強直性脊椎炎のマウスモデルにおけるDu-Hoxibustion
Summary
この論文では、実験マウスの強直性脊椎炎の治療におけるDu-hoxisulation中に取るべき手術手順と注意事項について詳しく説明します。
Abstract
強直性脊椎炎(AS)は、主に軸骨格に影響を与える関節炎の漸進的に悪化し、障害となる形態です。この病気は主に脊椎と仙腸関節に関係しています。病気の後期には脊椎と仙腸関節の癒合が起こり、脊椎のこわばりや後弯症、歩行困難などを引き起こし、仕事や日常生活の質に深刻な影響を与え、患者や家族、社会に大きな負担をかけています。ASの代替療法として、非薬物療法への注目が高まっています。お灸は、伝統的な中国医学(TCM)で使用される古代の治療法です。Du-moxibustion Therapyは、通常のお灸をベースに開発されたユニークで革新的な外用療法であり、ASに対して明確な治療効果があります。Du-hoxibustionは、TCMの互換性のある技術を巧みに組み合わせて、経絡、ツボ、漢方薬、およびお灸を統合します。本稿では、AS治療におけるDu-灸のメカニズムを研究するための実験的基礎を提供するために、実験マウスにおけるDu-hoxibustionの操作手順と注意事項を詳細に記述する。
Introduction
強直性脊椎炎(AS)は、主に軸骨格に影響を与える関節炎の漸進的に悪化し、障害となる形態です。最新の疫学調査によると、世界の人々の~0.01%-1.8%がこの症状に苦しんでおり1、そのほとんどが若い男性です(男女比は~2-3:1)2。中国人人口におけるASの発生率は0.2%〜0.4%です。この病気は主に脊椎と仙腸関節に関係しています。病気の後期には脊椎と仙腸関節の癒合が起こり、脊椎のこわばりや後弯症、歩行困難などを引き起こし、仕事や日常生活の質に深刻な影響を与え、患者や家族、社会に大きな負担をかけています1。現在、ASに対する決定的な解決策はなく、提供される治療法は、薬理学的および非薬理学的の両方で、主に痛みの緩和、疾患の進行の遅延、および生活の質の向上に焦点を当てています。近年、薬物療法の選択肢は非常に限られているため3、ASの代替療法である非薬物療法への注目が高まっています。中国では、患者はしばしば伝統的な漢方薬(TCM)からなる外用療法を好むが、これは副作用が軽く、治療中の利便性が高い。
灸は、中医学で使用される古代の治療技術です。杜灸は、杜経絡の脊椎部分に「泡を使った薬用灸」からなる外用治療技術です。主にASの治療に使用され、安全性と有効性が示されています。杜灸は、通常の灸と比較して、灸面積が広く、灸錐が大きく、火力が強く、高温であるという特徴があります4。システマティックレビューとメタアナリシスは、灸がAS5の効果的な補完療法であることを示唆しています。最近の研究では、AS患者の臨床症状といくつかの炎症因子が灸によって改善されたことが確認されました6。研究によると、Du-hoxibustionはβエンドルフィンの脳内含有量を増加させ、中枢鎮痛効果を発揮し7、HLA-B27遺伝子8の発現をダウンレギュレートし、ASの再発率を遅らせることができることが明らかになっています。また、Du-hoxibustionは、炎症性指数ESR(ESR)とC反応性タンパク質(CRP)、I型コラーゲンのC末端ペプチド(CTX-I)、およびDickkopf1タンパク質(DKK1)のレベルを低下させることにより、ASの進行を改善する効果があります9,10。
別の臨床研究では、Du-hoxibustionが、免疫機構のバランスをとるために、無秩序なT細胞サブセットであるIgと補体C3をさらに調整できることが示されました11。骨代謝に関しては、灸は血清アルカリホスファターゼ(ALP)と血清リン(S-P)の上昇を抑制し、血清カルシウム(S-Ca)、骨密度(BMD)、骨強度を増加させることができます12。さらに、Du-hoxibustionは、AS患者の倦怠感症状を和らげるために、複数のポイントで脊椎機能を修復することができます13。いくつかの動物実験では、ASの治療におけるお灸の潜在的なメカニズムが明らかになっています。ある研究では、灸が全体的な健康状態を有意に改善し、足の厚さのレベルを下げ、脊椎の靭帯組織サンプル中のIL-1β、PGE2、IL-6、およびTNF-αのレベルを低下させることが示されました。代謝経路分析により、同定された代謝物は、脂質、アミノ酸、腸内細菌叢、プリン代謝と同様にTCAサイクルに関連づけられました14。別の研究では、灸が炎症誘発性サイトカイン、IL-1β、TNF-α、IL-17、およびIL-6の発現を抑制することが示されました。 RANKL、RANK、ALP、および OCNのmRNAレベルを低下させました。ASマウスの病理組織学的特徴を改善した15。
これらの研究は、お灸がASの治療に有効である可能性を示唆しているが、これらの知見を確認し、AS患者の灸に対する最適な治療プロトコルを決定するには、さらなる研究が必要である。私たちのチームは、35年以上にわたって中国の臨床現場で広く実施され、適用されてきた伝統的な中国のお灸の基礎理論と実践的な操作に基づいて、灸療法を作成および修正しました。Du-hoxibustionによるASの治療に関する質の高い研究はほとんどありませんが、ASの治療における適応症は証拠によって裏付けられています。しかし、Du-duxibustionでASを治療するメカニズムは、さらなる研究に値します。動物実験は、ASの治療におけるDu-hoxibustionのメカニズムを探るための重要な方法です。Du-hoxibustionの臨床操作は比較的成熟していますが、動物実験でのメカニズムの研究に使用されることはめったにありません。本稿では、AS実験マウスの治療におけるDu-moxibustionの操作と注意点について詳細に述べる。
Protocol
Representative Results
Discussion
ASは、背中、腰椎、関節の腫れの痛みとして臨床的に現れ、重症の場合、脊椎の変形と関節の硬直が発生することがあります26。早期の診断と治療により、AS患者の生活の質が向上し、障害率が低下し、予後が改善されます。中国伝統医学(TCM)によると、ASは腎臓と杜経絡の陽の欠乏、および内部に冷え性の蓄積によって引き起こされると考えられています。TCMは、経絡の概念…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この研究は、中国国家自然科学基金会の一般プログラム(No.82174491)とQilu School of Traditional Chinese Medicine Academic School Inheritance Project(No.Lu Weihan [2020]132)。実験条件を提供してくれた山東中医薬大学実験動物センターに感謝します。
