הכנת הגידים זנב עכברוש ללימודי biomechanical ו Mechanobiological
Summary
מאמר זה מתאר את הפרוצדורות המשמשים להכנת זנב גידים עכברוש ללימודי biomechanical ו mechanobiological. מספר תכונות של שלבים עיקריים בהכנת הם הפגינו, עם תחילת החילוץ, חתך מדידת שטח, שטיפה וטעינה החדרה bioreactor.
Abstract
זנב עכברוש גידים (RTTs) הם מודל ביולוגי נפוץ בשימוש ניסיוני במבחנה בתחומי הפיזיולוגיה tendinopathy הגיד. עבודה עם רקמות אלה הוא מאתגר כי הם שבירים מאוד, עד עכשיו לא היה פרוטוקול מפורט בקפדנות על הבידוד שלהם.
כדי להתמודד עם האתגרים הללו, פיתחנו שיטות וכלים כדי להקל על מניפולציה של RTTs ורקמות לשלוט הכדאיות, עקרות ויושרה. מאמר זה מתאר את הפרוצדורות המשמשים להכנת RTTs ללימודי biomechanical ו mechanobiological. העבודה שלנו מחולק לארבעה שלבים עיקריים: מיצוי, חתך מדידת שטח, שטיפה וטעינה החדרה bioreactor.
בכל שלב, כל הנהלים, חומרים מניפולציות מוצגים בפירוט, כך שהם יכולים לשכפל בקלות. יתר על כן, המכשירים ספציפית שפותחה מוצגים: צלחת מניפולציה בשימוש להפריד RTTs, מיקרומטר אופטיים לתפקיד רקמות במהלך המדידה חתך את האזור מערכת עיגון לצרף את RTTs על bioreactor.
לבסוף, אנו מתארים את התוצאות שהתקבלו לאחר בדיקות מרובות כדי לאמת את השיטות שלנו. הערכות כדאיות, עקרות ויושרה להוכיח כי הנהלים שלנו קפדנית דיה מניפולציות של רקמות שביר כגון גידים זנב חולדה.
Protocol
Discussion
על ידי יישום אותן הפרוצדורות, אנחנו יכולים לנהל מגוון רחב של במבחנה על סוג זה של רקמות. כמו למשל, מחקר על ניוון הרקמה בוצע על ידי יישום של גירוי מתחת ל RTTs לתקופה של עשרה ימים. כל יום, הערכנו תכונות הרקמה מכני שאינו הרסני בדיקות הרפיה מתח. בסוף, הצלחנו לשמור וריאציה מ…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
מאמר זה היה נתמך על ידי NSERC גרנט # 299280, IRSST כמו מלגה להורה ג'FRSQ כמו בפרס מחקר לתואר ראשון סטודנט מ 'סיר. אנו מודים יואן Lemieux-Laneville עבור ביצוע מניפולציות מוקלט על וידאו.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| D-PBS | Reagent | Wisent inc. | 311-410-CL | Saline solution |
| Glucose | Reagent | Wisent inc. | 609-037-EL | Saline solution
1g/L |
| Antibiotics-antimycotics | Reagent | Invitrogen Corp. | 15240-062 | Saline solution
1% |
| DMEM | Reagent | Invitrogen Corp. | 12800-017 | Culture solution |
| Sodium Bicarbonate | Reagent | Wisent inc. | 600-105-CG | Culture solution 3.7g/L |
| FBS | Reagent | Wisent inc. | 090150 | Culture solution 10% |
| Antibiotics-antimycotics | Reagent | Invitrogen Corp. | 15240-062 | Culture solution 1% |
| Optic Micrometer | Tool | Custom-made | ||
| Manipulation plate | Tool | Custom-made | ||
| Bioreactor chamber | Tool | Custom-made |
Riferimenti
- Bennett, M. B., Ker, R., Dimery, N., Alexander, R. Mechanical properties of various mammalian tendons. J. Zool. Lond. A209, 537-548 (1986).
- Dupuis, D. . Déshydratation de matrices collagéniques reconstruites in vitro: effets sur les propriétés mécaniques et histologiques [dissertation]. , 114-114 (1981).
- Haut, R. C. Age-dependent influence of strain rate on the tensile failure of rat tail tendon. Journal of Biomechanical Engineering. 105, 296-299 (1983).
- Huppé, N., Lessard, J. -. L., Langelier, E. A Bioreactor Design for the Mechanobiological Study of Soft Tissue Damage and Repair in Conditions that Provide the Best Approximation of Actual Use. , (1985).
- Langelier, E., Dupuis, D., Guillot, M., Goulet, F. &. a. m. p. ;. a. m. p., Rancourt, D. Cross-sectional profiles and volume reconstructions of soft tissues using laser beam measurements. J Biomech Eng. 126, 796-802 (2004).
- Lee, T. Q., Woo, S. L. -. Y. A new method for determining cross-sectional shape and area of soft tissues. J Biomech Eng. 110, 110-114 (1988).
- Parent, G., Cyr, M., Cousineau-Pelletier, P., Desbiens-Blais, F. &. a. m. p. ;. a. m. p., Langelier, E. Current Techniques for the Evaluation of Cross-Sectional Area in Rat Tail Tendons Generate Significant Errors. , (1985).
