תיאר הוא פרוטוקול לביצוע השתלת intratracheal של תאים סטרומה mesenchymal (MSCs) באמצעות הזרקת intratracheal בטווח חולדות הלאומית. טכניקה זו היא אופציה מעשית מבחינה קלינית לאספקת תאי גזע ותרופות לתוך הריאות חולדה התינוק כדי להעריך את יעילותם.
חשיפה ממושכת לריכוזים גבוהים של חמצן מובילה לדלקת ופגיעה בריאות חריפה, הדומה לדיספלזיה האנושית (BPD). ב תינוקות מוקדמת, BPD הוא סיבוך משמעותי למרות השימוש המוקדם של טיפול הגולש, אסטרטגיות אוורור אופטימלי, ואוורור לחץ חיובי לא פולשני. בגלל דלקת הריאות משחק תפקיד מכריע בפתוגנזה של BPD, סטרואידים השימוש הוא אחד הטיפול הפוטנציאלי כדי למנוע את זה. עם זאת, טיפול סטרואידים מערכתי אינו מומלץ בדרך כלל עבור תינוקות טרום לטווח עקב תופעות לוואי ארוכות טווח. מחקרים פרה-קליניים ובשלב האנושי הניסויים הקליניים הפגינו כי שימוש בתאי סטרומה mesenchymal (MSCs) ב hyperoxia המושרה פציעות ריאה בתינוקות טרום לטווח הוא בטוח וריאלי. לפני פגיעה בריאה היפראוקמית. לכן, המינהל intratracheal של תאי גזע ומשולב הטיפול הglucocorticoid התפתחה כאסטרטגיה חדשה לטיפול ילודים עם הפרעות בנשימה. השלב ההתפתחותי של ריאות החולדה בלידה הוא שווה ערך לזה בריאות האדם ב -26 לחודש בשבוע של ההיריון. מכאן, חולדות היילוד מתאימים לחקר intratracheal הממשל לקדם תינוקות לטווח עם מצוקה נשימתית כדי להעריך את יעילותה. טכניקת האינסטיציה הזאת היא אופציה קלינית לאספקת תאי גזע וסמים לתוך הריאות.
חמצן משלים נדרש לעתים קרובות לטיפול בתינוקות היילוד עם מצוקה נשימתית1. עם זאת, טיפול עידות אצל תינוקות יש השפעות לטווח ארוך שלילית. חשיפה ממושכת לריכוזים גבוהים של חמצן מובילה לדלקת ופגיעה בריאות חריפה, הדומה לדיספלזיה האנושית (BPD)2. Bpd הוא סיבוך משמעותי של טיפול עידות שיכול להתרחש למרות טיפול מוקדם הסקר, הליכי אוורור אופטימלי, ושימוש מוגבר של אוורור לחץ חיובי לא פולשני בתינוקות מוקדמת. בעוד אסטרטגיות טיפול רבות דווחו עבור BPD3, אין טיפול ידוע יכול להפחית את הסיבוך הזה.
סטרואידים השימוש הוא אחד הטיפול הפוטנציאלי כדי למנוע BPD, כי דלקת ריאות ממלאת תפקיד מכריע בפתוגנזה שלה. עם זאת, טיפול סטרואידים מערכתית אינו מומלץ בדרך כלל עבור תינוקות טרום לטווח עקב תופעות לוואי ארוכות טווח4,5.
כדוריות העור mesenchymal (MSCs) יש תכונות pluripotent והוא יכול להבדיל לתוך סוגי תאים שונים, כולל עצם, סחוס, שומן הרקמה, שריר, והגידים6. MSCs יש השפעות אימונומודולטוריים, אנטי דלקתיות, ואת ההשפעות של משובי7, ומחקרים בעלי חיים להראות את היתרונות הטיפוליים של MSCs ואת הרכיבים המופרשים שלהם ב-hyperoxia המושרה פציעה הריאה במכרסמים8,9. לפני פגיעה בריאה היפראוקמית. לכן, המינהל intratracheal של תאי גזע ומשולב סטרואידים טיפול עשוי להיות אסטרטגיה הטיפול הפוטנציאלי לטיפול ילודים עם הפרעות בנשימה. מחקרים קדם-קליניים השתמשו בניהול intratracheal של תאי גזע וירוס הקשורים adeno בחולדות היילוד10,11,12. עם זאת, מצגת צעד אחר צעד של הטכניקה ובמעקב vivo של תאי גזע מושתלים אינו זמין. העכברוש היילוד מתאים לחקר ההשפעות של הממשל intratracheal על תינוקות טרום לטווח עם מצוקה נשימתית, כי השלב הסקולאני של ריאה החולדה בלידה הוא שווה ערך לזה של הריאה האנושית ב 26-28 שבוע של הריון13. שיטה יעילה עבור המינהל לתוך קנה הנשימה החולדה היא חיונית להפצת הריאות מוצלחת. הטכניקה המוצגת כאן מאפשרת לימוד של מינהל intratracheal של תאים ו/או תרופות לטיפול במחלות ריאות באמצעות חולדות כמודל לבני אדם.
תינוקות יילוד עם מצוקה נשימתית מחייבים בדרך כלל את הטיפול בחומרים מקצועיים ו/או סטרואידים19. בשלב האנושי הניסויים הקליניים הפגינו הבטיחות של intratracheal MSCs בתינוקות טרום לטווח8. מחקרים אלה מראים כי הממשל intratracheal של תרופות היא אופציה חשובה עבור תינוקות הי?…
The authors have nothing to disclose.
מחקר זה היה נתמך באופן חלקי על ידי מענק Meridigen ביוטכנולוגיה ושות, בע מ טאיפה, טייוואן (א-109-008).
6-0 silk | Ethicon | 1916G | |
Alcohol Prep Pad | CSD | 3032 | |
BD Stemflow hMSC Analysis Kit | BD Biosciences | 562245 | CD markers |
CMV-Luciferase-EF1α-copGFP BLIV 2.0 Lentivector for In Vivo Imaging | SBI | BLIV511PA-1 | |
CryoStor10 | BioLife Solutions | 640222 | |
Human MSCs | Meridigen Biotech Co., Ltd. Taipei, Taiwan | ||
Infrared light | JING SHANG | JS300T | |
Isoflurane | Halocarbon | 26675-46-7 | |
IVIS-200 small animal imaging system | Caliper LifeSciences, Hopkinton, MA | ||
Luciferin potassium salt | Promega, Madison, WI | ||
Micro-scissors, straight | Vannas | H4240 | |
Normal saline | TAIWAN BIOTECH CO., LTD. | 113531 | Isotonic Sodium Chloride Solution |
Small Hub RN Needle, 30 gauge | Hamilton Company, Reno, NV | 7799-06 | |
Syringe (100 µl) | Hamilton Company, Reno, NV | 81065 | |
Xenogen Living Image 2.5 software | Caliper LifeSciences, Hopkinton, MA | N/A |