쥐의 부분 이종화 힌드래그 이식 모델
1Division of Plastic and Reconstructive Surgery,Massachusetts General Hospital, Harvard Medical School, 2Vascularized Composite Allotransplantation Laboratory, Center for Transplantation Sciences,Massachusetts General Hospital, Harvard Medical School, 3Shriners Hospital for Children, 4Service de Chirurgie Plastique, Hôpital Européen Georges Pompidou, Assistance Publique-Hôpitaux de Paris (APHP),Université de Paris
Summary
이 논문은 쥐에 있는 부분이성 골균 플랩 이식 프로토콜 및 중간 후속에 있는 그것의 잠재적인 결과를 제시합니다.
Abstract
혈관 화 복합 동종 이식 (VCA)는 복잡한 조직 결함 후 자가 외과 가능성없이 환자를위한 가장 진보 된 재건 옵션을 나타냅니다. 얼굴과 손 이식은 환자의 삶을 변화시켰으며, 새로운 미적 및 기능성 사회 기관을 제공합니다. 유망한 결과에도 불구하고 VCA는 평생 면역 억제 및 전염성 합병증으로 인해 여전히 실적이 저조합니다. 쥐는 면역 학적 경로 와 접목 거부 메커니즘을 조사 하는 생체 내 연구에 대 한 이상적인 동물 모델. 쥐는 또한 관류 및 냉동 보존 연구를 포함하여 새로운 복합 조직 이식 보존 기술에 널리 사용됩니다. 쥐에서 VCA에 사용 되는 모델 재현 해야 합니다., 신뢰할 수 있는, 낮은 수술 후 이환율과 사망률. 이종성 사지 이식 절차는 이 기준을 충족하고 치열 하 사지 이식 보다 수행 하기 쉽습니다. 설치류 미세 수술 모델을 마스터하려면 미세 수술 및 동물 관리에 대한 견고한 경험이 필요합니다. 본명에서 쥐에서 부분 이종요법 골염 플랩 이식의 신뢰할 수 있고 재현 가능한 모델을 보고, 수술 후 결과, 잠재적인 합병증의 예방 수단.
Introduction
지난 2년간 VCA는 얼굴1,상반두 절단2,음경3및 기타 복잡한 조직 결함4,5를포함하여 심각한 손상을 입은 환자를 위한 혁신적인 치료법으로 진화해 왔다. 그러나, 평생 면역 억제의 결과는 아직도 이 복잡한 재건 수술의 더 넓은 적용을 방해합니다. 기본 연구는 거부 방지 전략을 개선하는 데 중요합니다. VCA 보존 시간을 늘리는 것은 이식 물류를 개선하고 기증자 풀을 늘리는 데도 필수적입니다 (VCA 기증자는 피부 톤, 해부학 크기, 성별을 포함한 견고한 장기 기증자보다 더 많은 기준을 충족해야하므로). 이러한 맥락에서, 쥐 사지 이식은 동종 이식6,7,신규 내성 유도 프로토콜8,보존 연구9,10,11의면역 거부에 대한 연구에서 널리 사용된다. 따라서 이러한 VCA 모델은 VCA 번역 연구를 마스터하는 핵심 요소입니다.
골연액은8,12,13,14에서VCA를 연구하는 신뢰할 수 있는 모델로 문헌에서 기술되었다. 직교 전지 이식은 이식 기능의 장기 평가를 허용하지만, 수술 후 사망률 및 사망률14와관련된 시간이 많이 소요되는 절차이다. 대조적으로, 이성애 사지 이식 모형은 비 기능적이지만, VCA에 재현가능한 연구를 가능하게 합니다. 수술 후 결과는 쥐 VCA 이식 연구의 시작 전에 안정적으로 예상될 수 있습니다. 이 연구는 3 주 간의 후속 기간 동안 수술 및 수술 후 발생할 수있는 빈번한 가능한 결과와 합병증을 포함하는 쥐의 부분 이성토성 골다움증 플랩 이식 모델을보고합니다.
