患者组织及基因传递考试前的体外培养
Summary
本文介绍了文化基因传递研究和基因表达的后续分析使用IVIS生物发光成像的患者的组织切片。
Abstract
本视频介绍了病人组织，利用体外基因传递的研究模型。新鲜病人在手术时获得的组织切片和保持文化。 体外模型系统可以完整的病人组织和使用IVIS检测系统通过生物 发光成像分析基因表达的基因进入实物交割。发光检测系统演示，而不需要为组织牺牲在个别切片基因表达的快速，准确的量化。这片组织文化系统可用于多种组织类型，包括正常的和恶性的组织，并允许我们研究的异质性和完整的组织，个别患者之间的变异程度高的影响。这个模型系统可用于在某些情况下，作为动物模型的替代性和互补的临床前模式进入临床试验之前。
Protocol
媒体和试剂的制备 抗生素溶液 磷酸盐缓冲液（PBS 200 U / ml青霉素，200μg/ mL链霉素，5微克/毫升fungizone） 收集和处理介质 贝科的改良Eagle培养基（DMEM）200 U / ml青霉素，200μg/ mL链霉素，5微克/毫升fungizone 培养基 收集培养基中含有10％热灭活胎牛血清一，组织收集和储存病人组织?…
Discussion
我们描述了一个前患者体内的组织培养方法和生物发光检测系统交付非固定的人体组织内的基因进行评估。该方法提供了一个简单，重复性的方式，培养组织切片。它有很大的潜力，因为它允许成各种人体组织，其中包括恶性组织成完整的人体组织的基因传递的研究，基因传递的分析和关于尊重个人的患者之间的变异程度高的影响，可以提供重要的信息基因的吸收。成功的转基因表?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
这项工作是通过科克南疗养院维多利亚大学医院乳腺基金，爱尔兰癌症协会（CRI07TAN）和科克癌症研究中心资助。复制不称职的重组腺病毒5 CMV启动子的转录调控下的粒子是一个样的礼物，格拉斯哥大学的教授安德鲁贝克。
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DMEM | Sigma-Aldrich | D6429 | ||
| PBS | Sigma-Aldrich | D8537 | ||
| Firefly Luciferin | Biosynth, Switzerland | |||
| Dermabond | Johnson & Johnson | |||
| Vibrotome | Leica microsystems | VT 1000 A |
Riferimenti
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Citazione di questo articolo
Rajendran, S., Salwa, S., Gao, X., Tabirca, S., O’Hanlon, D., O’Sullivan, G. C., Tangney, M. Ex Vivo Culture of Patient Tissue & Examination of Gene Delivery. J. Vis. Exp. (46), e2378, doi:10.3791/2378 (2010).