Şiddetli Yumurtalık Disfonksiyonu Olan Hastalarda Doğurganlığın Korunması
Summary
Ağır yumurtalık disfonksiyonu olan hastalar için yumurtalık foliküllerinin ilaçsız in vitro aktivasyonu (IVA) için laboratuvar prosedürlerinin ayrıntılarını sunuyoruz. Bu yöntem yumurtalık hiperstimülasyonu başına alınabilir oosit sayısını artırabilir ve bu hastalar için doğurganlık korumasına fayda sağlayabilir.
Abstract
Yumurtalık fonksiyonu yaşlanma sırasında ve karyotip anormalliği, otoimmün hastalıklar, kemoterapi ve radyasyon terapileri ve yumurtalık ameliyatları da dahil olmak üzere bazı patofizyolojik durumlarda giderek azalır. Şiddetli yumurtalık disfonksiyonu olan evli olmayan kadınlarda, doğurganlık koruması gelecekteki gebelikler için önemlidir. Her ne kadar oosit kriyoprezervasyonu doğurganlığın korunması için yerleşik bir yöntem olsa da, bu hastalar yumurtalık hiperstimülasyonundan sonra bile sadece sınırlı sayıda oosit koruyabilir ve gelecekteki gebeliği garanti etmek için yeterli oosit sağlamak için tekrarlanan stimülasyonlara yol açabilir. Bu sorunu çözmek için, yakın zamanda yumurtalık foliküllerinin erken evrelerini preantral folikül aşamasına kadar geliştirmemizi sağlayan ilaçsız bir in vitro aktivasyon (IVA) prosedürü geliştirdik. Bu preantral foliküller gonadotropin stimülasyonunun benzersiz protokolüne yanıt verebilir, bu da kriyoprezervasyon için yumurtalık stimülasyonu başına alınan oosit sayısının artmasına neden olur. İlaçsız IVA cerrahi yaklaşım ve yumurtalık stimülasyonundan oluşuyordu. Laparoskopik cerrahi altındaki hastalardan bir veya her iki yumurtalıktan korteksin bir kısmını çıkardık. Yumurtalık kortikal dokuları, Hippo sinyal yolunu bozmak ve erken evre foliküllerin gelişimini teşvik etmek için küçük küpler halinde kesildi. Bu küpler ortotropik olarak kalan yumurtalıklara ve her iki Fallop tüpünün serosasının altına aşılandı. İlaçsız IVA’nın cerrahi prosedürünü ve sonraki yumurtalık stimülasyon protokolünü zaten yayınladık, ancak burada ilaçsız IVA için gerekli laboratuvar yöntemlerinin ayrıntılarını sunuyoruz.
Introduction
Yumurtalık fonksiyonu yaşlanma sırasında ve karyotip anormalliği, otoimmün hastalıklar, kemoterapi ve radyasyon tedavileri ve yumurtalık ameliyatları gibi bazı patofizyolojik durumlar sırasında giderek azalır. Doğurganlığın korunması, gelecekteki gebelik potansiyellerini korumak için şiddetli yumurtalık disfonksiyonu olan evli olmayan kadınlar için en iyi seçeneklerden biridir. Doğurganlığın korunması için, şu anda çoğunlukla onko-doğurganlık alanında iki yöntem mevcuttur. Oosit kriyoprezervasyonu, doğurganlığın korunması için iyi kurulmuş bir prosedürdür ve birçok başarılı vaka bildirilmiştir1,2. Öte yandan, kanser hastalarında doğurganlığın korunması için yumurtalık dokusu kriyoprezervasyonu da kurulmuştur, ancak yine de deneysel bir stratejidir3,4. Her iki yöntemde de gebeliğin gerçekleşmesi için birden fazla sayıda olgun oosit gereklidir. Genellikle, prematüre yumurtalık yetersizliği (POI) olan hastalar, 40 yaşından önce amenore haline gelen ve düşük yumurtalık rezervine sahip orta yaşlı kadınlar, olgun oositler5,6,7vermek için yumurtalık stimülasyonuna zayıf yumurtalık yanıtı (POR) göstermiştir. Ayrıca, antral folikül sayısı düşük olan genç hastalar da yumurtalık stimülasyonuna POR göstermiştir7. Bu hastalar, uygun yumurtalık hiperstimülasyonundan sonra bile çok sınırlı sayıda alınabilir oositlere sahiptir, bu nedenle hamilelik için yeterli sayıda oosit sağlamak için birden fazla pahalı prosedür gerektirir.
