Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Chapitres
- 00:04Introduction
- 01:01Genome‐Wide Substitution Mutagenesis of JFH1 Using Error‐Prone PCR
- 02:46Estimation of the Proportion of Mutations in ep‐PCR Products (Mutant Libraries)
- 06:08Viral RNA Transfection of the Huh7.5 Cell Line
- 07:57Quantification of Virus Titers
- 11:59Drug‐Resistant Viral Variant Selection
- 13:33Results: Integration of ep‐PCR and Virus Reverse Genetics to Generate HCV Mutants
- 15:17Conclusion
Het protocol beschrijft een methode voor het introduceren van controleerbare genetische diversiteit in het genoom van het hepatitis C-virus door de synthese van mutant RNA over de volledige lengte te combineren met behulp van foutgevoelige PCR en omgekeerde genetica. De methode biedt een model voor fenotypeselectie en kan worden gebruikt voor 10 kb lange positive-sense RNA-virusgenomen.
