो से जुड़े वायरस के इंट्राचेरियल एडमिनिस्ट्रेशन का इस्तेमाल किया गया है10,11,12. हालांकि, प्रत्यारोपित स्टेम सेल की तकनीक और वीवो ट्रैकिंग में कदम-दर-कदम प्रस्तुति उपलब्ध नहीं है । नवजात चूहा श्वसन संकट वाले अपरिपक्व शिशुओं पर इंट्राचेल प्रशासन के प्रभावों का अध्ययन करने के लिए उपयुक्त है क्योंकि जन्म के समय चूहे के फेफड़े की सैकुलर चरण गर्भ13के 26−28 सप्ताह में मानव फेफड़े के बराबर होता है । चूहा श्वासनली में प्रशासन के लिए एक प्रभावी विधि सफल फेफड़े के वितरण के लिए महत्वपूर्ण है। यहां प्रस्तुत तकनीक मनुष्यों के लिए एक मॉडल के रूप में चूहों का उपयोग कर नवजात फेफड़े की बीमारियों के उपचार के लिए कोशिकाओं और/या दवाओं के इंट्राचेल प्रशासन के अध्ययन के लिए अनुमति देता है ।
Protocol
Representative Results
Discussion
श्वसन संकट वाले नवजात शिशुओं को आमतौर पर इंट्राचेल सर्फेक्टेंट और/या कोर्टिकोस्टेरॉयड उपचार१ ९कीआवश्यकता होती है । मानव चरण I नैदानिक परीक्षणों ने अपरिपक्व शिशुओं में इंट्राचेल ए?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस अध्ययन को आंशिक रूप से मेरिडिगेन बायोटेक कंपनी, लिमिटेड ताइपे, ताइवान (ए-109-008) से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था।
Materials
| 6-0 silk | Ethicon | 1916G | |
| Alcohol Prep Pad | CSD | 3032 | |
| BD Stemflow hMSC Analysis Kit | BD Biosciences | 562245 | CD markers |
| CMV-Luciferase-EF1α-copGFP BLIV 2.0 Lentivector for In Vivo Imaging | SBI | BLIV511PA-1 | |
| CryoStor10 | BioLife Solutions | 640222 | |
| Human MSCs | Meridigen Biotech Co., Ltd. Taipei, Taiwan | ||
| Infrared light | JING SHANG | JS300T | |
| Isoflurane | Halocarbon | 26675-46-7 | |
| IVIS-200 small animal imaging system | Caliper LifeSciences, Hopkinton, MA | ||
| Luciferin potassium salt | Promega, Madison, WI | ||
| Micro-scissors, straight | Vannas | H4240 | |
| Normal saline | TAIWAN BIOTECH CO., LTD. | 113531 | Isotonic Sodium Chloride Solution |
| Small Hub RN Needle, 30 gauge | Hamilton Company, Reno, NV | 7799-06 | |
| Syringe (100 µl) | Hamilton Company, Reno, NV | 81065 | |
| Xenogen Living Image 2.5 software | Caliper LifeSciences, Hopkinton, MA | N/A |
References
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