Materials
| 10% EDTA | Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| alcohol pads | HYNAUT, Qingdao Hainuo Biological Engineering Co., LTD, Qingdao, China | ||
| anesthesia machine | Medical Supplies & Services INT. LTD, Keighley, UK | ||
| centrifuge tubes | Axygen, Corning, NewYork, UAS | ||
| complete Frech's adjuvant (CFA) | aladdin,Shanghai, China | F393378 | |
| cotton ball | Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China | ||
| cotton gauze | Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China | ||
| cutting board | self-preparation | ||
| decorin from bovine articular cartilage | Sigma-Aldrich, MO, USA | D8428 | |
| depilatory cream | Veet, Reckitt Benckiser (China) Investment Co. LTD, Shanghai, China | ||
| electronic scale | Shanghai Yajin Electronic Technology Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| Eppendorf tube | Axygen, Corning, NewYork, UAS | ||
| eye lubricant | Beijing Shuangji Pharmaceutical Co., LTD., Beijing, China | ||
| ginger | self-preparation | ||
| GraphPad Prism 7 software | GraphPad Software,Boston, USA | ||
| hair clipper | Super human Group CO LTD, Jinhua, China | ||
| heating pads | Shenzhen Leshuo Tech Co., Ltd.,Shenzhen, China | ||
| incomplete Freund’s adjuvant (IFA) | aladdin,Shanghai, China | F393371 | |
| injection syringe | Shandong Xinhua Ande Medical Supplies Co., LTD, Zibo, China | ||
| isoflurane | Shenzhen Rayward Life Technology Co., LTD, Shenzhen, China | R510-22-10 | |
| joss stick | Shijiazhuang Lidu Fragrant Industry Co., LTD.,Shijiazhuang, China | ||
| juicer | Braun (Shanghai) Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| knife | self-preparation | ||
| lighter | Zhejiang tiger-lighter Co. LTD | ||
| mortar | Luoyang Yinai Ceramic Technology Co., LTD.,Luoyang, China | ||
| Mouse IL-17 ELISA Kit | absin, Shanghai, China | abs520009-96T | |
| Mouse TNF-α ELISA Kit | Wuhan Sanying, Wuhan, China | KE10002 | |
| mulberry paper | Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China | ||
| OFT | Xinruan,Shanghai, China | XR-XZ301 | |
| paper cup | self-preparation | ||
| pipettes | OXFORD BIO INSTRUMENTS INC.,Oxford, UK | ||
| refined moxa velvet | self-preparation | ||
| rotarod | Xinruan,Shanghai, China | XR-6C | |
| scientz-48L cryogenic high throughput tissue grinder | Ningbo Xinzhi Biotechnology Co., LTD | ||
| scissors | Shandong Jiaren Medical Supplies Co., Ltd., Zibo, China | ||
| semi-automatic paraffin sectioning machine | Leica Camera AG, Watznach, Germany | ||
| SPSS 25.0 software | International Business Machines Corporation, NewYork, UAS | ||
| TCM powder | self-preparation | ||
| tips | Biosharp, Labgic, Beijing, China | ||
| writing brush | Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China |
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