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Mess-Plasmamembranprotein endocytischen Preise von Reversible Biotinylierung
Journal JoVE
Biologie
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Journal JoVE Biologie
Measuring Plasma Membrane Protein Endocytic Rates by Reversible Biotinylation
DOI:

11:32 min

December 23, 2009

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Chapitres

  • 00:00Titre
  • 00:56Introduction
  • 01:20Cell Culture and Solution Preparation
  • 03:37Biotinylation, Quenching and Internalization of Proteins
  • 07:30Protein Assay, Affinity Chromatography and SDS-Page Analysis of Proteins
  • 09:49Dopamine Transporter Internalization
  • 11:02Conclusion

Summary

Traduction automatique

Regulierte Endozytose regelt die Zelloberflächenexpression Ebenen der Mehrheit der Membranproteinen. Hier nutzen wir reduzierbar, Membran impermeante Biotinylierungsreagenzien die endocytischen Rate der Dopamin-Transporter (DAT), ein polytoper Membranprotein zu messen. Das Verfahren ermöglicht eine einfache Methode zur Messung der Endozytose von den meisten Plasmamembranproteinen.

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