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Valutazione dei tassi di sintesi proteica de novo in Caenorhabditis elegans
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Assessment of de novo Protein Synthesis Rates in Caenorhabditis elegans
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Valutazione dei tassi di sintesi proteica de novo in Caenorhabditis elegans

DOI:
10.3791/61170-v

•

06:27 min

•

September 12, 2020

•

, ,
1Institute of Molecular Biology and Biotechnology,Foundation for Research and Technology-Hellas, Greece, 2Department of Basic Sciences, Faculty of Medicine,University of Crete, Heraklion, 70013, Crete, Greece

Chapitres

  • 00:00Introduction
  • 00:42Maintenance, Synchronization and Preparation of Transgenic Nematodes for Monitoring de novo Protein Synthesis
  • 02:11FRAP Assay using Transgenic Animals Expressing Somatic Tissue Reporters plfe-2GFP and psod-3GFP
  • 03:01Mounting the Samples and Perform FRAP Assay using Transgenic Nematodes Expressing Pan-Neuronally Cytoplasmic GFP, punc-119GFP
  • 04:19Representative Results: In Vivo Assessment of de novo Protein Synthesis in C. elegans
  • 05:46Conclusion

Summary

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Qui, introduciamo e descriviamo un metodo nonradioattivo e non invasivo per valutare la sintesi proteica de novo in vivo, utilizzando il nematode Caenorhabditis elegans e il recupero della fluorescenza dopo il fotobleaching (FRAP). Questo metodo può essere combinato con schermi genetici e/o farmacologici per identificare nuovi modulatori della sintesi proteica.

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Keywords: De Novo Protein SynthesisFluorescence Recovery After PhotobleachingFRAPCaenorhabditis ElegansGFPTransgenic WormsProtein Synthesis RateCycloheximideEpifluorescent MicroscopePhotobleachingFluorescent Reporter

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