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Isolement d’adipocytes viables et d’une fraction vasculaire stromale à partir de tissu adipeux viscéral humain adapté à l’analyse de l’ARN et au phénotypage des macrophages
 
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Isolement d’adipocytes viables et d’une fraction vasculaire stromale à partir de tissu adipeux viscéral humain adapté à l’analyse de l’ARN et au phénotypage des macrophages

Article DOI: 10.3791/61884-v • 06:22 min • October 27th, 2020
October 27th, 2020 •
1, 2, 3, 4, 5, 6, 2, 7, 8
1Research Division, Instituto Nacional de Perinatologia, 2Department of Immunobiochemistry, Instituto Nacional de Perinatologia, 3Department of Obstetrics, Instituto Nacional de Perinatologia, 4Department of Academic Programs and Continuing Education, Instituto Nacional de Perinatologia, 5Department of Infectology and Immunology, Instituto Nacional de Perinatologia, 6Clinical Research Branch, Instituto Nacional de Perinatologia, 7Department of Nutrition and Bioprogramming, Instituto Nacional de Perinatologia, 8Department of Human Genetics and Genomics, Instituto Nacional de Perinatologia, Mexico City, Mexico

Chapitres

résumé
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Ce protocole fournit une méthode efficace de digestion de la collagénase pour isoler des adipocytes viables et des cellules stromales de fraction vasculaire-SVF de la graisse viscérale humaine en un seul processus, y compris une méthodologie pour obtenir un ARN de haute qualité à partir d’adipocytes et la phénotypification des macrophages SVF par coloration de plusieurs marqueurs membranaires pour analyse par cytométrie en flux.

Tags

Isolement d’adipocytes viables fraction vasculaire stromale analyse de l’ARN phénotypage des macrophages tissu adipeux viscéral organe métabolique adipocytes matures molécules bioactives processus immunitaires physiopathologie du tissu adipeux étapes d’isolement directives de dépannage technique de digestion enzymatique de la collagénase sous-ensembles de macrophages études d’expression génique suspension unicellulaire isolement de l’ARN adipocytaire mature
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