Protocol
모든 동물은 실험실 동물의 관리 및 사용에 대한 NIH 가이드에 따라 인도적 치료를 받았습니다. 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC 프로토콜 2017N000184) 및 동물 관리 및 사용 검토 사무실 (ACURO)는 모든 동물 프로토콜을 승인했습니다. 근친 남성 루이스 쥐 (250-400 g) 모든 실험에 사용 되었다. 1. 수술 루이스 쥐를 이소플루란 흡입을 사용하여 마취한다. 유도 챔버에서 5% ?…
Representative Results
이 단일 연산자 연구에서, 30 개의 시너지 이종 부분 사지 이식이 수행되었다. 성공은 VCA 실패 또는 안락사를 요구하는 합병증의 부재로 수술 후 21일에 정의되었습니다. 접목의 정상적인 진화는 도 3로표현된다. 수령인의 부분 사지 조달 및 이식 개시에 대한 평균 기간은 각각 35 분과 105 분이었습니다. 평균 허혈 시간은 105 분이었다. 후속 기간 동안, 합병증의 두 가지 유형이 …
Discussion
설치류의 정형소 사지 이식 모델은 문헌(15,16,17)에기재되어 있다. 그러나, 그들은 신경 수리가 필요, 근육 재부착, 그리고 대퇴골의 완벽한 골합성, 이는 매우 어려운 단계가 될 수 있습니다. 이러한 모델은 또한 설치류14에서더 높은 이환율 및 사망률과 연관되며, 특히 이식된 뒷다리의 정상적인 기능회복이 ?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 작품은 상 No. 아래 의회 지시 의학 연구 프로그램을 통해 보건 담당 국방부 차관실에 의해 지원되었다. W81XWH-17-1-0680. 의견, 해석, 결론 및 권고사항은 저자의 의견이며 반드시 국방부의 승인을 받지는 않습니다.
Materials
| 24 GA angiocatheter | BD Insyte Autoguard | 381412 | |
| 4-0 suture Black monofilament non absorbable suture | Ethicon | 1667 | Used to suture the E-collar to the back of the neck |
| 4-0 suture Coated Vicryl Plus Antibacterial | Ethicon | VCP496 | |
| Adson Tissue Forceps, 11 cm, 1 x 2 Teeth with Tying Platform | ASSI | ASSI.ATK26426 | |
| Bipolar cords | ASSI | 228000C | |
| Black Polyamide Monofilament USP 10-0, 4 mm 3/8c | AROSurgical | T04A10N07-13 | Used to perform the microvascular anastomoses |
| Buprenorphine HCl | Pharmaceutical, Inc | 42023-179-01 | |
| Dilating Forceps | Fine science tools (FST) | 18131-12 | |
| Dissecting Scissors 15 cm, Round Handle 8 mm diameter, Straight Slender Tapered Blade 7 mm, Lipshultz Pattern | ASSI | ASSI.SAS15RVL | |
| Double Micro Clamps 5.5 x 1.5 mm | Fine science tools (FST) | 18040-22 | |
| Elizabethan collar | Braintree Scientific | EC-R1 | |
| Forceps 13.5 cm long, Flat Handle, 9 mm wide Straight Tips 0.1 mm diameter (x2) | ASSI | ASSI.JFL31 | |
| Halsey Micro Needle Holder | Fine science tools (FST) | 12500-12 | |
| Heparin Lock Flush Solution, USP, 100 units/mL | BD PosiFlush | 306424 | |
| Isoflurane | Patterson Veterinary | 14043-704-06 | |
| Jewelers Bipolar Forceps Non Stick 11 cm, straight pointed tip, 0.25 mm tip diameter | ASSI | ASSI.BPNS11223 | |
| Lone Star Elastic Stays | CooperSurgical | 3314-8G | Used to retract the inguinal ligament for femoral vessels dissection |
| Lone Star Self-Retaining Retractors | CooperSurgical | 3301G | |
| Micro-Mosquito Hemostats | Fine science tools (FST) | 13010-12 | Used to retract the inguinal fat pad distally |
| Needle Holder, 15 cm Round Handle, 8 mm diameter, Superfine Curved Jaw 0.2 mm tip diameter, without lock | ASSI | ASSI.B1582 | |
| Nylon Suture Black Monolfilament 8-0, 6.5 mm 3/8c | Ethilon | 2808G | Used to ligate collateral branches on the femoral vessels |
| Offset Bone Nippers | Fine science tools (FST) | 16101-10 | |
| S&T Vascular Clamps 5.5 x 1.5 mm | Fine science tools (FST) | 00398-02 | |
| Walton scissors | Fine science tools (FST) | 14077-09 |
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Citer Cet Article
Goutard, M., Randolph, M. A., Taveau, C. B., Lupon, E., Lantieri, L., Uygun, K., Cetrulo Jr., C. L., Lellouch, A. G. Partial Heterotopic Hindlimb Transplantation Model in Rats. J. Vis. Exp. (172), e62586, doi:10.3791/62586 (2021).