Oosit bağışı ve ardından kocanın sperm ve embriyo transferi (ET) ile in vitro fertilizasyon (IVF) kendi oositlerini elde etmekte zorlanan bu POI ve POR hastaları için tek seçenek8,9,10. Bununla birlikte, oosit bağışı etik konuların yanı sıra otoimmün ve gebelik komplikasyonları11 , 12,13,14ile karmaşıktır. Bu sorunların çözümü için hastaların kendi oositleri kullanılarak kısırlık tedavisinin kurulması istenmek istenmemektedir. İçN hastaları için, başarılı folikül büyümesine ve olgun oositlerin üretilmesine izin vermek için in vitro aktivasyon (IVA) yaklaşımını geliştirdik, bir dizi hamilelik ve doğuma öncülükediyoruz 15. IVA’da, laparoskopik cerrahi altında yumurtalıkların çıkarılmasından sonra yumurtalık kortekslerini parçaladık ve Akt uyarıcı ilaçlarla folikülleri aktive etmek için iki gün boyunca kültürledik ve daha sonra ikinci laparoskopik cerrahi altında Fallop tüplerinin serosasının altında yapılan yapay torbalara heterotopik greftleme gerçekleştirdik15. Bu prosedür, Hippo sinyal bozulmasını teşvik etmek için yumurtalık korteks parçalanması sonrası ilkel, birincil ve ikincil foliküllerin büyümesini teşvik etti16, ardından Akt sinyal uyarıcıları ile iki günlük kültür17.
Şiddetli İçN vakalarının aksine, yumurtalık rezervi azalmış POR hastalarında birden fazla sekonder folikül vardır. Hippo sinyal bozulması tek başına ikincil folikül büyümesini teşvik etmede etkili olduğundan16, son zamanlarda Akt uyarıcı ilaçların tedavisi olmadan kortikal parçalanma ve ortotopik greftleme içeren ilaçsız IVA prosedürünü kullanarak POR hastaları için başarılı gebelikler ve doğumlar gösterdik. İlaçsız IVA, yumurtalık foliküllerinin erken evresini sadece bir ameliyattan sonra preantral folikül aşamasına gelişmesi için uyarır ve IVF-embriyo transferi için alınan oosit sayısını artırır15,18. İlaçsız IVA yaklaşımı, orijinal IVA’mızla karşılaştırıldığında 1) kültür sırasında potansiyel folikül kaybından kaçınmak, 2) ikinci ameliyatın invazivliğini ve maliyetlerini en aza indirmek, 3) sadece kısa süreli ameliyat sonrası yatak istirahatini ve 4) ortotopik aşılamaya bağlı spontan gebelik potansiyelini içeren çeşitli avantajlara sahiptir. Kısa bir süre önce ilaçsız IVA19’un cerrahi prosedürlerini ve ameliyattan sonra yumurtalık stimülasyonunun ayrıntılı protokollerini gösteren bir video makale yayınladık20. Burada, ilaçsız IVA için gerekli laboratuvar yöntemlerinin ayrıntılarını sunuyoruz.
Protocol
Representative Results
Discussion
Bu yazıda, ilaçsız IVA için ayrıntılı bir laboratuvar protokolü gösterdik. İlaçsız IVA, ikincil folikül büyümesini teşvik etmek için yumurtalık rezervi azalan POR hastası için yeni bir kısırlık tedavisi yaklaşımıdır, yumurtalık stimülasyonundan sonra daha olgun oositler elde edilmesine ve başarılı gebelikte artmasına neden olur20. Yumurtalık rezervi azalan 15 POR hastasında, bu yaklaşım bir spontan gebelik elde etti, in vitro fertilizasyon-embriyo transferi, de…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Tatsuji Ihana, Sachiyo Kurimoto, Kazuko Takahasih, Yuki Yoshizawa, Maho Arashi, Kentaro Fujita, Erina Kudo, Yuka Kurimoto ve Mayuko Wakatsuki’ye ilaçsız IVA prosedürünü desteklemiş oldukları için ve Prof. Aaron J.W. Hsueh’e (Stanford Üniversitesi Tıp Fakültesi, Stanford, CA) makalenin eleştirel okunması ve düzenlenmesi için teşekkür ederiz. Rebecca Truman ve Gregory Truman’a da İngilizce anlatım ekledikleri için teşekkür ederiz. Bu çalışma Japonya Bilimi Destekleme Derneği (JSPS), Bilimsel Araştırma B (19H03801) ve Zorlu Keşif Araştırmaları (18K19624) tarafından desteklendi.
