פרוטוקול זה מדגים כיצד לבצע אימונוהיסטוכימיה על הזחל תסיסנית גזור.
Abstract
<em> תסיסנית</em> Neuromuscular צומת (NMJ) היא מערכת מודל הוקמה המשמשים במחקר של פיתוח הפלסטיות הסינפטית ו. השימוש הנרחב של<em> תסיסנית</em> מנוע מערכת נובע הנגישות הגבוהה שלו. זה יכול להיות מנותח עם רזולוציה של תא בודד. ישנם 30 שרירים לכל hemisegment אשר הסדר בתוך הקיר הגוף היקפי ידועים. סך של 31 נוירונים מנוע לצרף את השרירים האלה בדפוס כי יש איכות גבוהה. באמצעות הביולוגיה והגנטיקה המולקולרית, אפשר ליצור חיות טרנסגניות או מוטציות. לאחר מכן, אפשר ללמוד את ההשלכות על התפתחות המורפולוגיה והתפקוד של NMJ. אימונוהיסטוכימיה ניתן להשתמש בתמונה בבירור את מרכיבי NMJ. במאמר זה, אנו מדגימים כיצד להשתמש מכתים נוגדנים כדי להמחיש את<em> תסיסנית</em> הזחל NMJ.
Protocol
לפני שתתחיל הכן את הפתרונות הבאים: PBT (0.1% טריטון X100 ב 1X PBS), PBTB (0.2% BSA ב PBT), ו PBTN (NGS 2% PBTB). לנתח הזחלים תסיסנית. נא עיין תסיסנית Dissection הזחל NMJ. א?…
Discussion
אימונוהיסטוכימיה (IHC) היא חיונית לחקר הביולוגיה NMJ משום שהוא מאפשר הדמיה של NMJ. מטרה זו מושגת על ידי שימוש בנוגדנים המזהים את הממברנה העצבית (למשל, HRP), את presynapse (למשל, CSP, SYT), ו / או postsynapse (למשל, DLG). מולקולות איתות, חלבונים מבניים, או חלבונים רומן עניין גם יכול להיות מוכתם. וא…