La reconnaissance de la transglutaminase épidermique par les IgA et Tissue Transglutaminase 2 anticorps dans un cas rare de Rhésus Dermatite
Summary
La dermatite herpétiforme (DH) est une maladie inflammatoire chronique caractérisée par une réaction auto-immune entre les IgA et épidermique transglutaminase (GTE). DH se développe dans une très petite partie des patients sensibles au gluten et / ou cœliaque. Les résultats de cette étude indiquent que la DH peut aussi se développer chez un hôte singe rhésus avec des symptômes de la dermatite idiopathique.
Abstract
2 transglutaminase tissulaire (tTG2) est une enzyme digestive intestinale qui deamidates déjà partiellement digérés alimentaires peptides de gluten par exemple la gliadine. Chez les individus génétiquement prédisposés, tTG2 déclenche les réponses auto-immune qui se caractérise par la production d'anticorps et leur tTG2 dépôt direct en 1,2 mur de l'intestin grêle. La présence de ces anticorps constitue l'une des caractéristiques majeures de la maladie cœliaque (MC). Epidermal transglutaminase (ETG) est un autre membre de la famille transglutaminase qui peut également fonctionner comme un autoantigène dans une petite minorité de patients CD. Dans ces cas relativement rares, ETG déclenche une réaction auto-immune (une éruption cutanée) cliniquement connu comme la dermatite herpétiforme (DH). Bien que le mécanisme exact de la pathogenèse de CD et de DH n'est pas bien comprise, il est connu que tTG2 et ETG épitopes antigéniques part qui peut être reconnue par les anticorps du sérum de patients atteints de CD et de DH 3,4 fois.
<p class = "jove_content"> Dans cette étude, l'examen de microscopie confocale d'échantillons de biopsie des lésions cutanées de deux macaques rhésus (Macaca mulatta) atteints de dermatite (Tableau 1, Fig. 1 et 2) a été utilisée pour étudier les tissus affectés. Chez un animal (EM96) un chevauchement spectral des anticorps IgA et tTG2 (Fig. 3) a été démontrée. La présence de doubles-positifs tTG2 + cellules + IgA a été concentré dans l'épiderme en profondeur, autour de la papille dermique. Ceci est cohérent avec les lésions décrites chez des patients DH 3. Lorsque EM96 a été placé sur un régime sans gluten, la dermatite, ainsi que tTG2 + IgA + dépôts ont disparu et ne sont plus détectables (fig. 1-3). Dermatite réapparu cependant, basée sur la réintroduction du gluten dans EM96 (non représentée). En d'autres macaques, y compris les animaux sans lien avec la dermatite, l'tTG2 + IgA + dépôts n'ont pas été détectés. Régime sans gluten dépendant rémission de dermatite dans EM96 avec présence de tTG2 + IgA + cellules de sa peau suggèrent une auto-immunes, comme le DH-mécanisme pour le développement de cette condition. C'est le premier rapport du DH-comme la dermatite de quelque primate non humain.Protocol
Discussion
Notre nouvellement établie non-humain modèle primate de la sensibilité au gluten a été utilisée récemment pour étudier les modifications de la perméabilité intestinale déclenchée par gluten 5,6. Plasma tTG2 anticorps ainsi que intestinale tTG2 + IgA + dépôts ont été détectés dans certains macaques sensible au gluten. Depuis que nous avons récemment identifié rares incidents de dermatite idiopathique dans la colonie de macaques rhésus, où aucune habitude (infectieuses / métabolique) éti…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Les auteurs tiennent à remercier Amanda Tardo, Dr Mostafa Bouljihad, Stéphanie Feely, Carol Coyne, le Dr Erin Ribka, le Dr Pete Didier et Dorothy Kuebler pour leur assistance technique. Ce travail a été soutenu par des subventions du NIH R01-DK076653 et 3R01-02S1-DK076653 à KS et la subvention de fonctionnement de base de l'TNPRC RR000164.
Materials
| Name of the reagent or equipment | Company | Catalogue Number / Product Code | Note |
| Anti-Human IgA-FITC * | Sigma, St. Louis, MO | F-5259 | 1:100 working dilution |
| Anti-Human tTG2 | Thermo Scientific, Kalamazoo, MI | MS-300-P1ABX | 1:100 working dilution |
| Anti-Mouse IgG1 ** | Invitrogen, Carlsbad, CA | A-21124 | 1:1,000 working dilution |
| ToPro-3 DNA probe *** | Invitrogen, Carlsbad, CA | T-3605 | 1:1,000 working dilution |
| Zinc Formalin (Z-fix) |
Anatech Ltd., Battle Creek, MI | 171 | |
| OCT Freezing Medium |
Sakura Finetek, Torrence, CA | 4583 | |
| Cytoseal Mounting Medium |
Richard-Allan Scientific, Kalamazoo, MI | 8312-4 | |
| Anti-Quenching Solution |
Sigma, St. Louis, MO | P 3130 | |
| Ethilon (Nylon Suture) |
Ethicon, Johnson & Johnson, Berkshire, UK | 663G | |
| Miltex Punch Dermal Biopsy Instrument | Miltex, York, PA | NA | |
| Oster Golden A5 Single Speed Vet Clipper with a size 40 blade | Oster Products, McMinnville, TN | 78005-050 | |
| Leica Tissue Processor | Leica Microsystems Inc., Buffalo Grove, KS | ASP300 | |
| Rotary Microtome | Microm International, Waldorf, Germany |
HM325 | |
| Cryostat | Thermo Scientific, Kalamazoo, MI |
HM560 | |
| Confocal Microscope | Leica, Wetzlar, Germany |
TCS SP2 |
* Fluorescein isothiocyanate
** Secondary (Alexa Fluor 568-conjugated) antibody used after tTG2 primary antibody
** Dye
Riferimenti
- Diosdado, B., Wijmenga, C. Molecular mechanisms of the adaptive, innate and regulatory immune responses in the intestinal mucosa of celiac disease patients. Expert. Rev. Mol. Diagn. 5 (5), 681-700 (2005).
- Schuppan, D., Dennis, M. D., Kelly, C. P. Celiac disease: epidemiology, pathogenesis, diagnosis, and nutritional management. Nutr. Clin. Care. 8 (2), 54-69 (2005).
- Sardy, M. Epidermal transglutaminase (TGase 3) is the autoantigen of dermatitis herpetiformis. J. Exp. Med. 195 (6), 747-757 (2002).
- Rose, C. Autoantibodies against epidermal transglutaminase are a sensitive diagnostic marker in patients with dermatitis herpetiformis on a normal or gluten-free diet. J. Am. Acad. Dermatol. 61 (1), 39-43 (2009).
- Bethune, M. Transepithelial transport and enzymatic detoxification of gluten in gluten-sensitive rhesus macaques. PLoS ONE. 3 (3), e1857-e1857 (2008).
- Mazumdar, K. Visualization of transepithelial passage of the immunogenic 33-residue peptide from α-2 gliadin in gluten-sensitive macaques. PLoS ONE. 5 (4), e10228-e10228 (2010).
- Schuppan, D., Junker, Y., Barisani, D. Celiac disease: from pathogenesis to novel therapies. Gastroenterol. 137 (6), 1912-1933 (2009).
- Hunt, K. Newly identified genetic risk variants for celiac disease related to the immune response. Nature Genet. 40 (4), 395-402 (2008).
- Abadie, V. Integration of genetic and immunological insights into a model of celiac disease pathogenesis. Annu. Rev. Immunol. 29, 493-525 (2011).
