Soft Agar Colony Formation Assay: Eine Methode, um Auswirkungen neuartiger Verbindungen auf die Proliferation von Krebszellen zu testen
Published: April 30, 2023
Abstract
Quelle: Horibata A. et. al., Verwendung des Soft Agar Colony Formation Assay to Identify Inhibitors of Tumorigenicity in Breast Cancer Cells. J. Vis. Exp. (2015).
Dieses Video beschreibt einen Test zur Bildung von Weichagarkolonien, um die Wirkung eines PADI-Enzyminhibitors und BB-Cl-Amidins auf Brustkrebs-Tumorigenität in vitrozu testen. Dieser Test ermöglicht auch die quantitative Bewertung des Zelltransformationspotenzials im Kontext genetischer Störungen.
Protocol
1. Zubereitung von 3% 2-Hydroxyethyl-Agarose In eine saubere, trockene 100 ml Glasflasche 0,9 g 2-Hydroxyethyl-Agarose (Agarose VII) gefolgt von 30 ml destilliertem Wasser geben. Mikrowelle die Mischung für 15 Sec und sanft wirbeln. Wiederholen Sie diesen Schritt mindestens drei weitere Male, bis sich das Agarosepulver vollständig auflöst. Autoclavdie die lösungshaltige Flasche für 15 min. Lassen Sie die Agarose-Lösung vor der weiteren Anwendung auf RT abkühlen. Bewahren Sie…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Zeiss Axiopot | Carl Zeiss Microscopy | 1021859251 | |
| Inverted Microscope | Olympus | CKX41 | |
| DMEM/F-12 | Lonza BioWhittaker | 12-719F | |
| HyClone Donor Equine Serum | Fisher Scientific | SH30074.03 | |
| Penicillin Streptomycin | Life Technologies | 15140-122 | |
| 2-Hydroxyethylagarose: Type VII, low gelling temperature | Sigma-Aldrich | 39346-81-1 |
Citazione di questo articolo
Soft Agar Colony Formation Assay: A Method to Test Effects of Novel Compounds on Cancer Cell Proliferation. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20226, doi: (2023).