Materials
| 4.5 onz specimen container | FALCON | 354013 | Other products may also be suitable |
| 60mm dish | FALCON | 351007 | Other products may also be suitable |
| 50 x 50 cm sterile drape | HOGY Medical | SR-823 | Any type of sterile produsts may also be suitable |
| Disposable pippete | FALCON | 357575 | Other products may also be suitable |
| Fine scissors, Curved | WPI | #14224-G | Although other products may also be suitable, we strongly recommend use this products |
| Hot plate | TOKAI HIT | TPiE-SP | Use at operation room to maintain the temperature of dishes containing ovarian tissue before transplantation |
| Human Serum Albumin Solution | Irvine Scientific | 9988 | Medium for handling ovarian tissue |
| IVA cannule | KITAZATO | 446030 IVA-6030E | Specific cannula for tissue autografting |
| KAI medical Disposable scalpel | WPI | #5 10-A | Although other products may also be suitable, we strongly recommend use this products |
| Micro scissors, Curved | WPI | #503364 | Although other products may also be suitable, we strongly recommend use this products |
| Modified HTF Medium-HEPES | Irvine Scientific | 90126 | Medium for handling ovarian tissue |
| Sterile gauze | Osaki Medical | 15004 | Any type of sterile produsts may also be suitable |
| Swiss Tweezers, Curved Tips | KAI | #504505 | Although other products may also be suitable, we strongly recommend use this products |
References
- Liang, T., Motan, T. Mature Oocyte Cryopreservation for Fertility Preservation. Advances in Experimental Medicine and Biology. 951, 155-161 (2016).
- Yoon, T. K., et al. Live births after vitrification of oocytes in a stimulated in vitro fertilization-embryo transfer program. Fertility and Sterility. 79 (6), 1323-1326 (2003).
- Donnez, J., et al. Livebirth after orthotopic transplantation of cryopreserved ovarian tissue. Lancet. 364 (9443), 1405-1410 (2004).
- Meirow, D., et al. Pregnancy after transplantation of cryopreserved ovarian tissue in a patient with ovarian failure after chemotherapy. New England Journal of Medicine. 353 (3), 318-321 (2005).
- De Vos, M., Devroey, P., Fauser, B. C. Primary ovarian insufficiency. Lancet. 376 (9744), 911-921 (2010).
- Scott, R. T., et al. Follicle-stimulating hormone levels on cycle day 3 are predictive of in vitro fertilization outcome. Fertility and Sterility. 51 (4), 651-654 (1989).
- Ferraretti, A. P., et al. ESHRE consensus on the definition of ‘poor response’ to ovarian stimulation for in vitro fertilization: the Bologna criteria. Human Reproduction. 26 (7), 1616-1624 (2011).
- Huhtaniemi, I., et al. Advances in the Molecular Pathophysiology, Genetics, and Treatment of Primary Ovarian Insufficiency. Trends in Endocrinology and Metabolism. 29 (6), 400-419 (2018).
- Męczekalski, B., Maciejewska-Jeske, M., Podfigurna, A. Reproduction in premature ovarian insufficiency patients – from latest studies to therapeutic approach. Prz Menopauzalny. 17 (3), 117-119 (2018).
- Baker, V. Life plans and family-building options for women with primary ovarian insufficiency. Seminars in Reproductive Medicine. 29 (4), 362-372 (2011).
- Englert, Y., Govaerts, I. Oocyte donation: particular technical and ethical aspects. Human Reproduction. 13, 90-97 (1998).
