فيفو السابقين الثقافة من الأنسجة للمريض وفحص الجينات التسليم
Summary
توضح هذه المقالة ثقافة شرائح الأنسجة المريضة للدراسات توصيل الجينات وتحليل لاحقة في التعبير الجيني باستخدام التصوير IVIS تلألؤ بيولوجي.
Abstract
هذا الفيديو يصف استخدام أنسجة المريض كنموذج فيفو السابقين لدراسة توصيل الجينات. هو شرائح طازجة الأنسجة المريضة حصلت في وقت الجراحة ، والاحتفاظ بها في الثقافة. نموذج الجسم الحي السابقين نظام يسمح للالتسليم المادي للجينات في أنسجة المريض سليمة ويتم تحليل التعبير الجيني عن طريق التصوير تلألؤ بيولوجي باستخدام نظام الكشف IVIS. نظام الكشف bioluminescent يوضح الكمي سريعة ودقيقة في التعبير الجيني داخل شرائح فردية من دون الحاجة للتضحية الأنسجة. ويمكن استخدام هذا النظام شريحة زراعة الأنسجة في مجموعة متنوعة من أنواع الأنسجة بما في ذلك الأنسجة الطبيعية والخبيثة ، ويسمح لنا لدراسة الآثار المترتبة على الطبيعة غير المتجانسة للأنسجة سليمة وعلى درجة عالية من التباين بين المرضى الفردية. ويمكن استخدام هذا النظام النموذجي في بعض الحالات كبديل للنماذج حيوانية واسطة قبل السريرية والتكميلية قبل دخول التجارب السريرية.
Protocol
Discussion
وصفنا مريض فيفو السابقين نسيج الثقافة والأسلوب bioluminescent نظام كشف لتقييم إيصال الجين غير ثابت داخل الأنسجة البشرية. الأسلوب يوفر وسيلة بسيطة وقابلة للتكرار من شرائح الأنسجة زراعة. انها لديها امكانات كبيرة لأنها تتيح دراسة توصيل الجينات إلى الخلايا البشرية السلي…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
وقد تم تمويل هذا العمل من خلال صندوق كورك جنوب مستشفى جامعة فيكتوريا في مستشفى الثدي ، وجمعية السرطان الأيرلندية (CRI07TAN) ومركز أبحاث السرطان كورك. وكان النسخ المتماثل غير كفء المؤتلف اتش 5 الجسيمات تحت سيطرة الترانسكربتي من المروج CMV هدية عينية من البروفسور أندرو بيكر ، من جامعة غلاسكو.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DMEM | Sigma-Aldrich | D6429 | ||
| PBS | Sigma-Aldrich | D8537 | ||
| Firefly Luciferin | Biosynth, Switzerland | |||
| Dermabond | Johnson & Johnson | |||
| Vibrotome | Leica microsystems | VT 1000 A |
Riferimenti
- van de Bovenkamp, M., Groothuis, G. M., Draaisma, A. L., Merema, M. T., Bezuijen, J. I., van Gils, M. J. Precision-cut liver slices as a new model to study toxicity-induced hepatic stellate cell activation in a physiologic milieu. Toxicol Sci. 85, 632-638 (2005).
- Speirs, V., Green, A. R., Walton, D. S., Kerin, M. J., Fox, J. N., Carleton, P. J. Short-term primary culture of epithelial cells derived from human breast tumours. Br J Cancer. 78, 1421-1429 (1998).
- Kirby, T. O., Rivera, A., Rein, D., Wang, M., Ulasov, I., Breidenbach, M. A novel ex vivo model system for evaluation of conditionally replicative adenoviruses therapeutic efficacy and toxicity. Clin Cancer Res. 10, 8697-8703 (2004).
- Josserand, V., Texier-Nogues, I., Huber, P., Favrot, M. C., Coll, J. L. Non-invasive in vivo optical imaging of the lacZ and luc gene expression in mice. Gene Ther. 14, 1587-1593 (2007).
