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ポジティブセンスRNAウイルス変異体を改変するためのリバースジェネティクス
Journal JoVE
Génétique
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Journal JoVE Génétique
Reverse Genetics to Engineer Positive-Sense RNA Virus Variants
DOI:

15:49 min

June 09, 2022

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Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 01:01Genome‐Wide Substitution Mutagenesis of JFH1 Using Error‐Prone PCR
  • 02:46Estimation of the Proportion of Mutations in ep‐PCR Products (Mutant Libraries)
  • 06:08Viral RNA Transfection of the Huh7.5 Cell Line
  • 07:57Quantification of Virus Titers
  • 11:59Drug‐Resistant Viral Variant Selection
  • 13:33Results: Integration of ep‐PCR and Virus Reverse Genetics to Generate HCV Mutants
  • 15:17Conclusion

Summary

Traduction automatique

プロトコルは間違いが傾向があるPCRおよび逆の遺伝学を使用して完全長の突然変異体のRNAの統合の結合によって肝炎のウイルスのゲノムの制御可能な遺伝の多様性をもたらすための方法を記述する。この方法は、表現型選択のモデルを提供し、長さ10 kbのポジティブセンスRNAウイルスゲノムに使用できます。

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