- Englert, Y., Rodesch, C., Laruelle, C., Govoerts, I. Oocyte donation: ethical aspects related to the donor. Contraception, Fertilite, Sexualite. 25 (3), 251-257 (1997).
- Storgaard, M., et al. Obstetric and neonatal complications in pregnancies conceived after oocyte donation: a systematic review and meta-analysis. BJOG: An International Journal of Obstetrics and Gynaecology. 124 (4), 561-572 (2017).
- Storgaard, M., Malchau, S., Loft, A., Larsen, E., Pinborg, A. Oocyte donation is associated with an increased risk of complications in the pregnant woman and the fetus. Ugeskrift for Laeger. 179 (11), (2017).
- Kawamura, K., et al. Hippo signaling disruption and Akt stimulation of ovarian follicles for infertility treatment. Proceedings of the National Academy of Sciences. 110 (43), 17474-17479 (2013).
- Hsueh, A. J., Kawamura, K., Cheng, Y., Fauser, B. C. Intraovarian control of early folliculogenesis. Endocrine Reviews. 36 (1), 1-24 (2015).
- Li, J., et al. Activation of dormant ovarian follicles to generate mature eggs. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (22), 10280-10284 (2010).
- Suzuki, N., et al. Successful fertility preservation following ovarian tissue vitrification in patients with primary ovarian insufficiency. Human Reproduction. 30 (3), 608-615 (2015).
- Tanaka, Y., Hsueh, A. J., Kawamura, K. Surgical approaches of drug-free in activation and laparoscopic ovarian incision to treat patients with ovarian infertility. Fertility and Sterility. , (2020).
- Kawamura, K., Ishizuka, B., Hsueh, A. J. W. Drug-free in-vitro activation of follicles for infertility treatment in poor ovarian response patients with decreased ovarian reserve. Reproductive Biomedicine Online. 40 (2), 245-253 (2020).
- Haino, T., et al. Determination of Follicular Localization in Human Ovarian Cortex for Vitrification. Journal of Adolescent and Young Adult Oncology. 7 (1), 46-53 (2018).
- Baird, D. T., Webb, R., Campbell, B. K., Harkness, L. M., Gosden, R. G. Long-term ovarian function in sheep after ovariectomy and transplantation of autografts stored at -196 C. Endocrinology. 140 (1), 462-471 (1999).
- Qin, Y., Jiao, X., Simpson, J. L., Chen, Z. J. Genetics of primary ovarian insufficiency: new developments and opportunities. Human Reproduction Update. 21 (6), 787-808 (2015).
- Domniz, N., Meirow, D. Premature ovarian insufficiency and autoimmune diseases. Best Practice & Research: Clinical Obstetrics & Gynaecology. 60, 42-55 (2019).
- Laven, J. S. Primary Ovarian Insufficiency. Seminars in Reproductive Medicine. 34 (4), 230-234 (2016).
- Grynberg, M., et al. Fertility preservation in Turner syndrome. Fertility and Sterility. 105 (1), 13-19 (2016).
- Tomao, F., Spinelli, G. P., Panici, P. B., Frati, L., Tomao, S. Ovarian function, reproduction and strategies for fertility preservation after breast cancer. Critical Reviews in Oncology/Hematology. 76 (1), 1-12 (2010).
- Kim, S., Lee, Y., Lee, S., Kim, T. Ovarian tissue cryopreservation and transplantation in patients with cancer. Obstetrics & Gynecology Science. 61 (4), 431-442 (2018).
- Donnez, J., Dolmans, M. M. Ovarian tissue freezing: current status. Current Opinion in Obstetrics and Gynecology. 27 (3), 222-230 (2015).
- Wu, R. C., Kuo, P. L., Lin, S. J., Liu, C. H., Tzeng, C. C. X chromosome mosaicism in patients with recurrent abortion or premature ovarian failure. Journal of the Formosan Medical Association. 92 (11), 953-956 (1993).
- De Munck, N., Vajta, G. Safety and efficiency of oocyte vitrification. Cryobiology. 78, 119-127 (2017).
- Argyle, C. E., Harper, J. C., Davies, M. C. Oocyte cryopreservation: where are we now. Human Reproduction Update. 22 (4), 440-449 (2016).
