रैट टेल Tendons की Biomechanical और Mechanobiological अध्ययन के लिए तैयार
Summary
यह आलेख वर्णन प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं biomechanical और mechanobiological अध्ययन के लिए चूहे की पूंछ tendons तैयार करने के लिए इस्तेमाल किया. तैयारी में मुख्य कदम के कई सुविधाओं, निष्कर्षण, पार के अनुभागीय क्षेत्र माप के साथ शुरुआत, rinsing और bioreactor कक्ष में लोड करने के लिए प्रदर्शन कर रहे हैं.
Abstract
चूहा पूंछ tendons (RTTs) एक आम जैविक कण्डरा फिजियोलॉजी और tendinopathy के क्षेत्रों में इन विट्रो अध्ययन में प्रयोगात्मक में इस्तेमाल मॉडल हैं. उन ऊतकों के साथ कार्य करना चुनौतीपूर्ण है क्योंकि वे बहुत नाजुक हैं, और अब तक उनके अलगाव के लिए कोई कठोर विस्तृत प्रोटोकॉल था.
इन चुनौतियों से सामना है, हम तरीकों और उपकरणों RTTs और नियंत्रण ऊतक व्यवहार्यता बाँझपन और अखंडता के हेरफेर की सुविधा विकसित किया है. यह आलेख वर्णन प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं biomechanical और mechanobiological अध्ययन के लिए RTTs तैयार करने के लिए इस्तेमाल किया. निष्कर्षण, पार के अनुभागीय क्षेत्र माप, rinsing और bioreactor कक्ष में लोड: हमारा काम चार मुख्य चरणों में विभाजित है.
हर कदम पर, सभी प्रक्रियाओं, सामग्री, और चतुराई में विस्तार से प्रस्तुत कर रहे हैं इतना है कि वे आसानी से reproduced किया जा सकता है है. इसके अलावा, विशिष्ट विकसित उपकरणों प्रस्तुत कर रहे हैं: एक हेरफेर थाली RTTs अलग करने के लिए इस्तेमाल किया, एक ऑप्टिक पार के अनुभागीय क्षेत्र माप और एक प्रस्तोता प्रणाली के दौरान ऊतक स्थिति सुक्ष्ममापी एक bioreactor पर RTTs संलग्न करने के लिए.
अंत में, हम कई परीक्षणों के बाद हमारे तरीके को मान्य करने के लिए प्राप्त परिणामों का वर्णन. व्यवहार्यता बाँझपन, और अखंडता मूल्यांकन दिखाना है कि हमारे प्रक्रियाओं चूहे की पूंछ, tendons जैसे नाजुक ऊतकों की जोड़तोड़ के लिए पर्याप्त कठोर हैं.
Protocol
Discussion
उन प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं को लागू करके, हम ऊतकों के इस तरह पर इन विट्रो अध्ययन में की एक विस्तृत विविधता का संचालन कर सकते हैं. उदाहरण के लिए के रूप में, ऊतक अध: पतन पर एक अध्ययन के तहत उत्तेजना के दस ?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
यह लेख # NSERC 299,280 अनुदान, IRSST द्वारा एक स्नातक छात्र अनुसंधान एम. Cyr पुरस्कार के रूप में जी जनक और FRSQ के लिए एक छात्रवृत्ति के रूप में समर्थित किया गया था. हम वीडियो पर दर्ज की जोड़तोड़ प्रदर्शन करने के लिए Lemieux – Laneville Yoan धन्यवाद.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| D-PBS | Reagent | Wisent inc. | 311-410-CL | Saline solution |
| Glucose | Reagent | Wisent inc. | 609-037-EL | Saline solution
1g/L |
| Antibiotics-antimycotics | Reagent | Invitrogen Corp. | 15240-062 | Saline solution
1% |
| DMEM | Reagent | Invitrogen Corp. | 12800-017 | Culture solution |
| Sodium Bicarbonate | Reagent | Wisent inc. | 600-105-CG | Culture solution 3.7g/L |
| FBS | Reagent | Wisent inc. | 090150 | Culture solution 10% |
| Antibiotics-antimycotics | Reagent | Invitrogen Corp. | 15240-062 | Culture solution 1% |
| Optic Micrometer | Tool | Custom-made | ||
| Manipulation plate | Tool | Custom-made | ||
| Bioreactor chamber | Tool | Custom-made |
Riferimenti
- Bennett, M. B., Ker, R., Dimery, N., Alexander, R. Mechanical properties of various mammalian tendons. J. Zool. Lond. A209, 537-548 (1986).
- Dupuis, D. . Déshydratation de matrices collagéniques reconstruites in vitro: effets sur les propriétés mécaniques et histologiques [dissertation]. , 114-114 (1981).
- Haut, R. C. Age-dependent influence of strain rate on the tensile failure of rat tail tendon. Journal of Biomechanical Engineering. 105, 296-299 (1983).
- Huppé, N., Lessard, J. -. L., Langelier, E. A Bioreactor Design for the Mechanobiological Study of Soft Tissue Damage and Repair in Conditions that Provide the Best Approximation of Actual Use. , (1985).
- Langelier, E., Dupuis, D., Guillot, M., Goulet, F. &. a. m. p. ;. a. m. p., Rancourt, D. Cross-sectional profiles and volume reconstructions of soft tissues using laser beam measurements. J Biomech Eng. 126, 796-802 (2004).
- Lee, T. Q., Woo, S. L. -. Y. A new method for determining cross-sectional shape and area of soft tissues. J Biomech Eng. 110, 110-114 (1988).
- Parent, G., Cyr, M., Cousineau-Pelletier, P., Desbiens-Blais, F. &. a. m. p. ;. a. m. p., Langelier, E. Current Techniques for the Evaluation of Cross-Sectional Area in Rat Tail Tendons Generate Significant Errors. , (1985).
