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Domínios replicativos de imagem em Cromatina Ultraestruturalmente Preservada por Tomografia Eletrônica
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Journal JoVE Biologie
Imaging Replicative Domains in Ultrastructurally Preserved Chromatin by Electron Tomography

Domínios replicativos de imagem em Cromatina Ultraestruturalmente Preservada por Tomografia Eletrônica

DOI:
10.3791/62803-v

•

14:56 min

•

May 20, 2022

•

, , , , , , , , ,
1Belozersky Institute of Physico-chemical Biology,Lomonosov Moscow State University, 2Faculty of Biology,Lomonosov Moscow State University, 3Faculty of Bioengineering and Bioinformatics,Lomonosov Moscow State University, 4National Research Center, Kurchatov Institute, 5V.I. Kulakov National Medical Research Center for Obstetrics, Gynecology, and Perinatology

Chapitres

  • 00:08Introduction
  • 00:35Cells Labeling and Fixation
  • 02:13Click-Reaction
  • 05:09Ag-Amplification
  • 06:28Gold Toning
  • 06:42ChromEM
  • 07:23Dehydration and Epon Embedding
  • 12:50Electron Tomography
  • 13:06Representative Results
  • 14:14Conclusions

Summary

Traduction automatique

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Este protocolo apresenta uma técnica para mapeamento de alta resolução de locais de replicação em cromatina estruturalmente preservada in situ que emprega uma combinação de rotulagem EdU-streptavidin-Nanogold pré-incorporação e ChromEMT.

Tags

Electron TomographyReplicative DomainsChromatinEdU LabelingSilver EnhancementChromEM StainingGlutaraldehyde FixationPlasma Membrane PermeabilizationBiotin-azide ConjugationStreptavidin-Nanogold

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